До теорії взаємодії ацетилхоліну з холінестеразою, але мабуть, застосовні висунута раніше гіпотеза [58]. Відповідно до неї, активні центри ензиму утворюються в момент взаємодії субстрату з ензимом і в результаті конформаційної перебудови третинної структури молекули ензиму прп наближенні молекули субстрату [59]. Висловлювалося також припущення. що і в холінорецептор повинні відбутися певні зміни конформації, щоб він міг з'єднатися з ацетилхоліном або з іншим холинергическим речовиною. [C.98]
Відомо багато фактів конкурентного гальмування. Так, активність дріжджовий сахарази пригнічується фруктозою, активність ксантиноксидази - аденін і т. Д. Ці факти свідчать не тільки про освіту з'єднання ензим-субстрат, але і доводять, що субстрат приєднується лише до деяких певним групам ензиму. Разом з тим конкурентне гальмування вказує на крайню специфічність природи сполуки ензим -субстрат. [C.261]
Незважаючи на всі ці ускладнення, загальний висновок такий, що при гідролізі ефірів (і подібних до них субстратів) за допомогою ензимів здійснюється механізм, в якому відбувається комбінована нуклеофільних і електрофільного атака групами, розташованими строго певним чином в активному центрі молекули ензиму, [c.324 ]
Складні взаємини між різними залозами внутрішньої секреції. регулюючими вуглеводний обмін. ще не з'ясовані. Так, відомо, що для нормального балансу розщеплення і синтезу вуглеводів необхідні секрети щитовидної залози (тироксин), підшлункової залози (інсулін) і кори надниркових залоз. Нещодавно Корі і Корі показали, що екстракти кори надниркових залоз, а також певні фракції гіпофіза, здатні надавати гальмівну дію на активність гексокінази. ензиму м'язів, контролюючого оборотне фос-форілірованіе глюкози - важливий етап в процесі використання глюкози тваринам організмом. Це гальмування знімається інсуліном, хоча сам по собі, за відсутності гальмуючих чинників гіпофіза або надниркових залоз, інсулін не впливає на активність гексокінази. Ефект дії передньої долі гіпофіза не залежить від адренокортикотропного гормону. так як він неактивний. Гормони кори надниркових залоз з атомом кисню при СЦ, що володіють глікогенній активністю, не роблять гальмуючого дії аморфна фракція активна. Однак дія екстракту кори надниркових залоз ке просте воно проявляється на екстрактах з м'язів тварин, хворих на діабет. але відсутня в дослідах з екстрактами м'язів нормальних тварин, якщо до них не додана активна фракція екстракту передньої долі гіпофіза. [C.448]
У патогенезі іщеміческого міокардиту певну роль грає ензимну система ксантин-оксидази. При вивченні понад 103 різних флавоноїдів найбільш активними в інгібуванні цього ензиму виявилися 6- і 8-заміщені флавони з вільними 5 і 7 гидроксилами з рослин сімейства губоцвітих) 180]. [C.137]
У наших дослідженнях співвідношення активності різних ферментних систем при впливі хімічних веш, ЄСТВ вивчалося стосовно до ферментних систем. пов'язаним в певному метаболічному циклі. Наприклад, при дії деяких отрут реєструються порушення в обміні біогенних амінів. Для оцінки активності ензимів даних метаболічних циклів досліджувався набір з трьох ферментів моіоаміноксідази, каталази і альдегіддегідро колагенази (ксантиноксидази). Досліди Н. А. Качурин показали можливість здійснювати оцінку дії хімічних речовин на організм зі зміни активності ряду ферментів одного метаболічного циклу. Такі дослідження дозволяють іноді виявити зміни, що вислизають від експериментатора при вивченні активності окремих ферментних систем. [C.242]
Істотна відмінність між ензимом та звичайним гетерогенним каталізатором полягає в тому, що перший здатний підживлювати енергією активації свої про-стетическое групи навіть при реакціях з малими тепловими ефектами завдяки практично повній рекуперації енергії за допомогою протеїнового носія в кристалічних ж каталізаторах ця підживлення відбувається тільки починаючи з певного мінімального значення Qp (приблизно +20 ккалХ Хмоль), завдяки помітному розсіювання енергії в кристалічній рещетке. Передбачається, що підвищення каталітичної активності в обох випадках відбувається через послідовне зниження енергії активації реакції. [C.43]
