У новоутвореннях людини встановлені певні закономірності експресії білків ПФ.
Злоякісні пухлини з епітелію експресують цитокератини, які виявляються і в незмінених клітинах того ж гистогенеза. Аденокарциноми в основному експресують цитокератини одношарового епітелію - CK8, CK18, CK19 і часто CK7. У клітинах перехідноклітинний раку і раку з клітин Меркеля зберігаються біохімічні властивості нормальних клітин і виявляється CK20. У анапластіческіх клітинах плоскоклітинного раку зустрічаються CK5, CK6, CK14, CK16 і CK17.
Неепітеліальних пухлини. як правило, цитокератин-негативні, однак деякі мезенхімальні пухлини, такі як лейоміома, рабдоміосаркома, меланома, шваннома і анапластична крупно-клітинна лімфома можуть експресувати цитокератини CK8, CK18, CK19. Епітеліоїдна саркома, хондрома і амелобластома експресують цитокератини простого епітелію (CK8, CK18, CK19). Синовіальная саркома і злоякісна мезотеліома експресують цитокератини одношарового епітелію, проте в області розташування диференційованих клітин можлива експресія і високомолекулярних цитокератинів, характерних для багатошарового плоского епітелію.
Цитокератини - важливі маркери для імуногістохімічної класифікації недиференційованих пухлин.
Для виявлення цитокератинів в пухлинних клітинах часто використовуються так звані загальні цитокератини (клони AE1 / AE3 і MNF 116, Dako) - антитіла з широкою специфічністю до різних епітелієм, вони можуть застосовуватися для диференціальної діагностики раку з більшістю неепітеліальних пухлин. Антитіла до загального цитокератину можна використовувати для виявлення мікрометастазів або розкиданих пухлинних клітин в лімфатичних вузлах і кістковому мозку, инфильтрирующего зростання при раках шлунка і молочної залози.
Переважна експресія цитокератинів багатошарового плоского епітелію високого молекулярного ваги, таких як CK5 і CK13, в пухлинах характеризує плоскоклітинний диференціювання і допомагає виявітьслабо диференційовані плоскоклітинні пухлини. CK8, CK18 і CK19 можуть експресуватися як в аденокарцинома, так і в плоскоклітинний раках, в таких випадках наявність CK5 і відсутність експресії CK7 позволяетпредположіть плоскоклітинний рак.
З внутрішньомозкових пухлин цитокератини експресують: папіломи хоріодного сплетення і злоякісні папіломи хоріодного сплетення, деякі менінгіоми, в той час як гліоми і низькодиференційовані нейроектодермальні пухлини CK-негативні.
Антитіла до плоскоклітинного епітелію CK5 виявляють базальні епітеліальні і міоепітеліальние клітини і таким чином можуть допомогти ввиявленіі інвазії при раку передміхурової та молочної залоз.
Для перехідно-клітинний раку сечового міхура експресія CK13 і CK20 є хорошим прогностичним ознакою. Початок експресії CK14 в перехідноклітинний раку свідчить про плоскоклітинної диференціювання і несприятливий прогноз. У папілярних уротеліальних пухлинах нормальний (поверхневий) тип експресії CK20 характерний для нерецідівірующіх пухлин і може бути використаний для диференціальної діагностики між інвазивними і неінвазивними пухлинами.
Експресія CK7 без коекспрессіі CK20 характерна для аденокарциноми легенів, молочної залози, ендометрія і щитовидної залози, а також для немуцінозной аденокарциноми яєчників і злоякісної мезотеліоми.
Типовим антигенними патерном для раку товстого кишечника є експресія цитокератинів, характерних для епітелію тонкого кишечника, CK20 і відсутність експресії CK7.
Експресія CK7 і CK20 характерна для перехідноклітинний раку сечового міхура, муцинозной раку яєчників і аденокарцином шлунка, жовчних шляхів і підшлункової залози.
У свою чергу, гепатоцелюлярний рак, рак передміхурової залози, нирковоклітинний рак і дрібноклітинний рак легень не експресують CK7 і CK20.
На другому етапі вдається розділити цитокератин-позитивні низькодиференційовані пухлини на перехідно-, плоскоклітинні, нейроендокринні раки, аденокарциноми і мезотеліому.
Якщо позитивна реакція на цитокератини, характерні для плоского епітелію (CK5, CK13), поєднувалася з позитивною реакцією на цитокератини одношарового епітелію (CK8, CK18, CK19, CK7), то це - перехідно-клітинний рак або деякі ПРОТОКОВІЙ аденокарциноми. Якщо імунофенотип пухлини був CK5 і CK14 (+), а CK8, CK18 (-), то це - плоскоклітинний рак.
При позитивній реакції на широкий спектр цитокератинів і віментину, це - мезателіома або синовіальна або епітеліоїдна саркома, або деякі раки щитовидної залози, нирки та інші рідкісні раки.
У разі коекспрессіі CK8, CK7, CK18 із загальним лейкоцитарним антигеном передбачається анапластична крупноклеточная лімфома, діагноз якої уточнюється за допомогою антитіл до CD-30, антигену ALCL.
Якщо позитивна реакція на CK8, CK18, CK19 і CK7 поєднувалася з негативною реакцією на CK5, CK6, CK14, CK16 і CK17, то ця пухлина була аденокарциномой, яка в подальшому тестувалася на раковоембріональний антиген (РЕА). Виражена реакція на РЕА свідчить про рак товстого кишечника, шлунку, підшлункової залози, жовчних проток.
Слабка реакція на РЕА спостерігається при раку сечового міхура, молочної залози, шийки матки, легкого (при плоскоклеточном крупноклеточной варіанті). Негативна реакція на РЕА спостерігається в клітинах аденокарциноми простати, нирки, печінки, яєчників, щитовидної залози, ендокріноклеточная ракових пухлинах.
Третій етап має на меті визначити органну локалізацію анапластичної пухлини з імунофенотипові РЕА (+), CK8, CK18, CK19, CK7 (+) і проводиться за допомогою органоспецифічних маркерів.
При раку простати виявляється специфічний антиген простати (PSA) і лужна фосфатаза, специфічна для простати (PAP), при раку щитовидної залози - тиреоглобулін, в клітинах печінковоклітинного раку - альфа-фетопротеїн, раку яєчника - СА-125, хоріоепітеліоми - хоріонічний гонадотропін. Клітини ендокринних раків експресують нейрон-специфічну енолаза (NSE), хромогранин і ін. Позитивні на виментин і негативні на загальний цитокератин (CK-Pan) мягкоткание пухлини є новоутвореннями мезенхимальной природи (лімфоми, саркоми), деякими нейрогенними пухлинами, або меланомами.
Анапластичні пухлини, що дають забарвлення на виментин підрозділяються на лімфоми (Т- і В-клітинні), меланому (позитивна реакція з білком S-100), міогенні саркоми (позитивні реакції на гладком'язових актин, десмин, міоглобін), ангіосаркоми (реагують з антитілами до фактору VIII згортання крові, CD31), злоякісну фіброзну гістіоцитів (експрессірует альфа-1-антитрипсин, CD68, лізоцим, альфа-1-антіхімотріпсін, іноді білок S-100), фібросарком, реагує з віментин і CD34).