Приготування гістологічних зрізів
Для отримання гістологічних зрізів застосовують спеціальні мікротомних ножі, що розрізняються за формою, довжині і куту перетину леза. За формою вони являють собою складний сталевий клин, у якого ріжучий край має додаткову клиновидную заточку. Довжина ножа може становити від 8 до 50 см.
По конфігурації леза розрізняють три групи мікротомних ножів: А, В і С. У мікротомних ножів, що відносяться до групи А, одна поверхня рівна, а інша увігнута (їх називають плоско-увігнутими з великою кривизною увігнутій поверхні). Ці ножі найчастіше виготовлені з м'якої або щодо м'якої сталі і призначені для різання об'єктів, залитих в целлоидин.
Ножі, які відносяться до групи В, називаються плоско-увігнутими, але кривизна увігнутій поверхні у них значно менше, ніж у ножів групи А. Вони виготовлені з більш твердої сталі, використовують їх для приготування целлоідінових і целлоидин-парафінових зрізів.
У ножів, що відносяться до групи С, обидві поверхні клинка плоскі. Їх виготовляють з твердої сталі і застосовують для різання об'єктів, залитих в парафін, а також для отримання зрізів на заморожувати мікротому.
Крім того, для приготування парафінових і напівтонку зрізів на мікротомів і ультратомах використовують металеві магнітні леза і скляні ножі. Металеве магнітне лезо (одноразовий ніж) дозволяє отримати зрізи з 50- 60 парафінових блоків, потім лезо змінюють. Виготовлення та застосування скляних ножів - див. Розділ 12.
Заточення мікротомних НОЖЕЙ
Отримати якісні гістологічні зрізи при целлоідіновой, целлоидин-парафінової і парафіну заливці матеріалу можна за допомогою мікротомних ножа, товщина леза якого повинна бути від 3 до 5 мкм. Для роботи на заморожувати мікротому необхідно мати гострий ніж без зазубрин на лезі. Ніж необхідно своєчасно точити, а перед кожною рез
кой об'єктів правити. Мікротомних ножі заточують за допомогою спеціальних апаратів, наприклад «За) гога» 1Японія). Однак до сих пір не втратила актуальності і застосовується в багатьох лабораторіях ручна заточка ножів. Вручну мікро- важкі ножі точать на камені, що має форму бруска. Жовтий, так званий бельгійський камінь використовують для заточування першим, потім продовжують заточку на білому камені (Арканзас), який має більш дрібну зернистість. Можна використовувати природний аспідний камінь, який також має грубозернисту і дрібнозернисту поверхню.
Перед заточкою на поверхню каменю наносять машинне масло або гас, гліцерин, розведений 70% спиртом 11: 1), мильну воду. На спинку ножа надягають спеціальний обушок 1желательно постійно використовується для заточування одних і тих же ножів - це визначає кут заточування), а в стрижень або отвір в торцевій частині ножа вкручують ручку. Потім ніж кладуть обушком на камінь, по якому ковзає і лезо під дією власної ваги. Ніж проводять по каменю з одного кінця на інший, а потім, повертаючи через обушок, здійснюють рух в зворотному напрямку.
Тривалість процесу залежить від кваліфікації лаборанта і стану різальної крайки ножа. В середньому вона становить від 30 хв до 1 год. Періодично контролюють якість заточування, обережно укладаючи ніж на предметний столик мікроскопа і переміщаючи його так, щоб ріжуча кромка проходила через поле зору при малому збільшенні. Потім ніж правлять на широкому ремені, натягнутому на дерев'яну колодку. Правку проводять так само, як і заточку (через обушок).
Мікротомів І ОСОБЛИВОСТІ РОБОТИ НА НИХ
Мікротоми - це прилади, за допомогою яких отримують зрізи тканин, залитих в різні середовища, а також заморожених і нефіксованих. Мікротоми дозволяють отримувати гістологічні зрізи різної товщини. За принципом дії розрізняють санні, ротаційні, заморожують мікротоми, а також кріостати і вібратоми.
З а н н и е м і до р о т о м и характеризуються горизонтальним рухом ножа і вертикальним підйомом блокодержателя. Їх з успіхом використовують для різання об'єктів, залитих в целлоидин, целлоидин-парафін і парафін. Основні частини мікротома розташовуються на спеціальних санчатах, звідси походить його назва. Принцип роботи санного мікротома полягає в тому, що при зворотному ході ножа ножові санчата штовхають стрижень зі шкалою регулятора подачі, викликаючи його переміщення. Рух стрижня передається на тягу, яка за допомогою чсобачкіе повертає храповик. обертання
