В якості мітки використовуються радіоактивні ізотопи.
Залежно від техніки постановки виділяють два способи РІА.
1) Техніка «рідка фаза» (класичний РІА). Недолік цієї техніки постановки - необхідність
спеціального поділу вільного і пов'язаного міченого антигенів (або антитіл).
2) Техніка «тверда фаза».
АГ або АТ відомої специфічності зв'язуються на сорбентах (твердій фазі) - стінках полистироловой лунки або пластикової пробірки. На іммобілізований АГ (АТ) послідовно-ватепьно сорбируются інші компоненти ІК.
Залежно від характеру реакції розрізняють такі методи:
1) Конкурентний метод - метод, заснований на конкуренції АГ.
Компоненти реакції:
а) визначається АГ (досліджуваний матеріал - кров, харкотиння та ін.);
б) ідентичний до досліджуваного АГ-у антиген, мічений радіоізотопом;
в) специфічні АТ-ла відомої концентрації, пов'язані на сорбенті;
г) стандартний АГ (контрольний);
д) буферний розчин.
2) неконкурентний спосіб.
Компоненти реакції:
а) визначається АГ;
б) специфічний АТ-а відомої концентрації, пов'язаний-
ні на сорбенті;
в) ідентичні до пов'язаного антитілу антитіла, мічені
радіоізотопом;
г) стандартний АГ;
д) буферний розчин.
До пов'язаних АТ додають досліджуваний АГ. В процесі інкубації на сорбенті утворюються комплекси АГ-АТ. Сорбент відмивають від вільних компонентів і додають мічені АТ, які зв'язуються з вільними валентності АГ-на в складі комплексу. Величина радіоактивності пропорційна концентрації досліджуваної АГ.
3) «Сендвіч-метод» (непрямий метод) - найбільш поширений метод.
компоненти:
а) досліджувана сироватка (або досліджуваний АГ);
б) АГ-и, пов'язані на сорбенті (або АТ-ла, пов'язані на сорбенті при визначенні АГ-а);
в) діагностичні АТ проти імуноглобулінів, мічені радіоізотопами;
г) контрольні сироватки (або АГ-и);
д) буферні розчини.
Досліджувані АТ-а (або АГ-и) реагують з твердофазна АГ-ми (АТ-ми), після чого інкубат видаляється і в реакцію вводять мічені антіглобуліновой АТ, які зв'язуються зі специфічними комплексами АГ-АТ на поверхні сорбенту. Величина радіоактивності реакції прямо пропорційна кількості досліджуваного АТ (або АГ).
Переваги РІА:
1) висока специфічність і чутливість;
2) простота техніки постановки;
3) точність кількісної оцінки результатів;
4) легко піддається автоматизації.
Недолік: використання радіоактивних ізотопів.
Немає схожих матеріалів (