Біохімічні та імунологічні аспекти застосування пробіотика "Канігест" на основі Enterococcus faecium молодим собакам різних порід.
Невід'ємною частиною організму ссавців є мікроорганізми, які заселяють ротову порожнину, шлунково-кишковий тракт, шкіру і піхву, інші органи. Такий симбіоз необхідний для нормального гомеостазу макроорганізму, його розвитку та життєдіяльності. Еволюційно сформовані симбіози у жуйних, моногастричних травоїдних, всеїдних і м'ясоїдних тварин істотно відрізняються за видовим складом мікроорганізмів, наприклад, в кишечнику і є по-своєму унікальною складовою у кожного виду тварин.
Вивчення мікрофлори фекалій здорових тварин, а також зміни в співвідношенні окремих груп або видів бактерій в кишечнику залишається актуальним до теперішнього часу. При цьому порушення в мікробному пейзажі фекалій і відповідно в шлунково-кишковому тракті є дисбактеріозом або дисбіозом.
Корекція дисбіотичних порушень кишечника сприяє розвитку відновлювальних механізмів в організмі в цілому, підвищує імунітет і резистентність.
Метою дослідження було вивчення впливу пробіотика CANIGEST, до складу якого входять мікроорганізми Enterococcus faecium SF68, на місцевий імунітет кишечника і на резистентність цуценят в період зростання і розвитку після відлучення.
Дослідження проводили на 24 собаках місячного віку порід лабрадор, манчестерський тер'єр, гончак, бігль, фокстер'єр, відразу після відлучення від їхніх матерів. Цуценят брали з одного посліду, розподіляли порівну в піддослідну і контрольну групи, підбирали однакову кількість псів і сук. Тварини перебували в однакових умовах утримання та годівлі. Цуценята були розміщені по парам у вольєрах. Тривалість спостережень склала 44 дня.
Після відлучення у віці 8 тижнів, в кожну групу відокремили по 7 цуценят. У піддослідній групі цуценятам додатково призначали пробіотик на основі Enterococcus faecium (NCIMB10415; SF68) в кількості 5х108 КУО / г. Щотижня вимірювали масу тіла, брали проби корму. Проби крові відбирали на 10,18,31 і 44 тижні експерименту. Всі собаки були вакциновані живою ослабленою вакциною проти чуми собак підшкірно у віці 9 тижнів з ревакцинацією в 12 тижнів.
Було встановлено, що додавання живий пробіотичної культури в раціон збільшувало резистентність піддослідних тварин. В результаті застосування пробіотика побічних ефектів у цуценят не виявляється.
Секреторний Ig A в кишечнику є одним з найважливіших захисних факторів гуморального імунітету слизової оболонки. Основними функціями є захист від адгезії, колонізації і проникнення транзиторних мікроорганізмів і антигенів корми через слизовий бар'єр. Збільшення вмісту поліклонального Ig A в фекальних масах, мабуть, відігравало безпосередню роль в становленні неспецифічної антіентеропатогенной захисту організму собак, а отже і резистентності їх організму.
Застосування пробіотика до, під час і після вакцинації дозволило оцінити вплив пробіотика на імунну відповідь при вакцинації проти чуми собак. Достовірних відмінностей в кількості загального Ig G в плазмі піддослідних і контрольних тварин не спостерігали. При цьому, кількість специфічного підкласу CDV Ig G було достовірно вище у цуценят, які отримували пробіотик і підтримувалося на виявленому високому рівні до закінчення досліджень. Специфічний CDV- Ig G ні виявлено перед вакцинацією (в перший тиждень експерименту), а його надходження з колостральной антитілами було виключено. Це дозволяє стверджувати, що застосування пробіотика сприяло збільшенню кількості специфічних антитіл підкласу CDV Ig G.
На відміну від загальної кількості Ig G, загальний рівень Ig A був значно вище (р<0,01) у щенков, получающих культуру SF68. Количество специфичных антител к вирусу чумы собак было также было увеличено. Это можно расценивать как усиленный синтез Ig A плазматическими клетками, что также является следствием усиленной выработки пристеночного IgA-производства. Живая ослабленная вирус-вакцина, хотя и является слабо вирулентной, возбудитель которой способен размножаться в организме собак и запускать иммунный ответ. Это взаимодействие, вместе с чрезвычайно активизированными моноцитами, найденными в крови щенков, получавших пробиотик SF68, усиливало иммунный ответ после вакцинации животных.
Аналіз FACS показав достовірне підвищення кількості зрілих B-лімфоцитів (CD 21 + / MHC II). Що відповідало збільшення Ig A в фекальних масах і в плазмі крові. Це виявляли на 44 тижні досліджень в піддослідній групі собак. Навпаки, кількість T-лімоцітов було однаковим в обох досліджених групах.
Була оцінена здатність культури SF68 колонізувати кишечник собак. Присутність SF68 в калі піддослідних тварин було підтверджено у всіх собак (n = 14) в кінці досвіду. Ендогенний мікробний пейзаж не зазнавав значних змін після застосування пробіотика, в той же час в фекального вмісті була виділена життєздатна культура SF68 в кількості 107-108 КУО / г, тобто пробиотик здатний зберігатися і розмножуватися в кишечнику собак.
Резюмуючи результати досліджень можна стверджувати, що застосування пробіотика Enterococcus faecium SF68 підвищувало резистентність на місцевому та системному рівні, а також активізувало імунну відповідь собак при вакцинації, сприяв кращій адаптації в період відлучення, при стресових ситуаціях раннього віку.