1. Організм лабораторних тварин
Лабораторних тварин (дорослих або новонароджених білих мишей, хом'яків, кроликів, мавп і ін.) Заражають досліджуваним вируссодержащим матеріалом різними способами (підшкірно, внутрішньом'язово, інтраназально, интрацеребрально і ін.) В залежності від тропізму вірусів. Використання тварин для культивування вірусів в діагностичних цілях вельми обмежена через видовий несприйнятливості тварин до багатьох вірусів людини, контамінації тварин сторонніми мікробами, а також з економічних і етичних міркувань.
2. Курячі ембріони
Курячі ембріони (5-12 денні) заражають шляхом введення досліджуваного матеріалу в різні порожнини (аллантоісная, амніотична), жовтковий мішок і тканини зародка. Таким чином, можна культивувати віруси грипу, герпесу, натуральної віспи та ін. Перевагами моделі є можливість накопичення вірусів в великих кількостях, відсутність прихованих вірусних інфекцій, доступність для будь-якій лабораторії.
3. Клітинні культури
Культуру клітин (тканин) найбільш часто застосовують для культивування вірусів. Метод культур клітин розроблений в 50-х роках XX століття Дж. Ендерсом і співавт. які отримали за це відкриття Нобелівську премію. Клітини, отримані з різних органів і тканин людини, тварин, птахів та інших біологічних об'єктів, розмножують поза організмом на штучних поживних середовищах в спеціальній лабораторному посуді. Великого поширення набули культури клітин з ембріональних і пухлинних тканин, що володіють у порівнянні з нормальними клітинами дорослого організму, більш активної здатністю до зростання і розмноження.
Типи тканинних культур
Типи клітинних культур
1. Первинні (трипсінізірована) культури - фібробласти ембріона курки (ФЕК), людини (ФЕЧ), клітини нирки різних тварин. Їх отримують з клітин різних тканин шляхом роздрібнення і тріпсінізаціі. Використовують одноразово, тобто постійно необхідно мати відповідні органи або тканини.
2. Лінії диплоїдних клітин (полуперевіваемие) придатні до повторного диспергированию і зростання, як правило, не більше 40-50 пасажів (втрачають вихідні властивості). Їх зазвичай отримують з диплоїдних клітин ембріона людини. В процесі пасажів ці культури зберігають диплоїдний набір хромосом, не зазнають злоякісної трансформації, але мають обмежену тривалість життя.
3. перевивали лінії (гетероплоідние культури). здатні до багаторазового диспергированию і перевіванію, тобто до багаторазових пасажів. Найбільш зручні в вірусологічної роботі - лінії пухлинних клітин Hela (рак шийки матки), Hep (рак гортані).
Методи індикації вірусів
Індикація вірусів - виявлення факту їх репродукції, заснована на виявленні різних біологічних властивостей вірусів і особливостей їх взаємодії з чутливими клітинами.
Індикацію вірусів проводять на основі наступних феноменів: ЦПД вірусів, освіти внутрішньоклітинних включень, утворення бляшок, реакції гемаглютинації, гемадсорбції, «кольорової» реакції (табл.37).
Таблиця 37. Методи індикації вірусів
ЦПД -видимому під мікроскопом морфологічні зміни клітин (аж до їх відторгнення від скла), що виникають в результаті внутрішньоклітинної репродукції вірусів