Поділ цільної крові проводять шляхом осадження формених елементів, яке відбувається в результаті її 24-годинного зберігання при + 4 ° С або центрифугування (1500 об. / Хв протягом 25 хв).
1. Еритроцитів і взесь
Еритроцити (ЕМ) являє собою еритроцити відокремлені від плазми. За своїми лікувальними властивостями ЕМ рівноцінна еритроцитів консервованої крові. За зовнішнім виглядом ЕМ відрізняється від донорської крові лише тим, що має менший обсяг плазми над шаром осіли клітин. Іншими словами, ЕМ є концентратом еритроцитів з гематокритное числом 65-80%.
Заготівля ЕМ проводиться таким чином. Спочатку заготовлюється донорська кров. Потім її центрифугують або відстоюють. Після цього пробку флакона необхідно проколоти двома голками (одна голка служить для відведення повітря з флакона, а через іншу відбувається евакуація плазми). Всі маніпуляції із заготівлі ЕМ виробляються в строго асептичних умовах в боксувати операційної. ЕМ заготовляють як у флакони, так і в пластикові мішки.
Для паспортизації на флакон або мішок наклеюють етикетку.
ЕМ зберігають в звичайному холодильнику при температурі +4. + 6 ° С не більше 3 тижнів. Перед видачею ЕМ з експедиції проводиться контроль її придатності для переливання: шар плазми над еритроцитами повинен бути прозорим (абсолютно не має бути ниток фібрину, згустків, каламуті).
Ерітроцітная суспензія (ЕВ) являє собою ЕМ, ресуспендувати в розчині плазмозамінники. Зазвичай в якості ресуспендіруют розчину використовується ЦОЛІПК-8. Співвідношення ЕМ і розчину повинно бути 1: 1. Зберігати ЕВ можна до 2 тижнів.
Протипоказання до застосування ЕВ і ЕМ:
· Масивна крововтрата (більше 40% ОЦК);
· Тромбоемболії різного генезу;
· Придбана гемолітична анемія.
Методика застосування еритроцитної суспензії і еритроцитної маси
По-перше, перевіряється герметичність флакона з ЕВ і ЕМ, правильність паспортних даних на етикетці. Проводиться макроскопічний огляд трансфузійної середовища (тобто повторюється індивідуальний контроль придатності її для переливання). Вміст флакона не повинно бути мутним, в ньому не повинно бути згустків і ниток фібрину.
По-друге, визначається групова належність ЕМ, група крові хворого і проводиться проба на сумісність еритроцитів донора і сироватки реципієнта. Трансфузія проводиться з використанням одноразової системи. Перед початком переливання обов'язково робиться біологічна проба.
Трансфузія ЕМ може проводитися як крапельно, так і струменевий. Якщо необхідно збільшити швидкість вливання, то перед трансфузией можна додати у флакон або мішок 30-50 мл ізотонічного розчину хлориду натрію.
2. лейкоцитів
Як вже говорилося раніше, проблема збереження морфологічної структури і функціональних властивостей лейкоцитів досить актуальна. В силу того, що лейкоцити є складними ядерні клітини, схильними до адгезії і незворотною агрегації, загибель їх в процесі зберігання відбувається протягом декількох днів. Такий короткий термін зберігання лейкоцитів обумовлений, в першу чергу, виснаженням їх енергетичного потенціалу. Виходячи з цього стає зрозумілим, чому для трансфузій застосовують ЛМ або свежезаготовленной, або з терміном зберігання не більше 1 сут.
Методи отримання лейкоцитів для трансфузій
ЛМ для трансфузій можна отримати декількома методами:
· Шляхом зняття лейкоцитной плівки після центрифугування цільної крові і видалення плазми;
· Шляхом фільтраційного лейкоцітаферез - фільтрацією гепаринизированной крові через нейлонові фільтри з наступним відмиванням з них лейкоцитів;
· Шляхом лейкоцітаферез із застосуванням автоматичних сепараторів безперервної дії - в цьому випадку апарат за допомогою 2 голок підключають до вен донора на 3-4 ч. Кров, що забирається у донора центрифугируется - лейкоцити евакуюються в пластикатної мішок, а еритроцити і плазма повертаються донору.
