Безпечні методи відбору проб крові у свиней. Постановка правильного діагнозу - одна з найважливіших складових у заходах з профілактики та боротьби із захворюваннями тварин.
Потрапляючи в організм господаря, збудник незалежно від патогенності запускає механізми гуморальної (продукції антитіл) і клітинної захисту. Утворені специфічні антитіла потрапляють головним чином в кров, і там їх можна визначити за допомогою серологічних реакцій протягом періодів різної тривалості, при деяких інфекціях - протягом усього життя тварини.
Дослідження сироватки з відповідним лабо-раторно діагностичним антигеном дає реакцію за умови, що сироватка містить специфічні антитіла. Визначення антитіл до даного збудника доводить лише наявність контакту досліджуваного об'єкта з цим агентом і нічого не говорить про те, коли цей контакт мав місце (тиждень, рік або багато років тому) і який був його характер - перенесення захворювання, інфекція без клінічних проявів або, нарешті, вакцинація. Таким чином, серологічне обстеження хворого суб'єкта навіть у разі визначення високих титрів антитіл до певного збудника не завжди дозволяє стверджувати, що саме цей збудник є причиною спостережуваного захворювання. Воно може бути викликано абсолютно іншим мікроорганізмом або паразитом, а присутність антитіл в сироватці є доказом перенесеного в минулому зараження, наприклад безсимптомного, що може в деяких випадках обумовлювати несприйнятливість якраз до цього ж захворювання.
У більшості випадків діагностична цінність серологічних реакцій залежить від впевненості в тому, що виявлені антитіла з'явилися у відповідь на поточний зараження або при правильно виконаній програми вакцинації.
У господарстві, з урахуванням анамнезу, клінічних і патологоанатомічних даних можна встановити попередній діагноз захворювання, але остаточний діагноз захворювання встановлюється в основному при наявності даних лабораторних досліджень. Для отримання більш достовірного діагнозу бажано досліджувати парні проби сироваток крові, що дозволить виявити наростання титру антитіл і свідчити про свіжому зараженні тварини. Перший раз кров беруть якомога раніше після виявлення захворювання (бажано - протягом перших 4-5 днів після появи перших симптомів або виникнення перших підозр), другий раз - через 14 днів. Діагностична лабораторія зберігає надіслані перші зразки сироватки крові, взятої в гострій фазі хвороби, в замороженому стані до отримання другої сироватки, взятої в період реконвалесценції, і тільки тоді може бути поставлена серологічна реакція, так зване дослідження парних сироваток (кожна пара повинна бути взята від одного тваринного).
Позитивним результатом реакції, що вказує на перебіг гострого процесу зараження даним збудником, є чотириразове збільшення титру антитіл за період між першим і другим взяттям проб крові на дослідження. Застосування в реакції постійної дози сироватки і змінюється кількості збудника має дати зростання індексу нейтралізації не менше 1,7-2,0 lg, що відповідає 50-100-кратному зростанню титру.
Якщо перша проба взята занадто пізно, то титр антитіл може досягти такого рівня, що друге дослідження не виявить чотириразового зростання титру. Якщо ж взяти другу пробу занадто рано (інтервал між пробами повинен бути не менше 10 днів), титр антитіл не встигає досягти максимального рівня, і різниця знову виявиться надто незначною. Це говорить про те, що вчасно і правильно відібрані проби крові від тварин - запорука правильного діагнозу захворювання.
Відбір крові з яремної вени у дрібної і великої рогатої худоби не становить труднощів для ветеринарних фахівців. Тому ми хочемо звернути увагу на методи відбору крові у свиней, загальні правила, їх недоліки та переваги.
При відборі крові необхідно керуватися принципом «не нашкодь собі, тварині, навколишньому середовищу» і забезпечити лабораторію якісним матеріалом для постановки достовірного діагнозу. Робота повинна виконуватися згідно з правилами гуманного поводження з тваринами відповідно до керівництвом зі здоров'я та захисту тварин.
У свиней кров відбирають з судин вушної раковини; кінчика хвоста; очного синуса; передній порожнистої вени.
1) Свиня повинна бути надійно зафіксована за верхню щелепу за допомогою мотузяній петлі або петлі з гнучкого тонкого троса, що забезпечить безпеку бере кров і охоронить від травми свиню (рис. 1);
2) Весь посуд і інструменти повинні бути стерильними;
Мал. 1. Фіксація свині
1) Лікар повинен володіти методами відбору крові та виключати контакт з кров'ю під час взяття та приготування сироватки;
2) Не можна допускати попадання крові на підлогу, на персонал і тіло свині з метою попередження поширення можливої інфекції;
3) Щоб уникнути небажаної контамінації крові мікрофлорою шкіру на місці взяття крові необхідно очистити від бруду і продезінфікувати 70% спиртом або 5% настоянкою йоду;
4) Зупинити витікання крові припіканням рани порошком сухого марганцевокислого калію або накладенням лігатури, яку потім необхідно зняти;
5) Отримати якісну сироватку крові, придатну для дослідження і отримання достовірного результату.
Кров відбирають в стерильні пробірки, шприци або спеціальні одноразові шприци типу «Моновет». Для кращого відстоювання сироваток стінки традиційно використовуваних пробірок і шприців до взяття крові необхідно зволожити стерильним фізіологічним розчином.
«Моновет» - це готова до вживання закрита система взяття крові, що складається з шприца-пробірки і голки. В голці і шприці-пробірці влаштовані клапани, що запобігають витіканню крові при від'єднанні голки від шприца-пробірки, що знижує ризик інфікування оточення. У самому шприці-пробірці знаходяться пластикові кульки з нанесеним активатором згортання крові (або навпаки, в залежності від моделі та цілі взяття крові), завдяки чому кров швидко згортається і утворюється чітка межа між згустком і сироваткою. Пристрій можна застосовувати для вакуумного або шпрі- цевого методу відбору крові. При відборі в шприц-пробір- ку набирається постійне кількість крові, що дозволяє центрифугувати кров в «Моновете» без врівноваження. Також система «Моновет» є прекрасним транспортним контейнером.
Для взяття крові з вушної вени спочатку готують поверхню шкіри вуха. Для цього видаляють бруд, вистригають щетину і дезінфікують місце проколу. Навколо вуха накладають гумовий джгут, який необхідно зняти після завершення процедури взяття крові. Для взяття крові голку № 16 вводять у вену, відбирають кров в шприц і переливають у стерильну пробірку (рис. 2). Відбір крові в пробірку методом розрізання вуха застосовуватися не повинен.
Мал. 2. Взяття крові з вушної вени
Для взяття крові з судин хвоста кінчик хвоста обмивається і дезінфікується 70% розчином спирту або 5% розчином йоду. Кінчик хвоста відсікають скальпелем (рис. 3) і беруть необхідну кількість крові в пробірку. Після закінчення процедури на хвіст накладають лігатуру, припікають 5% розчином йоду або сухим порошком перманганату калію. Через 1-2 години необхідно видалити лігатуру з хвоста для попередження можливого некрозу тканин.
Мал. 3. Взяття крові з судин хвоста
Зразки крові можуть бути отримані з очного синуса свиней (рис. 4). Дорослих свиней надійно фік-сіруют стоячи, а поросят-сосунов утримують однією рукою в горизонтальному положенні. Кінчик голки, з'єднаної зі шприцом, вводять безпосередньо в тканини мигательной перетинки. При введенні Голку необхідно направляти вниз з невеликим натиском, нахиляючи всередину. Голку просувають вперед на 2-4 см, поки вона не потрапить в венозний синус, який примикає до кісткової очниці (схема 3). Зріз голки повинен бути спрямованим в бік кістки. Із шматка тканин синуса кров почне витікати з голки. При необхідності повторне взяття крові рекомендується проводити через 10-12 днів.
Мал. 4. Взяття крові з очного синуса
Відбір крові можливий і з передньої порожнистої вени.
У великих свиней кров беруть в положенні стоячи. Для цього голку довжиною 6 см направляють праворуч або ліворуч від кіле- видного хряща грудини на лінії, проведеної від місця розташування хряща до основи вуха. Голку направляють всередину, вгору і назад (схема 1).
Схема 1. Взяття крові з передньої порожнистої вени у великих свиней, зафіксованих в положенні стоячи
Для відбору крові в положенні свині на спині (схема 2) голку 20-го розміру довжиною 3,8 см направляють всередину, вниз і назад до тих пір, поки вона не потрапить в вену всередині дугообразного освіти між двома першими ребрами.
Схема 2. Взяття крові з передньої порожнистої вени у великих свиней, зафіксованих в положенні на спині (А - анатомія вентрального шийного відділу свині; 1 -грудіна; 2 - зовнішня яремна вена; 3 -Лицьова вена; 4 - щелепної край; 5 - верхньощелепна вена; В-місце введення голки шприца для взяття крові).
Схема 3. Взяття крові з очного синуса свиней
(1 - бічний кут очної щілини - нижню повіку; 2 - середній кут очної щілини - нижню повіку; 3 - голка для взяття крові після введення її в очноямковий венозний синус; 4 - третя повіка і його лімфатичний вузол (навколишній хрящ); 5 - очноямковий венозний синус; 6 - глибоко розташований лімфатичний вузол третього століття; 7 - серединна кісткова стінка очного синуса; 8 - зоровий нерв; 9 - нюхова цибулина, 10 -решетчатая кістка і носові раковини; 11 - додаткова точка для взяття крові).