У коня, відібраної для дослідження підшкірної малеїнізації, за добу до дослідження вимірюють температуру три рази: вранці, опівдні і ввечері. Результати всіх вимірювань складають і ділять па кількість вимірювань температури. Отримане число є середньою температурою.
Маллеінізіруют тільки тих тварин, у яких середня температура перед випробуванням менше 38,5 °. Не допускається виробництво підшкірної малеїнізації лихорадящим тваринам, якщо при попередньому обстеженні температури відзначається хоча б одиничний підйом, що досягає 39,0 ° С. Повторно підшкірна малеїнізації допускається не раніше ніж через 1½ місяці після першої. Дослідження приурочують до вечора (20-24 години), з тим щоб вранці, через 8 годин після ін'єкції малеїну, проводити вимірювання температури через кожні 2 години, закінчуючи 24-ю годиною; один вимір роблять через 36 годин.
Досліджуваних коней протягом 20 годин не можна поїти холодною водою і брати на роботу.
Техніка підшкірної малеїнізації наступна. На подгрудка вистригають волосся, місце дезінфікують звичайним методом, висушують і в підшкірну клітковину стерильним шприцом вводять 1 см3 малеїну.
Позитивна типова реакція складається з термічної місцевої і загальної (органічної). Термічна реакція виражається наступною температурної кривої: підвищення температури починається зазвичай через 6-8 годин після введення під шкіру малеїну. Через 12-16 годин температура досягає свого максимуму (не нижче 40 °). На цьому рівні вона тримається від 1 до 8 годин, а потім поступово починає спадати, даючи у багатьох коней через 30-36 годин вторинний підйом.
Місцева реакція виражається появою на місці ін'єкції малеїну, через кілька годин, різко окресленої, гарячої, напруженою і болючою припухлості, що збільшується протягом 24-36 годин. Після зазначеного часу припухлість починає повільно спадати, розпливаючись і стаючи менш болючою. Набрякання залишається іноді 2-3 дні.
Загальна органічна реакція виражається пригнобленим станом і втратою апетиту. Іноді у тварин спостерігається хитка хода, перемінанія з ноги на ногу, фібрилярні скорочення м'язів, позіхання, прискорене дихання, прискорений пульс, посилене відділення калу і сечі, кашель, вологі хрипи, витікання з носа, збільшення підщелепних залоз.
Ступінь прояви органічної реакції у різних тварин різна.
Позитивною реакцією вважається також типовий підйом температури від 39,6 до 40 ° при наявності місцевої та органічної реакції.
Сумнівною реакція визнається у випадках, коли є типова температурна крива з підйомом температури вище 39,6º при відсутності різко вираженою місцевої реакції, або у випадках, коли температура досягає 40 ° і вище, але абсолютно відсутній місцева реакція.
Підйом температури до 39 ° слід розцінювати як відсутність специфічної реакції даної тварини на введений малеїн.
Після малеїнізації докладні списки тварин, що дали позитивну і сумнівну реакції на малеїн, ветперсонал направляє в ветеринарне управління Облзем разом з актами проведених ветеринарно-санітарних заходів.