Вивчення принципи роботи автоклава, апарату Коха, печі Пастера, термостата, бактеріальних фільтрів.
Автоклав - це металевий циліндр з подвійною стінкою, зовні покритий металевим кожухом. Він герметічес-ки закривається масивної кришкою за допомогою декількох гвинтів. На ньому встановлено манометр із запобіжним клапаном і паро-відвідний кран.
Перед стерилізацією в автоклав наливають через лійку з водо-мірним склом дистильовану воду до зазначеної на кожусі риси. У стерилізуючу камеру завантажують матеріал для стерилізат-ції, закривають щільно кришкою, загвинчують і включають джерело нагріву. При цьому пароотводную кран ос-тавляют відкритим. Утворений при кип'ятінні пар проходить між стінками автоклава і через отвори внутрішньої стінки потрапляє в камеру. При нагріванні з автоклава через пароотводную кран спочатку виходить повітря, а потім пар. Вихід оддихаючи сухого пара свідчить про повне витіснення віз-духу з автоклава: кран закривають, і з цього моменту в автоклаві починає поступово підвищуватися тиск, стрілка на манометрі піднімається. Початком сте-рілізаціі вважається той момент, коли стрілка манометра досягає потрібного давши-лення.
Показання манометра відповідає певній температурі пара в автоклаві: 0,50 МПа - 112 ° С, 0,1 МПа - 120, 0,15 МПа - 127, 0,2 МПа - 134 ° С.
Матеріал в автоклаві найчастіше стерилізують при 0,1 МПа протягом 20-30 хв. Після закінчення стерилізації відключають джерело нагріву (стрілка манометра поступово доходить до нуля). Після цього відкривають пароотводную кран, випускають залишок пара. Потім осто-рожно відгвинчують кришку і відкривають її. Після повного охолодження виймають простерилізувати матеріал.
В автоклаві можна стерилізувати посуд, інструменти, живильник-ні середовища (крім желатину і середовищ з вуглеводами), перев'язувальний матеріал і т. П. При роботі необхідно дотримуватися правил техніки безпеки. До роботи допускають осіб, які мають посвідчення на право користування автоклавом. Справність автоклава перевіряє інспекція котлонагляду.
Апарат Коха (рис. 4) - це металевий циліндр, обшитий зовні матеріалом (лінолеум, азбест), погано проводять тепло. На дно наливають воду, а що стерилізує матеріал поміщають зверху на підставку. Апарат закривають конічної кришкою, в якій є отвори для термометра і виходу пара. Внизу розташований кран для спуску води. Стерилізацію проводять текучим паром при 100 ° С протягом 30-60 хв. При такому режимі гинуть вегетативні клітини спороутворюючих і неспороутворюючих форм мікробів. Дробная стерилізація (триразова) по 30-60 хв протягом трьох днів з інтервалом 18-20 год дозволяє створити умови для проростання спор у вегетативні клітини і звільнитися від них. У проміжки часу між стерилізацією спори проростають і при подальшому прогріву-ванні гинуть. В апараті Коха стерилізують ті матеріали, які не витримують температуру вище 100 ° С (желатин, молоко, вуглеводні середовища та ін.).
Білкові середовища і сироватку крові, що не переносять температуру 100 ° С, стерилізують дрібно при 56-58 ° С на водяній бані.
Сушильну шафу (піч Пастера) (рис. 5) - це металевий двостінний шафа, покритий зверху азбестом. У верхній стінці є отвори для термометра і вентиляції. Нагріте повітря піднімається знизу між стінками і через верхній отвір попа-дає всередину шафи, де на полицях розміщений стерилізується матеріал. Стерилізацію проводять сухим жаром при 150 "С протягом 2 год, при 165-170 ° С - 45 хв, при 180 ° С - 15 хв. В печі Пастера стерилізують скляний посуд. Після стерилізації шафа відключають від источни-ка нагріву і відкривають тільки після повного охолодження.
Бактеріальні фільтри використовують для стерилізації рідини без нагрівання. До них відносяться свічки Шамберлана, Берке-Фельд і азбестові фільтри (пластинки) Зейтца.
Фільтрувальні свічки (рис. 6) представляють собою порожнисті ци-Ліндрен, виготовлені з дрібнопористих речовин: каоліну з при-месью кварцового піску (свічки Шамберлана) і інфузорної землі (свічки Беркефельда). Свічки Шамберлана мають різної величини пори, через які проходять мікроби. Свічки, пропускають великі бактерії, позначені буквами L9, L1 (bis), L3, середні - L5, L7, найдрібніші - L9, L11, L13 Свічки Беркефельда по пористості позначення-ються W, N, V (найбільші пори у свічок з маркою У).
Фільтри Зейтца є азбестові пластинки раз-особистої величини. При монтуванні приладу для стерилізації пластинку поміщають на сітку між металевими дисками (з отвором в середині), які щільно притискають один до одного гвинтами. Змонтований фільтр вставляють через пробку в колбу з бічної отводкой (колба Бунзена) і гумовою трубкою, обгортають папером і стерилізують в автоклаві при 120 ° С протягом 20-30 хв.
Для фільтрування матеріалу створюють розрідження в колбі Бунзена-на, під'єднуючи до неї гумову трубку з розріджується масляним ручним насосом Комовского або електровакуумним насосом.
Виконання роботи. Мікроби культивують при оптимальних температурних режимах. Для цього в лабораторіях використовують воз-задушливі або водяні термостати.
Термостат (рис. 7) являє собою металеву шафу з подвійними стінками, між якими знаходиться шар води або повітря. Зовнішня частина термостата покрита матеріалом, погано проводять тепло (азбест, лінолеум).
Автоклав, апарату Коха, піч Пастера, термостат, бактеріальні фільтри - 4.0 out of 5 based on 5 votes