Хімічно все ензими є протеїнами, але вони можуть асоціювати з небілковими речовинами (званими коензимами, або простетичної групами), які справляють істотний вплив на весь ензим. Іноді ензими каталитически неактивні за відсутності іонів певних металів. Існують різні докази того, що своєю каталітичної активністю ензі- [c.284]
Явище, подібне до того, яке спостерігається при надлишку кисню, викликається також надмірною світлом. Швидкість фотосинтезу зростає до певної інтенсивності світла, яка для рослин, пристосованих до прямого сонячного світла, має величину порядку приблизно 50 000 люкс. З подальшим посиленням світла інтенсивність фотосинтезу стає постійною, очевидно, від того, що один з беруть участь у фотосинтезі ензимів має обмежену активність і тому може утворити або іспо.11ьзовать лише певну кількість проміжних продуктів. необхідних для (або доставляються за допомогою) первинного фотохімічного процесу. У фотосамоокісленія немає таких обмежень, і його швидкість продо.1жает рости довгий час після того, як фотосинтез досяг світлового насичення. Цим пояснюються світлове гальмування і світлове поврежденіе- явище соляризації, т. Е. Розчинення залишків крохмалю в листі на сильному світлі [15] ці явища були відомі ще задовго до того, як з'ясувалося їх ставлення до фотосинтезу. [C.539]
Температура, з одного боку, прискорює саму ферментну (каталітичну) реакцію, зокрема, всі три послідовні стадії її утворення проміжного комплексу ферменту з субстратом, перетворення його в комплекс фермент - продукт і, нарешті, дісоціацію продукту. З іншого боку, вона прискорює денатурацію, т. Е. Руйнація, інактивацію ферментного білка. Таким чином. з підвищенням температури при ферментних реакціях. як і взагалі при хімічних процесах. росте реакційна здатність. росте справжня каталітична активність, т. е. швидкість перетворення субстрату. Але ферменти є білки, які можуть незворотно денатурованого, причому швидкість денатурації збільшується при нагріванні у багато разів швидше, ніж швидкість будь-якого іншого хімічного перетворення. Тому протилежний процес (інактивація), пов'язаний зі зменшенням концентрації ферменту, обумовлює при подальшому підйомі температури уповільнення реакції. Для ферментного дії характерно, що нагрівання спочатку призводить до збільшення швидкості реакції. а потім, пройшовши через певний рівень, - до її швидкого зниження. Якщо це зобразити графічно, то на графіку можна спостерігати здається (помилковий) температурний оптимум іншими словами, при деякій температурі дію ферменту є максимальним. Температурний оптимум може змінюватися в залежності від умов реакції. складу системи. походження ферменту. Відомо, що ензими, як і всі інші білки. мають різну термостабильностью, т. е. виявляють дуже різну чутливість до нагрівання. [C.47]
Для оцінки сили антихолінестеразну дії препаратів ми користувалися величиною / 50, яку отримували при визначенні активності проб ферменту, попередньо експонованих протягом 10-12 хв. при 38-39 ° з різними концентраціями інгібітору. Визначення активності холінестерази вироблялося за принципом, використаному Платт-пером і галерей (1928) з тією відмінністю, що кількість ацетилхоліну, що залишився незруйнованим після контакту з ензимом, визначався не па біологічному об'єкті. а фотоколориметрично, за методом Хестріна (1949). Як джерело істинної холінестерази використовувалася кров корови, як джерело неправдивої холінестерази - сироватка крові коня. [C.463]
