Стерилізацію сухим жаром або гарячим повітрям здійснюють в печах Пастера (сушильних сухожарові шафах). Піч Пастера - шафа з подвійними стінками, виготовлений з термостійких матеріалів - металу і азбесту. Нагрівають шафа з допомогою газових пальників або електронагрівальних приладів. Шафи з електричним нагрівом забезпеченірегуляторами, що забезпечують необхідну температуру. Для контролю температури є термометр, вставлений в отвір верхньої стінки шафи.
Сухим жаром стерилізують в основному лабораторну Посуд. Підготовлену для стерилізації посуд нещільно завантажують в піч, щоб забезпечити рівномірний і надійний прогрів стерилізується матеріалу. Двері шафи щільно закривають, включають обігрівальний прилад, доводять температуру до 160-165 ° С і при цій температурі стерилізують 1 год. Після закінчення стерилізації вимикають обігрів, але дверцята шафи не відкривають до тих пір, поки піч не охолоне; в іншому випадку холодне повітря, що надходить всередину шафи, може викликати утворення тріщин на гарячій посуді.
Стерилізацію в печі Пастера можна проводити при різному температурному режимі і експозиції (час стерилізації) (табл. 1).
Таблиця 1. Режим стерилізації
Рідини (поживні середовища, ізотонічний розчин хлориду натрію і ін.), Предмети з гуми і синтетичних матеріалів стерилізувати сухим жаром можна, так як рідини закипають і виливаються, а гума та синтетичні матеріали плавляться.
Для контролю стерилізації в печі Пастера шовкові нитки змочують в культурі спороутворюючих бактерій, підсушують, поміщають в стерильну чашку Петрі і ставлять в піч Пастера. Стерилізацію проводять при температурі 165 ° С 1 год (для контролю частину ниток залишають при кімнатній температурі). Потім простерилізовані і контрольні нитки кладуть на поверхню агару в чашку Петрі або поміщають в пробірки з бульйоном і інкубують в термостаті при температурі 37 ° С протягом 2 діб. При правильній роботі печі Пастера в пробірках або чашках з живильними середовищами, куди були поміщені простерилізовані нитки, зростання не буде, так як спори бактерій загинуть, в той час як спори бактерій на нитках, що не піддавалися стерилізації (контрольні), проростуть і на поживних середовищах буде відзначено зростання.
Для визначення температури всередині печі Пастера можна використовувати сахарозу або харчової цукровий пісок, карамелізуются при температурі 165-170 ° С.
Підготовка лабораторного посуду до стерилізації в печі Пастера. Лабораторний посуд (чашки Петрі, піпетки градуйовані і пастерівські, флакони, колби, пробірки) перед стерилізацією необхідно ретельно вимити, висушити і загорнути в папір, інакше після стерилізації вона може знову забруднитися бактеріями повітря.
Чашки Петрі загортають в папір по одній або декілька штук або укладають в спеціальні металеві пенали.
У верхні кінці піпеток вставляють ватні тампони, що попереджають потрапляння досліджуваного матеріалу в рот. Градуйовані піпетки загортають в довгі смужки паперу шириною 4-5 см. На папері відзначають обсяг загорнутої піпетки. В пеналах градуйовані піпетки стерилізують без додаткового загортання в папір.
Примітка. Якщо градуювання на піпетках погано помітна, її відновлюють перед стерилізацією. На піпетку наносять масляну фарбу і, не давши фарбі висохнути, в неї втирають за допомогою ганчірочки порошок барію сульфату. Після цього ганчіркою знімають надлишок фарби, яка залишається тільки в насічка градуювання. Оброблені таким чином піпетки слід сполоснути.
Гострі кінці пастерівських піпеток запаюють в полум'я пальника і загортають у папір по 3-5 штук. Загортати пастерівські піпетки потрібно обережно, щоб не обламати зупинено кінці капілярів.
Флакони, колби, пробірки закривають ватно-марлевими пробками. Пробка повинна входити в шийку посудини на 2/3 своєї довжини, не надто туго, але й не вільно. Поверх пробок на кожній посудині (крім пробірок) надягають паперовий ковпачок. Пробірки пов'язують з 5-50 штук і обгортають поверх папером.
Примітка. При високих температурах папір, в яку загортають чашки і піпетки, і вата жовтіють і навіть можуть обвуглюватися, тому кожен новий сорт паперу, що отримується лабораторією, слід розглядати при прийнятому температурному режимі.
1. Що розуміють під терміном стерилізація?
2. Якими способами проводять стерилізацію?
3. Що стерилізують прокаливанием на вогні?
4. Опишіть пристрій і режим роботи печі Пастера.
5. Що стерилізують в печі Пастера?
6. Як готують скляну посуд до стерилізації?
7. Чому в печі Пастера не можна стерилізувати поживні середовища та предмети з гуми?
Підготуйте до стерилізації чашки Петрі, градуйовані піпетки, пастерівські піпетки, пробірки, колби і флакони.