Сторінка 63 з 91
патогенні спірохети
Спірохети на відміну від бактерій складають менш поширену групу мікроорганізмів.
Все спірохети не утворюють спор і капсул. За Грамом не прикрашає (грамнегативні). Важко культивуються на живильних середовищах. Спірохети - сапрофіти зустрічаються у водоймах, багатих органічними відходами, в мулі, в порожнині рота і кишечнику людини. За своїми морфологічними ознаками патогенні спірохети поділяються на три групи.
- Treponema, що мають форму правильної спіралі. Так само як спирохета сифілісу.
- Borrelia, що мають форму звивистою нитки з вигинами і більш широкими завитками. До цієї групи належать спірохети поворотного тифу і спірохета Венсана.
- Leptospira, мають численні дрібні завитки і характерні закінчення у вигляді гачків (лептоспіра інфекційної жовтяниці).
Мал. 105. Бліда спірохета у виділеннях з твердого шанкра. Забарвлення за Романовським.
Така тривала забарвлення препарату пояснюється тим, що бліда спірохета погано сприймає анілінові фарби.
У другому періоді сифілісу, коли на шкірі і слизових оболонках з'являються сіфіліди, також беруть з уражених ділянок тканинний сік і досліджують його на наявність спірохет.
Через 4-5 тижнів від початку зараження можна проводити серологічне дослідження, яке є найпоширенішим методом діагностики сифілісу.
Серодиагностика сифілісу заснована на постановці реакції Вассермана і осадових реакцій.
Реакція Вассермана. Техніка реакції Вассермана не відрізняється від техніки реакції зв'язування комплементу. Істотною відмінністю є спосіб приготування антигенів, а також їх титрування.
Як антигени для реакції Вассермана користуються ліпоїдному екстрактами з патологічних або нормальних тканин. Так звані специфічні антигени, приготовані з сифилитических органів, відрізняються більш високою активністю, завдяки чому титр їх зазвичай досягає тисячних часток мілілітра (титр 0,007, 0,05 на 1 мл і т. Д.). Неспецифічні антигени менш активні, тому титр їх нижче і знаходиться в межах сотих часток мілілітра (наприклад, титр 0,01, 0,02 на 1 мл).
При постановці реакції Вассермана застосовують 3 антигену (№ 1, 2 і 3 кардіоліпіновий). Антиген № 1-специфічний. Він містить ліпіди сифилитической спірохети, отримані шляхом екстрагування з тестикулярной ткапі зараженого сифілісом кролика. Антигени № 2 і 3 є неспецифічними і містять ліпіди нормальної тканини (спиртові екстракти м'язів бичачого серця з додатком 0,25-0,3% 'холестерину). Антиген кардіоліпіновий є очищеним препаратом, його треба розводити швидко, причому після розведення він повинен бути злегка опалесціюючий, але не каламутним. Титром антигену позначається то його кількість, яка повинна знаходитися в 1 мл фізіологічного розчину і яке не затримує гемоліз при наявності гемолітичної системи і комплементу.
Наприклад, якщо на ампулі вказано титр антигену 0,05 мл, то це означає, що при роботі слід розвести антиген фізіологічним розчином так, щоб в мл рідини знаходилося 0,05 мл антигену.
У зв'язку з тим що антигени можуть володіти різними антікомплементарние властивостями, перед постановкою реакції Вассермана комплемент титруються не тільки в чистому вигляді, але і в присутності антигенів. Так як реакція Вассермана ставиться з 3 антигенами, то слід титрувати комплемент з кожним антигеном окремо.
Модифікація реакції Вассермана- реакція Григор'єва-Рапопорт (табл. 25). Ця реакція заснована на використанні комплементарної активності досліджуваної сироватки. В реакції вживається (не пізніш 36 годин після отримання) активна (непрогріта) сироватка хворого. Для виконання реакції необхідні антигени, гемолітична сироватка і дефібринованої неотмитая, профільтрована через два шари марлі кров барана.
Схема реакції Григор'єва - Рапопорт
Інгредієнти (в мл)