Створення білків за допомогою РДНК-технології в бактеріальних, дріжджових клітинах і клітинах ссавців

Існують різні фактори, в тому числі що мають відношення до ринкової економіки, які впливають на виробництво продуктів, заснованих на РДНК-технології. Найбільше число можливостей для використання у виробництві пов'язано з бактеріальними клітинами. Вони швидко ростуть і розмножуються, їх легко підтримувати в культурі. Однак, як ми вже обговорювали вище, бактеріальні (прокариотические) клітини часто не можуть робити те, на що здатні еукаріотичні клітини. Специфічні характеристики, яких позбавлені прокариотические клітини, включають здатність приєднувати цукру до білків (гликозилирование) і утворювати дисульфідні зв'язки. Дані процеси необхідні, щоб потім білок міг правильно виконувати свої функції, як це відбувається в клітинах людини. В результаті деякі продукти, отримані на основі РДНК, вимагають додаткового процесингу після виділення з бактерій. Наприклад, інсулін складається з двох ланцюгів, пов'язаних дисульфідними зв'язками. Ці ланцюги синтезуються окремо в прокариотических клітинах і з'єднуються потім поза біологічної системи.

Для інших людських білків, синтезованих в бактеріях, неправильний фолдінг і агрегація в нерозчинному вигляді в бактеріальних системах є важливими проблемами. Нещодавно були виведені мутантні штами різних бактерій, які дають надію на більш правильну збірку людських білків. Замість бактеріальних клітин часто використовують дріжджові клітини. Однак підтримка культури дріжджових клітин обходиться дорожче, і ці клітини витрачаються при отриманні необхідного білка, так як необхідний білок у них накопичується, як правило, в цитоплазмі. Чим більше стає відомо про метаболізм білків, тим більше з'являється доступних методів, спрямованих на стимуляцію секреції білка. Наприклад, можна ввести ген, що кодує додаткову амінокислотну послідовність, яка приєднається до білка і сприятиме його секреції.

Використання клітин ссавців не має біохімічних обмежень, властивих бактеріальним клітинам, але обходиться значно дорожче. Зазвичай використовують СНО-клітини (від Chinese hamster ovary - яєчники китайського хом'яка) або ВНК-клітини (від baby hamster kidney - нирки дитинчат хом'ячка). Застосування клітин гібридоми (наполовину мишачої, наполовину людської) обговорювалося в главі 6 в якості системи для освіти моноклональних антитіл. Клітини людини були б, без сумніву, найкращим джерелом людських білків, якби вони не виявилися настільки маложізнеспособнимі в культурі. Вчені намагаються знайти способи генетично модифікувати клітини людини, щоб збільшити їх життєздатність, а отже, і вихід необхідного білка.

Було виявлено, що клітини комах синтезують велику кількість білків. Особливості клітин комах виявляються тільки зараз. Через високий виходу білка вони можуть використовуватися для створення прототипу системи синтезу білка. І вже точно з ними цікаво попрацювати.

Білки створюють проблеми, що стосуються не тільки їх освіти, а й застосування пацієнтом. Вони хімічно і термічно чутливі. Якщо білки приймати всередину, вони руйнуються протеолітичними ферментами в шлунково-кишковому тракті. Інтактні білки не можуть проникати через слизові оболонки легких або кишечника. Отже, білкова терапія повинна здійснюватися шляхом внутрішньовенних ін'єкцій. Недавні розробки включають методи по з'єднанню білків з молекулами гліколю і инкапсулирование для застосування всередину. Наявність доступних для застосування всередину білкових препаратів повинно істотно знизити їх ціну.

Маяк на машину кращі gps трекери для машини маяки.