- визначення кількості гемоглобіну,
- визначення кількості еритроцитів і
- лейкоцитів в 1 ММЗ крові,
- підрахунку лейкоцитарної формули,
- колірного показника, а також
- визначення швидкості осідання еритроцитів (ШОЕ).
Рідше приєднують підрахунок ретикулоцитів, тромбоцитів.
Для морфологічного дослідження досить тієї кількості крові, яке можна отримати з уколу в палець.
Техніка взяття крові
Дослідження крові слід завжди проводити в один той час при однакових умовах, до прийому їжі. Кров беруть з IV пальця лівої руки. Перед уколом палець дезінфікують і знежирюють, протираючи його ватою, змоченою спиртом, а потім
ефіром або їх сумішшю. Прокол виробляють або стерилізованим скарифікатором, або голкою Франка зі змінними стерилізується лезами. Укол зазвичай проводиться в верхівку м'якоті перший фаланги на глибину 2,5 - 3 мм. Отриману після уколу першу краплю знімають фільтрувальної папером або ватою, змоченою ефіром. Кров для дослідження беруть в певному порядку: для
визначення ШОЕ, гемоглобіну, потім - для підрахунку лейкоцитів і еритроцитів; роблять мазки. Після взяття крові, м'якоть пальця обертається змоченою ефіром або спиртом ватою і притискається до долоні для того, щоб зупинити кровотечу.
Визначення швидкості осідання еритроцитів (ШОЕ)
Устаткування і реактиви:
1. Апарат Панченкова.
2. Капіляри Панченкова.
3. 5% розчин лімоннокіслого натрію (свіжоприготований).
4. Годинний скло.
5. Голка Франка або скарифікатор.
Апарат Панченкова складається з штатива з капілярами (12 шт.) Шириною 1 мм, на стінці яких нанесені поділки від 0 (зверху) до 100 (знизу). На рівні 0 є буква К (кров), а на середині піпетки, біля позначки 50 - буква Р (реактив).
У капіляр Панченкова набирають 5% розчин лімоннокіслого натрію до позначки 50 (літера Р) і видувають на годинне скло. З уколу пальця, тримаючи капіляр горизонтально, набирають кров до мітки 0 (Буква К). Потім видувають кров на годинне скло з лімоннокіслим натрієм, після чого вдруге набирають кров до мітки 0 і випускають додатково до першої порції.
Отже, на годинному скельце є співвідношення цитрату і крові, рівне 1: 4. т. е. чотири обсягу крові в один обсяг реактиву. Перемішують кров кінцем капіляра, набирають її до позначки 0 і ставлять в апарат Панченкова строго вертикально. Через годину відзначають число міліметрів стовпчика плазми.
Оцінка отриманих даних:
У нормі ШОЕ дорівнює для чоловіків 4-10 мм, для жінок 4-15 мм за годину.
Визначення вмісту гемоглобіну
Устаткування і реактиви:
1. Гемометр Салі.
2. Піпетка від гемометра Салі.
4. Дистильована вода.
6. Скляна паличка.
7. Голка Франка або скарифікатор.
Для кількісного визначення гемоглобіну користуються зазвичай колориметричним способом. Принцип визначення полягає в перетворенні гемоглобіну крові в солянокислий гематин і порівнянні кольору отриманого з наявним в приладі стандартом. Приладом для визначення служить гемометр Салі. Він складається з двох запаяних
пробірок зі стандартною кольоровий рідиною 1% розчин солянокислого гематина в гліцерині), що містить 16,67 г% гемоглобіну (16,67 г на 100 мл крові). Між ними розташована градуйована пробірка, що має дві шкали. Одна - з поділками від 0 до 23 служить для визначення гемоглобіну в грамах на 100 мл крові, т. Е. В грам відсотках; інша шкала з поділами від 0 до 140 показує одиниці гемоглобіну (відсоток гемоглобіну).
Оцінка отриманих даних:
Визначення кількості еритроцитів і лейкоцитів
Устаткування і реактиви:
1. змішувачі (меланжери) або пробірки для підрахунку еритроцитів і лейкоцитів.
2. 3% - розчин NaCl (для розведення еритроцитів) або рідина Гайема.
3. 3% розчин оцтової кислоти.
4. Рахункова камера.
Змішувачі являють собою капілярну піпетку з розширенням ампулою, містить намистинку, що сприяє змішання крові з розводящий рідиною. Змішувачі, призначені для підрахунку еритроцитів, мають капілярів тоншого калібру і більш об'ємистої ампулою на них нанесені мітки одна - 0,5 інша - перед входом в ампулу - 1.0, третій - біля виходу з ампули - 101.
При набору крові до позначки 0,5 вона виявиться розведеною в 200 разів, при досягненні до 1,0 - в 100 разів. Для розведення еритроцитів застосовують 3% розчин кухонної солі або рідина Гайема, в якій краще зберігається форма еритроцитів. Змішувач для лейкоцитів має більш широкий просвіт капіляра і меншу за величиною ампулу. Нанесені три мітки: 0,5. 1,0 і 11. Це дозволяє розвести кров у 10, або в 20 разів (найчастіше розводять у 20 раз). Для розведення лейкоцитів використовують 3 - 50% розчин оцтової кислоти. Оцтова кислота розчиняє еритроцити, що дозволяє вести підрахунок тільки лейкоцитів.
Для підрахунку формених елементів найбільш часто застосовується камера типу Бюркера з вигравіруваним на ній сіткою Горяєва. Рахункова камера складається з товстого предметного скла з особливим поглибленням. На дні поглиблення лічильної камери вигравіруваний сітка, в клітинах якої і підраховуються формені елементи. По краях поглиблення є підвищення, куди накладається покривне скло. Між нижньою поверхнею цього скла і дном поглиблення утворюється замкнутий простір, який і являє собою лічильну камеру. Глибина камери відповідає 0,1 мм. Рахункова камера типу Бюркера розділена навпіл глибокою канавкою і має на кожній половині сітку Горяєва, що дозволяє відразу вважати 2 краплі, не заповнюючи знову камери. Сітка Горяєва має 225 великих квадратів (15х15), 25 з яких поділені на малі, по 16 у кожному; є також порожні квадрати, зібрані в групи по 4 квадрата. Всього в сітці 100 великих порожніх квадратів, зібраних в 25 груп (5X5). Кожна сторона маленького квадратика дорівнює 1/20 мм, а так як висота камери становить 0,10 мм, то обсяг дорівнює 1/4000 ММЗ.