** Склад вивірено і доведений до відповідності необхідним параметрам
приготування:
Розмішати 36,0 г порошку в 460 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121 ° С) протягом 15 хв. Остудити до 45-50 ° С і асептично додати вміст 1 флакона з збагачувальної добавкою L.mono (FD214), розчинена вміст 1 флакона з селективною добавкою L.mono I (FD212) і вміст 1 флакона з селективною добавкою L.mono II (FD213 ). Ретельно перемішати і розлити в стерильні чашки Петрі.
ПОПЕРЕДЖЕННЯ: хлорид літію отруйний, тому рекомендується уникати контакту з ним і вдихання його парів; при попаданні на шкіру треба негайно змити реактив великою кількістю води.
Принцип і оцінка результату:
Цей агар заснований на прописи Ottoviani і Agosti (2, 3) для селективного виділення та ідентифікації Listeria monocytogenes з харчових продуктів і кормів для тварин; він прийнятий і схвалений комітетом ISO.
М'ясний пептони, гідролізат казеїну, піруват натрію і дріжджовий екстракт є джерелами азотистих поживних речовин і вітамінів, необхідних для росту мікроорганізмів. Глюкоза є ферментіруемие субстратом. Хлорид натрію підтримує оптимальне осмотичнийтиск, а фосфат надає середовищі буферні властивості. Хлорид літію і входять до складу добавок FD212 і FD213 селективні компоненти пригнічують ріст супутньої мікрофлори, забезпечуючи зростання лістерій. Останні в результаті гідролізу хромогенного субстрату утворюють зелені колонії. Диференціація Listeria monocytogenes від інших лістерій заснована на виявленні активності фосфатіділінозіт-специфічною фосфоліпазну З активності (PIPLC). Фермент фосфоліпаза С гидролизует очищений субстрат (FD214), що додається в середу. В результаті цього навколо колоній Listeria monocytogenes формується зона помутніння середовища.
Контроль якості:
Зовнішній вигляд порошку:
Гомогенний сипучий світло-бежевий порошок.
Щільність готової середовища:
Утворюється среда, відповідна по щільності 1,5% агарові гелю.
Колір і прозорість готової середовища:
Готове середовище має світло-бурштинову забарвлення, опалесцирует, коли в чашках Петрі формується гель.
Кислотність середовища:
При 25 ° С водний розчин (7,2% вага / об) має рН 7,2 ± 0,2.
Культуральні властивості:
Ростові характеристики референс-штамів через 24-48 год при 35-37 ° С
(З інкубацією після внесення селективних добавок L.mono - FD212 і FD213. А також збагачувальної добавки L.mono - FD214).