Зберігання лейкоцитів
Якщо ЛМ не береться кріоконсервації, то вона повинна бути перелита реципієнту в той же день, в який була заготовлена. Про причини цього ми говорили вище. Якщо ж необхідно зберігати ЛМ більш тривалий час, то для цього найбільше підходить заморожування при ультранизьких температурах (-196 ° С). На відміну від еритроцитів лейкоцити не переносять швидкого охолодження. Тому заморожування проводиться за спеціальною програмою, яка полягає в тому, що зниження температури відбувається поступово (по 3 ° С в 1 хв протягом всього циклу заморожування). Такий метод консервування дозволяє зберегти лейкоцити довго - до декількох років.
При необхідності контейнери з ЛМ піддаються розморожування. Цей процес відбувається на водяній бані при температурі + 39 ° С Така порівняно висока температура відтавання дозволяє уникнути пошкодження клітин через рекристалізації (яка зазвичай має місце при повільному нагріванні контейнера).
Методика трансфузии лейкоцитів
Методика переливання ЛМ по суті мало відрізняється від методик переливання інших трансфузійних середовищ і, зокрема, компонентів крові. Для переливання ЛМ використовуються стандартні одноразові системи, забезпечені капронових фільтром.
Швидкість трансфузии ЛМ становить 30-40 крапель в хвилину.
Підбір ЛМ здійснюється по системам АВ0 і Rh. Також необхідно проводити визначення сумісності лейкоцитів донора і реципієнта по головному комплексу гістосумісності (HLA).
Терапевтична доза ЛМ становить 1 # 63; 10 10 -4 # 63; 10 10 кліток. Для прояву ефекту терапевтична доза ЛМ повинна переливатися щодня не менше 3-4 днів поспіль.
3. тромбоцитів
Критичний рівень тромбоцитів, при якому можуть виникати спонтанні кровотечі, становить 30 # 63; '10 9 / л і менше. Займаючи в судинах крайове положення, тромбоцити виконують ангиотрофическая функцію - вони підтримують нормальну структуру і функцію стінок судин. Тромбоцити створюють відому перешкоду для проходження еритроцитів через капілярну стінку, при пошкодженні судинної стінки виділяють ряд факторів, що згортають крові (тромбопластин, серотонін, ретрактозім і ін.), Які впливають на ретракцію кров'яного згустку і сприяють забезпеченню надійного первинного гемостазу. Тромбоцити підтримують спазм пошкодженогосудини шляхом секреції вазоактивних речовин (серотонін, адреналін, норадреналін і т.д.), які сконцентровані в спеціальних гранулах.
Методи отримання ТМ для трансфузій
Для отримання ТМ використовуються наступні методи:
· Диференційоване центрифугування - виділення ТМ з цільної консервованої донорської крові;
· Плазма-тромбоцітаферез - виділення ТМ з збагаченої плазми:
· Тромбоцітаферез із застосуванням автоматичних сепараторів.
Найбільш оптимальним методом безумовно є останній в силу того, що дозволяє отримати від одного донора до 10 # 63; 10 10 -60 # 63; 10 10 тромбоцитів.
ТМ можна зберігати в двох температурних режимах. Це залежить від того, як швидко необхідно отримати гемостатичний ефект і як довго його потрібно підтримувати. Так ТМ, що зберігається при кімнатній температурі, після трансфузии надає відстрочений гемостатичний ефект, а ТМ, що зберігається при + 4 ° С, дає порівняно швидкий гемостатичний ефект. У першому випадку значно подовжуються терміни циркуляції тромбоцитів, а в другому випадку терміни коротшають і приживлюваність тромбоцитів зменшується.
На підставі цього в клінічній практиці знайшла застосування ТМ, що зберігалася не більше 24 годин при кімнатній температурі або при температурі + 4 ° С.
Методика переливання ТМ
Для переливання використовується одноразова система з капронових фільтром.
Перед трансфузией проводиться проба на індивідуальну сумісність. Підбір ТМ для переливання - як зазвичай, по системам АВ0 і Rh.
ТМ переливається внутрішньовенно крапельним способом.
Після виходу крові з кровоносного русла вона згортається, утворюючи згусток і рідина світло-жовтого кольору - сироватку. Якщо ж її помістити у флакон з консервирующим розчином, то вона не згортається і при відстоюванні на дно осідають формені елементи, а над ними залишається рідка частина крові - плазма.
