У цих реакціях беруть участь антигени у вигляді частинок (мікробні клітини, еритроцита і інші корпускулярні антигени), які склеюються антитілами і випадають в осад.
Залежно від виду використовуваного іммунодіагностікума розрізняють реакцію мікробної аглютинації, гемаглютинації, латекс-аглютинації, коагглютинации і т. Д.
Для діагностики інфекційних захворювань реакцію аглютинації проводять в двох напрямках: визначають вид виділеного від хворого мікроба-збудника за допомогою діагностичної агглютинируют сироватки (серологічна ідентифікація мікроба) і виявляють специфічні антитіла в сироватці хворого, використовуючи стандартний мікробний диагностикум (серодиагностика захворювання, постановка серологічного діагнозу).
Розрізняють пряму і непряму реакції аглютинації
Реакція прямої аглютинації мікробів (РА). У цій реакції антитіла (аглютиніни) безпосередньо агглютинируют корпускулярні антигени (агглютаногени). Зазвичай вони представлені суспензією інактивованих мікроорганізмів (реакція мікробної аглютинації). За характером утворюється агглютіната розрізняють зернисту і пластівчасту агглютинацию. Зерниста аглютинація відбувається при склеюванні мікробів, що містять О-антиген. Бактерії, що мають джгутики (Н-антиген), агглютинируются з утворенням великих пластівців.
Для визначення виду мікроорганізмів використовують стандартні діагностичні агглютинирующие сироватки. Їх отримують гипериммунизации лабораторних тварин суспензією бактерій. Титром такої сироватки є її найбільше розведення, при якому спостерігається виразна аглютинація відповідного антигену. Однак через складність антигенної структури бактерій, агглютинирующие сироватки містять антитіла не тільки до видоспецифічні, але і до групових антигенів і можуть давати групову агглютинацию з родинними видами бактерій. Титри антитіл до видоспецифічні антигенів в сироватці завжди вище, ніж до групових. Для видалення группоспецифических антитіл в сироватку послідовно додають мікроорганізми, до складу яких входять групові антигени (метод Кастеллани). Таким методом отримують адсорбовані сироватки, які містять антитіла до певного виду мікроба.
Методи реакції аглютинації. Найбільш поширені пластинчатая (орієнтовна) і розгорнута РА. Пластинчасту РА ставлять на склі. У цій реакції використовують сироватки з невеликим розведенням або нерозведені. Використовують її як прискорений метод виявлення антитіл або ідентифікації мікроорганізмів. На скло наносять краплю сироватки, в яку петлею вносять невідому культуру бактерій, перемішують і через 2-3 хвилини спостерігають появу дрібнозернистої або пухкі аглютинації. Для контролю використовують краплю фізіологічного розчину, в якій після внесення бактерій спостерігається помутніння. При використанні неадсорбованими сироваток реакція на склі має тільки орієнтовне значення.
Розгорнуту РА проводять в пробірках або лунках пластин. При цьому діагностичну сироватку розводять до титру і вносять однакові кількості антигену. При позитивному результаті на дні пробірки утворюється пухкий осад у вигляді "парасольки", при негативному - осад у вигляді "ґудзика". Оскільки титри группоспецифических антитіл в сироватці значно нижче, ніж титр видоспецифических, групові реакції спостерігаються лише в невеликих розведеннях сироватки. Якщо аглютинація відбувається до титру або до половини титру сироватки, вона є відоспеціфетеской.
Для визначення антитіл в сироватці хворого (серологічний діагноз) використовують стандартний мікробний диагностикум, що містить суспензію відомих мікробів або їх антигенів. У цьому випадку також можна ставити пластинчатую і розгорнуту РА.
Реакція прямої аглютинації клітин. Для визначення груп крові використовують стандартні сироватки крові донорів, які містять відомі анти-А або анти-В антитіла. Реакції ставлять на склі або пластинах. При наявності на еритроцитах А (2-я група крові), В (3-я група крові) або обох антигенів (4-я група крові) відповідні сироватки агглютинируют еритроцити. Застосовується також проба на сумісність крові, коли краплі крові донора і реципієнта змішують і оцінюють агглютинацию.
У клініках застосовують реакцію аглютинації лейкоцитів, тромбоцитів та інших клітин для виявлення аутоантитіл, а також для визначення антигенів на цих клітинах.
Реакція непрямої (пасивної) аглютинації. Для отримання феномена аглютинації антиген попередньо адсорбируют на корпускулярном носії, яким служать інертні частки (латекс, целюлоза, полістирол, оксид барію і ін.) Або клітини (еритроцити барана, I (0) -групи крові людини).
В реакції пасивної гемаглютинації (РПГА) в якості носія використовують еритроцити. Навантажені антигеном еритроцити склеюються в присутності специфічних антитіл до даного антигену і випадають в осад. Сенсибілізовані антигеном еритроцити використовують в РПГА як еритроцитарний антигенний диагностикум для виявлення антитіл (серодиагностика, встановлення серологічного діагнозу). Якщо навантажити еритроцити антитілами, то їх можна застосовувати для виявлення антигенів.
Пряма і непряма антііммуноглобуліновие реакції Кумбса. Використовуються для виявлення "неповних" (неагглютінірующіх) антитіл, які утворюються при різних захворюваннях: резус-конфлікт, аутоімунних захворюваннях, деяких інфекціях. Для постановки цих реакцій необхідна антиглобулінова сироватка, яку отримують шляхом імунізації кролика імуноглобулінами людини. Така сироватка містить повні (бівалентні) антитіла-антііммуноглобуліни.
Пряма реакція: до відмитим еритроцитів крові хворого додають антііммуноглобуліновую сироватку. Якщо на еритроцитах є неповні антитіла (імуноглобуліни), що спостерігається при гемолітичній анемії, резус-конфлікт (еритроцити плода), то вони агглютинируются.
Непряма реакція виявляє вільні антиеритроцитарні антитіла в сироватці крові хворого. До цієї сироватці додають відмиті еритроцити донора 0 (I) групи крові. Суміш інкубують при 37 ° С протягом 30 хвилин і відмивають еритроцити. Потім до них додають антііммуноглобуліновую сироватку. Якщо в сироватці хворого були неповні антиеритроцитарні антитіла, то настане аглютинація.