Темпзратура. Взагалі кажучи, швидкість реакції. ензиматичною або будь-якої іншої природи. зростає з підвищенням температури згідно з правилом Вант-Гоффа. швидкість реакції подвоюється при підвищенні температури на кожні 10 °. Ензими нестійкі при підвищених телшературах вони руйнуються при нагріванні до 100 ° в присутності води і часто швидко інактивуються при температурах, що перевищують 60. Встановлено, що для кожного ензиму існує своя оптимальна температура. при якій він володіє найбільшою активністю. Ця температура є, однак, певною тільки в зв'язку з іншими змінними факторами. [C.332]
Букер і Хаслам [53] модифікували метод Нойбекера і Речниця [51] і застосували електрод з иммобилизованной уреазой для оцінки активності аргінази. Процедура визначення полягала в наступному 1 мл розчину аргінази упорскували в буферний розчин (0,1 М трис-буфер. PH = 7,5), що містить аргінін, і стежили за зміною в часі потенціалу уреазної електрода, включеного проти НКЕ. Якщо побудувати графік залежності початкових значень кутового коефіцієнта (AE / At) або AElAt після 30 з від концентрації ензиму або субстрату, виходять прямі лінії. Цей потенциометрический метод визначення аргінази краще спектрофотометрического, незважаючи на велику чутливість останнього. [C.339]
Для повної дисоціації синильної кислоти. забезпечує визначення всіх N за допомогою електрода. необхідно підтримувати pH розчину на рівні 12,7. В роботі [71] описаний покращений варіант електрода, що відрізняється від раніше розглянутих тем, що р-глюкозидаза иммобилизована в поліакриламідному гелі і надійно фіксована на чутливій поверхні N -селективного електрода. Для підтримки pH> 10 в розчин додавали буферну суміш (бура + NaOH) при кімнатній температурі. Однак в кінетичних дослідженнях. при яких стежили за зміною початкової швидкості гідролізу амигдалина [71], N селективний електрод реєстрував присутність в розчині N "і при pH = 6,4, що використовували для визначення активності р-глюкозидази зі зміни кількості N. Активність ензиму оцінювали відповідно до рівняннями (XI.26) і (XI.27) за початковою швидкості освіти N, що відбивається в швидкості зміни потенціалу. в цьому випадку при десятикратному зміні концентрації N "потенціал змінювався на 64 мВ при 37 С. [c.345]
Лленадо і речниця вивчали функціонування автоматизованих систем, в яких можливе швидке визначення активності ензиму [731. Корисність створення безперервних автоматичних проточних систем, в яких використовувалися електроди, селективні до іонів ціаніду [см. рівняння (XI.28) і (XI.23)] і йодиду [см. рівняння (XI.7)], продемонстрована на прикладі визначення активності р-глюкозидази, роданези і глюкозооксидази. [C.346]
Ферментативна (ензиматична) активність. Ферменти або ензими є групою органічних сполук специфічної природи. функцією яких є Скореня (каталіз) певних біохімічних реакцій. Багато з ферментів ізольовані і очищені в достатній мірі для отримання кристалів. Всі ферменти, приготовані таким чином в чистому стані. виявилися білками, простими або складними. [C.69]
Вибір стандартних станів. Як було встановлено вище, при денатурації протеїнів і дезактивації ензимів величини ДВ. Д5 і до деякої міри АГ змінюються зі зміною pH розчину. Так як ці термодинамічні величини віднесені до стандартних станів реагіруюіц1х речовин і активованого комплексу. то зазначений факт може здатися дещо дивним. Складність полягає в тому, що обрані стандартні стану є змінними і віднесені до іона водню. так як зазвичай по ньому вимірюється концентрація або активність в реагує системі. Константа швидкості будь-якої реакції при певних температурі і тиску буде дійсно постійної в тому випадку, якщо в рівняння для швидкості входять активності всіх речовин, які беруть участь в рівновазі між початковим і активованим станами. [C.427]
