Лабораторна діагностика репродуктивного та респіраторного синдрому свиней - студопедія

Репродуктивний і респіраторний синдром свиней (РРСС, "синє вухо, блакитний аборт", епізоотичний пізній аборт свиней) - вірусне контагіозне захворювання головним обра-зом свиноматок, що характеризується абортами, наявністю мертвонароджених поросят, передчасними опоросами або затримкою опоросу, респіраторними порушеннями, появою фарбування шкіри вух і інших органів. Реєструється в багатьох країнах.

Діагноз на РРСС ставлять на підставі клініко-епізоотологічних даних і результатів лабораторних досліджень. Лабораторна діагностика заснована на виділення вірусу, серологічних дослідженнях. Для виділення вірусу використовують сироватку або плазму крові хворих і полеглих поросят, проби легень, селезінки, плевральної і перикардіальної рідко-сти. Виділення вірусу проводять в культурах альвеолярнихмакрофагів, отриманих від мо-лодих (6-8 тижні) СПФ-поросят. Успіх голландських вчених і пояснюється перш за все тим, що вони використовували цю культуру, в той час як культури клітин РК-2, РК-15 і К-6 оказа-лись не чутливі для виділення збудника. Ідентифікацію збудника проводять за фізико-хімічними та серологічним властивостям. З серологічних методів використовують спочатку непрямий метод ІФ і прямий метод ІФА. У США для ідентифікації збудника використовували РН, розроблену з цим вірусом в університеті штату Міннесота, а також ІФ та ІФА, розроблені в національній лабораторії Аmes в шт. Айова. У Франції розроблений непрямий метод ІФА для виявлення специфічних АТ. Сероконверсія в ді-агностичний титрах (1:20 і вище) розвивається до 14-му дн після експериментального інфи-цірованія, а до 28-му дн титри антитіл накопичуються до 1: 1280. Розроблено методику очищення і концентрування культурального вірусу РРСС, репродукованого в культурі клітин МАРС-145 і FL. Попередньо віруссодержащего суспензія очищається від баласт-них білків низькошвидкісним центрифугуванням, потім концентрується 2-кратним осажен-ням ПЕГ мол.м. 6000 і очищається високошвидкісним центрифугуванням (7000 хв-1 протягом 6 ч). У градієнті щільності СsС1-сахарози матеріал концентрували в 100 разів. Очищення становила 96,5%. Всі етапи підготовки препаратів контролювали за активністю в ІФА. Високоспецифічні активні препарати АГ вірусу РРСС використовують для виготов-лення АТ діагностикумів для ІФА. Метод непрямої ІФА простіший і його можна використовувати в польових умовах. Досить досліджувати з стада 10 проб сироваток, (краще парних), щоб з упевненістю поставити лабораторний діагноз.

У РФ розроблений твердофазний ІФА, для проведення диагно-стики РРСС, складені набори діагностикумів для виявлення РРСС і специфічних АТ. МонАТ до вірусу РРСС можуть бути використані як для виявлення АГ вірусу РРСС в патологічному матеріалі, так і для визначення АТ в сироватках крові свиней, так як вони дають більш специфічну реакцію в порівнянні з поліАТ.

При диференціальної діагностики необхідно виключити вірусні та бактеріальні хвороби, що протікають з порушеннями в репродуктивних системах, а також отруєння. Іс-полягають перш за все АЧС, КЧС, БА, грип свиней, ЕМК, ПАРВОВІРУСНИЙ хвороба, ТГЕ, лептоспіроз і хламідіоз. Характерною особливістю цієї хвороби є загострення вто-ковий і хронічно протікають інфекцій, збудники яких можуть таємно циркулі-ровать в уражених стадах свиней. Це ще більше ускладнює проведення лабораторної диференціальної діагностики.

Лабораторна діагностика cіндрома "блакитне око" свиней

Синдром "блакитне око" свиней (СГГС) хвороба, що виявляється кератокон'юнктивітом з блакитним забарвленням рогівки, порушенням нервової системи, зниженням репродуктивності, високою загибеллю поросят. Реєструється в багатьох країнах.

Діагностика заснована на клініко-морфологічних даних, гісто-і вірусологічних досліджень-пах. Для ізолювання вірусу суспензію з головного мозку, лімфовузлів глотки і легенів, підозрюваних особин, інокуліруют в первинну культуру клітин нирки поросяти (або, перевивали культуру клітин РК-15). Моношар кожні 24 год переглядають для вияв-вання синцития. Специфічність ЦПЕ підтверджують в РДА і гемадсорбції з еритроцита-ми різних тварин, а також ЕМ і МФА (останній застосовують також для прямого обна-ружения вірусспецифічного АГ вірусу в клітинах зрізів органів, заморожених в криостате). Для визначення вирусспецифических AT використовують РЗГА, РН і ІФА.

Відомо, що у свиней помутніння рогівки зустрічається дуже рідко, його спостерігають у окремих тварин при травмах, авітамінозі А і експериментальному зараженні ВБА. БА має з СГГС подібні клінічні ознаки, при ній також уражаються ЦНС, легені, репродуктивні органи, але ВБА індукує утворення внутрішньоклітинних включень, а головною ознакою можуть служити аборти. Слід пам'ятати, що помутніння рогівки при природному перебігу БА ніколи не спостерігається. До того ж ВБА є ДНК-і має багато відмінностей від збудника СГГС (наприклад, при інокуляції кро-ликів викликає енцефаліт і загибель).

Синдром "блакитне око" має також схожість з енцефалітом, визивемим ГА вірусом, але помутніння рогівки при цьому відсутня. ГА-вірус, до того ж, не агглютинирует еритроцити коня, з працею культивується в культурах клітин (за винятком привчає-ної нирки свині), величина його становить 80-120 нм.

За деякими ознаками СГТС має схожість і з іншими хворобами, парвовирусной інфекцією (уражаються генітальні органи самок); грипом (респіраторні органи); з хворобами, що перебігають з нервовим синдромом (класична чума свиней, ентеровірусна інфекція, колибактериоз і ін.). Всі ці патології слід диференціювати від син-Дром "блакитне око".