Методи ветеринарної клінічної лабораторної діагнотікі - Кондрахін та

Клінічне значення. Білірубін - жовчний пігмент, утворюється в клітинах ретикулоендотеліальної системи печінки і селезінки при розпаді гемоглобіну, міоглобіну, ци-тохромов. Він отруйний, погано розчинний у воді. При надходженні з кров'ю в печінку в гепатоцитах відбувається знешкодження його пу-

тим приєднання глюкуронової кислоти. З'єднання білірубіну з глюкуроновою кислотою (моно- і диглюкуронід) розчинні у воді і безпосередньо реагують з диазореактивом. У цих з'єднаннях укладений так званий прямий (зв'язаний) білірубін, який виділяється в жовч і надходить в кишечник, де перетворюється в уробіліноген.

У сироватці крові тварин міститься білірубін, пов'язаний з глюкуроновою кислотою, або прямореагірующій, і кон'-югірованний вільний непрямореагірующій білірубін.

Підвищення вмісту білірубіну в сироватці крові (Гіпербій-лірубінемія, жовтяниця) відзначається при гепатиті, цирозі печінки, гострої токсичної гепатодистрофії, пухлинах печінки. При цих хворобах збільшується рівень в крові як незв'язаного (вільного), так і пов'язаного (кон'югованого) білірубіну. При гемолітичній жовтяниці, обумовленої гемолітичною отрутою або кровопаразітамі (протозоа), концентрація білірубіну в крові підвищується в основному за рахунок вільного (незв'язаного) білірубіну. Останнім часом поділу білірубіну на фракції в клініці не надають особливого значення, оцінюють в основному кількість загального білірубіну.

Колоїдно-осадові проби. Для оцінки белковосінтетізіру-нього функції печінки, діагностики і прогнозування бронхопневмонії та інших патологічних станів широко використовують осадові проби. Застосування їх засновано на зміни колоїдної стійкості білків в сироватці крові.

У здорових тварин білки в сироватці крові знаходяться в колоїдному стані і відрізняються високою стійкістю. При багатьох захворюваннях змінюється білковий спектр сироватки крові, настає диспротеїнемія - зниження вмісту альбумінів і підвищення кількості глобулінів, внаслідок чого колоїдна стійкість білків сироватки крові знижується, під дією певних речовин настає преципитация, яка веде до помутніння.

Запропоновано багато осадових проб із застосуванням реакції Токата (проби Токата, Гросса, сулемовая); тимолова проба; кофеїн-холестеринових проба; цинк-сульфатна проба; реакція Валь-тмана; золото-колоїдна проба; проба з сульфатом міді та ін.

Хоча осадові проби не специфічні, проте дозволяють встановлювати ступінь порушення співвідношень між альбумінами і глобулінами сироватки крові. Позитивні колоїдно-осадові проби частіше обумовлені збільшенням вмісту глобулінів і зменшенням кількості альбумінів. Прискорення колоїдно-осадових реакцій спостерігається також внаслідок збільшення грубодисперсних білків -у-глобулінів при нормальному коефіцієнті альбумінів (глобулінів).

Осадові проби в поєднанні з даними клінічного стану тварин, наявністю ознак захворювання печінки, легенів або інших органів - цінні діагностичні тести.

Сулемовая проба. Принцип. Сулема в присутності дрібнодисперсних колоїдів (білків) утворює колоїдний розчин солей ртуті. Порушення дисперсності білкових фракцій сироватки крові викликає осадження грубодисперсних частинок.

Реактиви: при дослідженні сироватки крові великої рогатої худоби 100 мг двохлористої ртуті розчиняють у воді в мірній колбі місткістю 100 мл (100 мг% -ний). При дослідженні сироватки крові курей і коней беруть 600 мг сулеми, розчиняють у воді в мірній колбі місткістю 100 мл (600 мг% -ний);

натрію хлорид, 154 ммоль / л (0,9% -ний). 9 г солі розчиняють дистильованою водою в мірній колбі місткістю 1 л.

Устаткування: мікробюретки на 2 або 5 мл з витягнутим носиком; стаканчики на 50 мл.

Хід визначення. У стаканчик вносять 1 мл 0,9% -ного розчину натрію хлориду і 0,5 мл сироватки крові, перемішують. З мікробюретки (або піпетки) повільно, по краплях з інтервалом 20-30 с титрують до стійкого помутніння, при якому через вертикальний шар рідини не можна прочитати газетний текст. Результат виражають у мл розчину сулеми, який пішов на титрування.

Примітка. Концентрація розчину сулеми для сироватки крові великої рогатої худоби, коней і курей нами (І. П. Кондрахін) підібрана досвідченим шляхом.
Попередня 54 55 56 57 58 59. 246 >> Наступна