Винахід відноситься до сільськогосподарської біотехнології, картоплярства, насінництва картоплі, а саме до прискореного розмноження насіннєвої картоплі на безвірусній основі.
Недоліками даного способу є низька швидкість росту рослин in vitro, невеликий вихід рослин-регенерантів і мікробульб з одного вихідного рослини in vitro, крім того, приживлюваність рослин, вирощених на живильному середовищі in vitro при пересадці в грунт, становить всього 70-80%.
Технічний результат полягає в підвищенні життєздатності та прискоренні зростання експлантов, збільшенні коефіцієнта розмноження рослин-регенерантів і кількості мікробульб in vitro, а також поліпшення приживлюваності рослин-регенерантів при пересадки в грунт.
Збільшення або зменшення температури вирощування рослин-регенерантів від пропонованої (23-25 ° С вдень і 17-18 ° С вночі) і концентрації сахарози в середовищі (20 г / л) призводить до зниження росту рослин-регенерантів і зменшення коефіцієнта їх розмноження.
Зміна меж температури отримання мікробульб, пропонованої з даного способу (8-10 ° С), і концентрації сахарози в середовищі (80 г / л) призводить до зменшення виходу мікробульб і їх маси.
Склад живильного середовища, мг / л
Спосіб здійснюють наступним чином.
Мікрочеренкованіе вихідних рослин виробляють в ламінар-боксі. Пробіркових рослини, які мають 12-15 листя, витягають з пробірки і черенкуют на чашці Петрі. У пробірки висаджують за допомогою пінцета по 2 однопочковимі держака з апікальної (верхівкової) і середньої частин рослини на живильне середовище, що містить 20 г / л сахарози. Пробірки з живцями підписують і виставляють в штативах на стелажі з освітленням 4-5 тис. Люкс люмінесцентними лампами, фотопериод 16 год і підтримують температуру вночі 17-18 ° С, вдень - 23-25 ° С для подальшого отримання рослин-регенерантів. Пробірки з живцями базальної частини (2-3 держака прикореневої зони), висадженими на живильне середовище, що містить 80 г / л сахарози, поміщають в темряву при температурі 8-10 ° С для подальшого клубнеобразования.
У табл.2 представлена динаміка розвитку рослин-регенератов картоплі сорту Невський in vitro в залежності від складу живильного середовища за пропонованим способом, (що містить 20 г / л сахарози).
Вік рослини-регенерантів, сут.
Довжина втечі, см
Кількість вузлів / листя, шт.
Середа 1 - живильне середовище, що містить 1 мг / л аскорбінової кислоти
Середа 2 - живильне середовище, що містить 2 мг / л аскорбінової кислоти
Середа 3 - живильне середовище, що містить 1 мг / л аскорбінової кислоти + 2 г / л активованого вугілля
Середа 4 - живильне середовище, що містить 2 мг / л аскорбінової кислоти + 2 г / л активованого вугілля
До кінця першого тижня рослини-регенеранти з мікрочеренков в варіанті з активованим вугіллям і аскорбінової кислотою були на 0,5-1,5 см вище рослин контрольного варіанту і досягали 3,5-4,9 см. В умовах дослідної середовища рослини раніше і швидше формували кореневу систему: до кінця другого тижня довжина коренів рослин-регенерантів досягла 1,1-1,5 см, а до кінця третього - 2,5-2,6 см, в той час як в контрольному варіанті вона склала лише 0,5 -1,0 см і 2,0-2,2 см. Інтенсивне корнеобразование надалі забезпечувало більш швидкий ріст стебла у рослин-рег нерантов. Протягом третього тижня максимальний щоденний приріст у рослин за пропонованим способом склав 5-8 мм, у рослин контрольної групи 3-6 мм. Рослини контрольного варіанту до кінця третього тижня культивування відставали в рості на 2,0-3,5 см. До повторного живцювання в дослідних варіантах рослини були готові до кінця 3-го - початку 4-го тижня. Кількість живців до цього терміну на досвідчених рослинах було 8-11 проти 6-8 на контрольних (табл.3).
У той же час здатність до клубнеобразования у живців різних ярусів рослини різна. Живці апікальної частини рослини утворюють незначну кількість дрібних бульб, причому значно пізніше, ніж живці з базальної частини рослини, які утворюють великі мікробульб. У дослідах виявлено, що маса мікробульб, отриманих на однопочковимі мікрочеренках картоплі in vitro, вище при використанні живців базальної частини (табл.6).
Отримані запропонованим способом мікробульб були фізіологічно зрілими, добре зберігалися і при подальшим вирощуванні in vivo формували здорові рослини
Маса мікробульб, мг
Отримані рослини-регенеранти картоплі з добре розвиненими механічними і провідними тканинами стебла, великої кореневою системою і добре розвиненими листям при пересадці в грунт легко адаптувалися до умов in vivo, що забезпечувало їх високу приживлюваність (90-98%) у порівнянні з прототипом (70 80%).
Звідси випливає, що пропонований спосіб дозволяє підвищити коефіцієнт розмноження рослин-регенерантів картоплі in vitro за 3 місяці послідовного живцювання на 0,2-1,5 тис. Штук від одного вихідного за рахунок скорочення періоду між повторними живцювання, збільшення виходу мікрочеренков і пробіркових рослин і їх кращої адаптації в грунті, а також додаткового отримання мікробульб.
ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
Офіційна публікація
патенту РФ № 2329639
patent-2329639.pdf
Патентний пошук по класах МПК-8:
Патенти РФ в класі A01H4 / 00: