Цитохімічні дослідження - це визначення в клітинах крові деяких речовин. При цьому визначають їх кількість або їх активність (якщо це ферменти).
1. Активність мієлопероксидази - МП присутній в гранулоцитах і моноцитах. Це своєрідний маркер мієлоїдного ряду. Якщо в досліджуваній клітці виявлено характерні коричневі гранули МП, то дана клітина належить мієлоїдний ряду (нейтрофіл або моноцит). Всі лімфоцити дають строго негативну реакцію. Використовується для диференціального діагнозу ОМЛ і ГЛЛ. При ГМЛ - висока активність, при ГЛЛ - активність відсутня.
4. Активність кислої фосфатази - гідролітичні фермент, який розщеплює монофосфорної з'єднання в кислому середовищі (рН = 2,5-5,0). У нормі міститься у всіх лейкоцитах, але максимально в нейтрофільних мієлоцитів. Активність кислої фосфатази зростає при: а) ГМЛ, особливо при промієлоцитарному варіанті; б) гострому монобластний лейкозі.
5. Активність неспецифічної естерази - гідролітичні фермент, який розщеплює ефіри карболової кислоти з короткою вуглеводної ланцюгом. У нормі активність неспецифічних естераз виявлена у всіх лейкоцитах. Активність зростає при ОМнЛ і ГМЛ (в меншій мірі). Різко зростає при промієлоцитарному варіанті.
6. Активність лужної фосфатази - це гідролітичні фермент, який розщеплює фосфорні ефіри в лужному середовищі. У нормі міститься в гранулоцитах. Активність його вперше з'являється на стадії метамієлоцити, потім, у міру диференціювання наростає. Максимальна активність - У Сян, вона зменшується в міру старіння клітини. Лужна фосфатаза: а) знижується при ХМЛ; б) зростає при еритреми, лейкемоідних реакціях, нагноениях; в) підвищення ЛФ при ОЛ - сприятлива ознака, т.к у таких хворих більш вірогідні ремісії.
Дані цитогенетичних досліджень
При різних формах лейкозів
Каріотип в нормі: а) соматітческіе хромосоми (гоносоми),
значок «А», всього 44;
б) статеві хромосоми (гоносоми),
Формула: а) жінки - 44А + XХ;
б) чоловіки - 44А + XY.
При ХМЛ хромосома № 21 або № 22 має менші розміри через втрату майже половини довгого плеча. Ця змінена хромосома називається «філадельфійської» і позначається Ph '. При ХМЛ Ph 'виявляється завжди і є маркером ХМЛ.
При ОЛ спостерігається: а) анеуплоідія (зміна числа хромосом, що не кратне основному числу. Наприклад: від 41 до 65); б) полиплоидия (збільшення числа хромосом); в) зміна структури хромосом.
Субстратпухлини - бластні клітини.
Класифікація - заснована на цитохимических особливості та зовнішній вигляд патологічних клітин: 1) лімфобластний - ОЛ;
2) мієлобластний - ГМЛ;
3) монобластний - ОМнЛ;
4) міеломонобластний - ОММнЛ;
5) промієлоцитарний - ОПрЛ;
6) ерітромієлоз - ОЕМ;
7) недіфференціремий - ОНЛ.
Інша класифікація - FAB (Франція, Англія, Америка) - спирається на ті ж морфологічні та цитохімічні критерії, але в ній більше варіантів.
1. Еритроцити - знижені до 1,00-1,50х10 12 / л. Причина - витіснення еритроїдного паростка лейкозних клітинами.
2. Гемоглобін - знижений до 20-60 г / л. Причина - а) придушення еритроїдного паростка; б) незасвоєння вітаміну В12 і фолієвої кислоти ВС; в) гемоліз.
3. В результаті - анемія нормо-або гіперхромні, рідше - гіпохромна.
4. Тромбоцитопенія - в результаті придушення і витіснення мегакариоцитарного паростка лейкозних клітинами.
5. Загальні лейкоцити - коливання. від 1,00 - 2,00 - 3,00х10 9 / л до 100,00 - 200,00 - 300,00х10 9 / л. Причому, Лейкопенічні форми - до 50% випадків.
6. лейкоформули - в типових випадках в крові з'являються бластні клітини до 95-99% і тільки 1-5% припадає на зрілі клітини (це продукція збережених вогнищ нормального кровотворення). Явище називається «лейкемічний провал» - між бластними і зрілими клітинами відсутні дозрівають форми.
7. В кістковому мозку - а) переважання бластних клітин більше 5% до тотального бластоза; б) червоний паросток різко звужений; в) мегакаріоцітарний паросток різко звужений.
8. цитохімічним дослідження крові - для диференціальної діагностики окремих форм гострого лейкозу ОЛ.
9. імунофлюоресцентному дослідження крові і кісткового мозку - на додаток до цитохімічним з метою розмежування окремих форм гострого лейкозу.
10. Цитогенетическое дослідження - також з метою розмежувати окремі форми лейкозу.
Їх ділять на: а) мієлопроліферативні пухлини;
б) лімфопроліферативні пухлини.
Під цим збірним назвою розуміється група хронічних лейкозів, які виникають на рівні ранніх попередників мієлопоез.
Потомство мієлопоез: = гранулоцити;
Все це потомство може належати опухолевому клону. Але! У більшості випадків безмежна проліферація стосується переважно одного або двох паростків. Якщо відзначається 3-х паростковий пошкодження проліферації, то говорять про панміелозе.
= Хронічний моноцитарний лейкоз;
Гальмування диференціювання - на рівні дозрівають гранулоцитів.
Субстратпухлини - зрілі нейтрофіли (Пян і Сян), метамієлоцити, міелоціти, проміелоціти, мієлобласти (мало).
2. Тромбоцити - норма або збільшені. Тромбоцитопенія може бути в термінальну стадію або в результаті лікування хіміопрепаратами.
3. Загальні лейкоцити - збільшені до 200,00 - 400,00х10 9 / л, іноді до 800,00 - 1000, - х10 9 / л.
4. лейкоформули - а) дегенеративне зрушення вліво за рахунок появи Pmc, Mc, Mmc, б) еозинофільно-базофильная асоціація, тобто еозініфілія і базофилия абсолютна і відносна.
6. цитохімія - мієлопероксидаза підвищена, ліпіди підвищені, глікоген знижений на 1/2 від норми, лужна фосфатаза знижена.
7. Цитогенетичні дослідження - виявляється Ph '- хромосома. Це маркер лейкозних клітин при хронічному мієлолейкозі.
Термінальна стадія ХМЛ
Термінальна стадія ХМЛ клінічно проявляється зміною всієї картини хвороби: = швидко зростає селезінка
(При пункції високий відсоток бластів);
= Безпричинне підвищення температури;
= З'являються сильні болі в кістках;
= З'являються щільні вогнища саркомний зростання
в шкірі, лімфовузлах.
Нові прояви хвороби пов'язані з виникненням нових мутантних субклонов в рамках основного пухлинного клону. Ці нові субклони витісняють вихідний клон. Іноді хвороба дебютує з термінальній стадії.
1. Червона кров - поглиблюється анемія.
2. Тромбоцити - почалося зниження і виникнення тромбоцитопенії.
3. Загальні лейкоцити - в ряді випадків глибока лейкопенія, але не завжди).
4. лейкоформули - можливі варіанти: а) «владний криз» - наростання вмісту бластних клітин в кістковому мозку і в крові. Картина нагадує гострий лейкоз ОЛ з явищем «лейкемічного провалу»; б) зниження процентного вмісту Пян і Сян, але збільшення процентного вмісту Mb, Pmc, Mc;
Еритремія - хронічний мієлолейкоз з ураженням по 4-м паросткам: гранулоцитарних, моноцитарного, еритроїдної, мегакаріоцітарном. Поразка паростків йде по типу гіперплазії. Найбільшою мірою пошкоджений еритроїдної паросток.
Синоніми: а) справжня поліцитемія; б) хвороба Вакеза
Картина крові: панцітоз, тобто одночасне збільшення клітинної червоної та білої крові - еритроцитоз, ретикулоцитоз, тромбоцитоз і лейкоцитоз.
1. Червона кров - гемоглобін підвищений до 180-220 г / л, еритроцити до 6,00 - 8,00х10 12 / л, збільшення гематокриту, в'язкості крові. Різко знижується ШОЕ.
2. Тромбоцити - збільшення понад 1000,00х10 9 / л. Одночасно судинні ускладнення.
3. Загальні лейкоцити - підвищені до 9,00 - 15,00х10 9 / л. Іноді до 50,00х10 9 / л.
4. лейкоформули - а) нейтрофілез абсолютний і відносний; б) Збільшення процентного вмісту Пян; в) відносна еозинофілія.
5. Кістковий мозок - пунктат сильно розлучений кровью.Отмечается: а) зниження лейкоерітробластіческого співвідношення за рахунок гіперплазії еритроїдного ряду; б) збільшення абсолютних мегакариоцитов (при підрахунку в камері).
6. Трепанобиопсия кістки - а) зменшення жирової тканини; б) панміелоз (гіперплазія всіх трьох паростків; в) збільшення розмірів мегакаріоцитів; г) посилення процесу відшнуруванням тромбоцитів.