Якщо пригнічення викликано тим, що нуклеофільниє центри не беруть участі в ряді важливих біологічних процесів. як це показано в рівнянні (1), то розчинник, або біофаза, буде надавати невеликий вплив, так як воно буде, па мабуть, однаковим або майже однаковим у всіх організмах [121]. Системи ензимів, біологічно активних білків. або пептидів (атакується реагент V), що мають нуклеофільниє центри (5Н. наприклад), в різних організмах відрізняються за кількістю і (або) характеру, так що це буде чинити певний вплив на токсичність. Однак найбільш важливі фактори, які керують токсичністю реагенту НХ, залежать від характеру залишку X і груп, з'єднаних з атомом вуглецю в К. В разі специфічних видів. таких, як цитрусова нематода, перші два фактори залишаються постійними і тільки останні два впливають на токсичність. Підтвердження цього було отримано під час випробування великої кількості органічних галоїдопохідних і інших з'єднань в грунті і оцінці їх впливу не тільки на цитрусову нематоду, але також на гриби і бактерії [132]. Цей механізм є новим по відношенню до нематод, але не єдиним, якщо розглядати це питання в світлі численних досліджень, присвячених токсичності органічних галоїдопохідних і інших реакційноздатних сполук з використанням інших організмів. Вважають, що алкілування тіольний груп. присутність яких, як відомо, необхідно для багатьох ензимних систем 13], пояснює токсичність галоідірованних кислот для кімнатних мух [6], бактерицидні властивості вініл-сульфонов [133], наривні і лакріматорние властивості численних органічних галоїдопохідних [7, 44] і фунгіцидну активність алкілізотіоціанатов [157]. [C.107]
Визначення активності оксидази ІОК в рослинах соняшнику, вирощеного при нестачі бору, марганцю і цинку, показали, що зміни активності ауксіноксідази не тільки мають вторинний характер, але і не є специфічними для бору, так як виняток марганцю і цинку з середовища, як і бору, призводило до зменшення активності цього ензиму (Крупнікова, 1964). [C.115]
І що розвиваються потім в Інституті хімії природних сполук АН СРСР, дозволили сформулювати принципи побудови ділянки молекули хлорамфеніколу, ймовірно взаємодіє зі специфічними угрупованнями ензимів, і пояснити характер впливу пов'язаних з цим центром груп. На підставі проведених псследованій були зроблені висновки. що антибактеріальна активність хлорамфені-KO.ua залежить від трьох чинників 1) строго визначених геометричних розмірів і відповідної конформації амінопронанднольной цепп [c.546]
Діхлорацетільний залишок хлорамфеніколу розташований в безпосередній близькості до тих активним угрупованням його молекули, які забезпечують приєднання антибіотика до специфічних центрам бактеріальних ензимів тому ацильний залишок повинен не тільки виявляти відоме поляризующее дію на амінопропандіольную ланцюг, але і одночас) Ємен відповідати певним геометричним требованіяме- 1121,1145 [c.401]
Таким чином. висока антибіотична активність хлорамфеніколу визначається одночасно трьома факторами 1) строго визначеними геометричними розмірами і відповідної конформацией амінопропандіольной цзпі 2) сильним поляризующим дією р-нітрофенільного радикала, геометричні розміри якого не мають істотного значення 3) сильним поляризующим дією діхлорацетільного залишку, який повинен одночасно задовольняти і певним геометричним вимогам. Поляризующее дію р-нітрофенільного радикала істотно відбивається на електронному характері атома С1 алифатической ланцюга і пов'язаної з цим атомом гідроксильної групи. тоді як поляризующее дію діхлорацетільного залишку позначається насамперед на електронному характері атома азоту, причому в обох випадках відбувається значне зниження електронної щільності. Поєднання цих впливів з просторове зближення і доступністю аціламіно- і оксигрупп обумовлює сильне взаємодія молекули антибіотика зі специфічними пептидними угрупованнями деяких ензимів, що і призводить зрештою до порушення обміну у мікроорганізмів. [C.402]