Виявлення збудника лептоспірозу (Leptospira) - інфекційного захворювання, якому піддаються багато тварин (в тому числі собаки, кішки, домашня худоба, щури) і яке може передаватися людині. Поширюючись з сечею та калом, мікроскопічного розміру лептоспіри вражають органи і тканини, отруюючи організм продуктами своєї життєдіяльності.
Лептоспіра, ДНК [ПЛР].
Leptospira, PCR (DNA).
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР).
Який біоматеріал можна використовувати для дослідження?
Біоптат, венозну кров, ліквор, першу порцію ранкової сечі.
Як правильно підготуватися до дослідження?
Підготовки не потрібно.
Загальна інформація про дослідження
Починаючи з другого тижня захворювання лептоспіри накопичуються переважно в звивистих ниркових канальцях і зникають з крові та інших тканин. Така виборча концентрація в епітелії і міжклітинному просторі ниркової тканини призводить до важких пошкоджень канальців нирок і порушення мочеобразования, а у важких випадках викликає анурию (відсутність сечовипускання) і уремию (накопичення в крові токсичних продуктів азотистого обміну, порушення концентрації електролітів крові і ін.).
При персистенції лептоспір в нирках ознак гострої інфекції, як правило, немає, захворювання часто протікає в латентній формі.
Вирішальними для підтвердження діагнозу «лептоспіроз» в будь-якій фазі захворювання, в тому числі і на більш пізніх термінах інфекційного процесу, є результати лабораторних досліджень: бактеріологічного (посіву), серологічного (визначення титрів специфічних антитіл в сироватці крові), молекулярно-генетичного (визначення ДНК лептоспір методом ПЛР).
Недоліком бактеріологічного методу є тривалість проведення дослідження через повільне зростання лептоспір на поживних середовищах.
Серологічне дослідження втрачає свою значимість після 19-20-го дня хвороби в зв'язку з поступовим зниженням титру сироваткових антитіл внаслідок припинення циркуляції лептоспір в крові. Крім того, при важкому перебігу лептоспірозу, особливо на тлі інтенсивної терапії антибактеріальними препаратами, антитіла можуть виявлятися лише через 2-3 місяці від початку хвороби.
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) - це молекулярно-генетичний метод дослідження, в ході якого виявляється генетичний матеріал (ДНК) лептоспіри в зразку біоматеріалу. Методу властива висока специфічність (100%), чутливість (від 10 до 1000 копій ДНК в пробі) і висока діагностична ефективність, навіть на тлі проведеного лікування антибактеріальними препаратами.
Одним з основних достоїнств ПЛР є те, що вона дозволяє виявити збудника навіть за умови присутності останнього в організмі в дуже малих кількостях.
Разом з тим негативний результат ПЛР не повинен бути підставою для припинення діагностики, так як визначити точно конкретну фазу захворювання не завжди можливо. Чутливість лабораторної діагностики при лептоспирозах може бути значно підвищена за рахунок паралельного використання серологічних тестів (визначення титрів антитіл в сироватці крові) і методу ПЛР незалежно від фази захворювання.
Для чого використовується дослідження?
- Для діагностики лептоспірозу.
- Для диференціальної діагностики лептоспірозу з іншими захворюваннями.
Коли призначається дослідження?
- При діагностиці лептоспірозу.
- При підозрі на персистенцию лептоспір в нирках.
Що означають результати?
Референсні значення: негативно.
Причини позитивного результату:
Причини негативного результату:
- період повного одужання, коли формується стійкий імунітет і лептоспіри в організмі вже відсутні.
Що може впливати на результат?
- Застосування деяких противірусних препаратів - інгібіторів полімерази - іноді призводить до помилково негативні результати.
Хто призначає дослідження?
Інфекціоніст, нефролог, уролог, терапевт, лікар загальної практики, хірург, реаніматолог.