Один з головних питань, яке вирішує провідний протокол ЕКЗ лікар - коли повернути вирощені в штучному середовищі ембріони в природні умови матки. Дослідження по визначенню дня «Х» проводяться вже понад три десятиліття. Накопичено велику кількість статистичної інформації, випробувано безліч допоміжних технологій, але вибір дня, на який переносити ембріони. все ще залишається багато в чому питанням інтуїції, а не знань.
У деяких клініках яйцеклітини повертали в організм жінки відразу після запліднення - вважалося, чим менше часу ембріон проводив в неприродній для себе середовищі, тим краще. Дослідним шляхом з'ясували, що умови в матці не підходять для тільки почав розподіл ембріона. Тому практикувалася процедура GIFT - перенесення гамет в фаллопієві труби. Під час такого протоколу яйцеклітини і сперматозоїди поверталися в маткові труби і потрапляли в максимально комфортні для себе умови для запліднення і природного розвитку. Такий підхід давав хороші результати, так як на той момент середовища для культивації ембріонів були примітивні. Хоча масове застосування методу пішло в минуле, в наші дні GIFT застосовують для пацієнток, які мають проблеми з розвитком ембріонів в перші дні після запліднення. Близька за змістом до неї процедура ZIFT - перенесення зигот в фаллопієві труби на другий день після запліднення.
Перша середовище, що дозволяє доращивать ембріон до стадії бластоцисти, створена Жаком Коеном (Jacques Cohen) співтовариші в Англії в 1985 році. Незважаючи на те, що кількість вагітностей після переносабластоціст збільшилася, вимоги до культивації були такими складними, що лише деякі клініки змогли відтворити необхідні умови. В кінці 80-х - початку 90-х ця ж група в Cornell Medical Center стала першою, яка практикує пересадку на третій день. Можливість спостерігати розвиток заплідненої яйцеклітини протягом тривалого часу разом з дослідженням морфології під мікроскопом дозволила групі Коена виявляти ембріони з високим імплантаційним потенціалом. Застосування цих напрацювань і таких допоміжних технологій, як хетчинг. привело до стрибкоподібного збільшення кількості вагітностей на початку 90-х років спочатку в клініці Коена, а після відпрацювання технологій і повсюдно.
Зростання імплантацій в цілому викликав і збільшення кількості імплантацій декількох ембріонів. Тому провідні клініки почали зменшувати кількість підсаджуються ембріонів для скорочення числа багатоплідних вагітностей. Важливо було зменшити число яйцеклітин без зниження показника наступили вагітностей. Розробили два підходи до проблеми. У першому - ембріони культивувалися довше трьох днів, щоб отримати більше інформації про якість матеріалу для підсадки. У другому підході досліджувалася кореляція між окремими мікроскопічними характеристиками ембріонів на різних стадіях розвитку і подальшої імплантацією і вагітністю. Отримані закономірності використовуються в доборі матеріалу для підсадки в усіх сучасних клініках.
У другій половині 90-х років вчені були зайняті підбором середовища для вирощування ембріонів до стадії бластоцисти. В кінцевому підсумку Девід Гарднер (David Gardner) спільно з Біллом Скулкрафт (Bill Schoolcraft) розробили перші промислові середовища для бластоцист з послідовним використанням.
Інші групи дослідників зосередилися на визначенні основних характеристик при розподілі ембріона, які б свідчили про високий імплантаційному потенціал. Важливість обліку нормального вигляду пронуклеусов на стадії зиготи, ділення без запізнень, наявності одного ядра в бластомерах і мінімальної кількості фрагментованих клітин підтвердилася зростанням наступили вагітностей в наступні роки. Все це дозволило зменшити кількість переносите ембріонів і ризики, пов'язані з веденням багатоплідних вагітностей.
Але, незважаючи на успіх, є причини уникати культивування бластоцист. Застосування цього методу, як і більшості допоміжних репродуктивних технологій, залежить від анамнезу пацієнтки і якості отриманого матеріалу для імплантації. Д. Гарднер провів ряд досліджень і показав, що протокол п'ятого дня відмінно спрацьовує тільки з певними групами пацієнток. І навпаки, якщо застосувати метод з бластоцисти до випадково обраним жінкам, то кількість вагітностей не збільшиться.
День 3 або день 5: нині
Незважаючи на триваючі дослідження, найпередовіші середовища для вирощування ембріонів все ще не повністю імітують природні умови. Тому вирощування матеріалу до стадії бластоцист - своєрідний тест на їх виживання. З кращих ембріонів, відібраних на третій день для продовження культивування, лише 40% продовжують розвиток на п'ятий день.
Вироблені критерії відбору пацієнток для входження в протокол по підсадженні бластоцист.