Плазма крові є внутрішньою рідким середовищем організму, що містить композицію різних за складом і властивостями біологічно активних речовин (білкових, вуглеводних, ліпоїдних і інших з'єднань), що визначає важливу роль плазми в забезпеченні життєдіяльності людини (Гаврилов O.K. Русанов В.І. 1979).
Плазма має жовтуватий колір і за обсягом займає майже половину всієї маси крові. Співвідношення формених елементів і плазми визначається показником гематокриту. У здорової людини гематокрит дорівнює 45. Таким чином, 45% всього обсягу (але 50% за масою) крові складають формені елементи, а решта припадає на частку плазми.
Плазма містить близько 90% води, 7-8% білка, 1,1% органічних речовин, що не відносяться до білків, і 0,9% неорганічних сполук. Вона здійснює в організмі безліч функцій: переносить по всіх тканинах формені елементи, доставляє з травної системи вуглеводи, амінокислоти, продукти розпаду жирів, за допомогою плазми токсичні продукти виділяються через нирки, в ній знаходяться антитіла, які здійснюють захисну роль, плазма забезпечує різні органи гормонами.
Плазма крові (Plasma sanguinis) представляє 7-8% колоїдний розчин суміші білків: альбуміну, альфа-, бета- і гамма-глобулінів, фібриногену, а також їх комплексів з ліпідами і вуглеводами (липо- і глікопротеїдів), рН »7. Плазма значною мірою - універсальний лікувальний засіб. У клінічній практиці в основному застосовують суху плазму, рідше - заморожену і нативную. Терапевтичний ефект плазми заснований не тільки на дезінтоксикаційну, але і статичній дії, на корекції білкової недостатності. Усунення білкового дефіциту і відповідно підвищення онкотичного тиску в крові сприяють усуненню набряків, посилення діурезу. Разом з тим слід підкреслити, що в зв'язку з тривалим періодом напіврозпаду плазмових білків плазма не є джерелом парентерального харчування.
Трансфузии плазми призначають для заміщення плазмовтрати як дезінтоксикаційну засіб. Переливання плазми показано при виразковій хворобі шлунка і дванадцятипалої кишки, а також з гемостатичну метою, з урахуванням того, що в плазмі містяться фактори згортання.
Особливо показана трансфузія плазми (до 1-2 л) при опікової хвороби, так як спостерігається значна плазмопотеря, яку необхідно заповнювати.
У клініці плазму широко застосовують при вірусних гепатитах, особливо при переході процесу в хронічну форму, при затяжному перебігу кишкових інфекцій різного походження, геморагічному синдромі, септичних станах, розвитку інфекційних хвороб у виснажених хворих, а також з метою корекції дефіциту плазмових білків при гіпопротеїнемії різного походження . У відділеннях інтенсивної терапії плазму застосовують з метою дезінтоксикації при інфекційно-токсичному шоці, печінкової прекомі і комі (при відсутності гіперазотемію!), Набряку-набуханні головного мозку, набряку легенів.
Плазму випускають у флаконах по 100, 200, 300 мл. Вводять внутрішньовенно (основний метод), внутрішньоартеріально, в кістковий мозок, підшкірно. З метою забезпечення дезинтоксикационного і стимулюючої дії показані краплинні внутрішньовенні інфузії плазми (50-100-200 мл) з інтервалами 3-4-5 днів. При призначенні плазми з замісної метою її вводять струйно в досить великих обсягах, зазвичай у поєднанні з поліглюкін. При особливо вираженою гипопротеинемии призначають до 300-400 мл, інфузію повторюють кожні 2 дні. З метою досягнення гемодинамічного ефекту сумарна доза визначається станом хворого: вона повинна забезпечувати стійке підвищення артеріального тиску вище критичного рівня (90 мм рт. Ст.). Хворим з ознаками набряку-набухання головного мозку, набряку легенів з метою дегідратації показано введення концентрованої плазми, тобто сухої плазми, розведеною в 2-4 рази менших обсягах рідини.
Переливання плазми, як правило, переносяться добре. При введенні малих і середніх доз немає необхідності в перевірці групової та резус-сумісності. При масивних переливаннях вона обов'язкова, проводиться також триразова біологічна проба. З метою попередження розвитку посттрансфузійного гепатиту при заготівлі плазми обов'язкове перевірка донорів на наявність в крові австралійського антигену (HBs Ag).
Переливання плазми протипоказані при виявленні у хворих явищ гіперкоагуляції і підвищеної сенсибілізації до парентерального введення білка.