дослідження крові
Морфологічні особливості лейкоцитів
При диференціації лейкоцитів в забарвлених препаратах мають значення наступні морфологічні ознаки:
- величина і форма клітини (молоді клітини переважно крупніше зрілих, форма клітин частіше кругла, рідше неправильна);
- ядерно-цитоплазматическое співвідношення (відношення ядро / цитоплазма зазвичай тим вище, чим молодша клітина);
- форма ядра і його хроматиновой будова (форма ядра у молодих клітин кругла або злегка увігнута, малюнок ядра ніжніший, колір світліший, ядра багаті оксіхроматіном, у зрілих клітин більш грубий ядерний хроматин, ядра темно-фіолетового кольору, містять базіхроматін);
- наявність або відсутність в ядрі нуклеол, їх число і величина: нуклеоли зазвичай світло-синього або світло-фіолетово-синього кольору, знаходяться в ядрах бластних клітин;
- колір і структура цитоплазми (цитоплазма молодих клітин базофильна, при дозріванні стає оксифильной, в ряді клітин навколо ядра є просвітлення);
- наявність в цитоплазмі зернистості (величина, колір), вакуолей, пігментних зерен і фагоцитованих елементів (паразитів, еритроцитів).
Лейкоцити периферичної крові діляться на гранулоцити і агранулоціти (лімфоцити, моноцити). Гранулоцити - клітини, в цитоплазмі яких визначається зернистість, специфічна для певного виду клітин. Розрізняють нейтрофільних, еозинофільних і базофильную зернистість.
Нейтрофільна зернистість рожево-фіолетового забарвлення, частіше пилоподібна, рясна, не завжди рівномірно заповнює цитоплазму.
Еозинофільна зернистість однорідна за кольором, формою і величиною, велика, займає всю цитоплазму. У зрілих клітинах еозинофільного ряду вона має цегельно-рожевий колір (кетова ікра), в молодих - коричневий і буро-синій відтінок.
Базофільна зернистість частіше фіолетового, рідше чорного кольору, неоднорідна за розміром і формою, зазвичай необільних, розташовується на ядрі і в цитоплазмі.
Лімфоцити, моноцити можуть містити азурофільную зернистість рожево-фіолетового кольору, яка називається неспецифічної.
Паличкоядерні нейтрофіли - це клітини розміром 9-12 (10-15) мкм, що мають темно-фіолетове ядро, вузьке, витягнуте у вигляді палички середньої товщини, часто вигнутою. Структура ядра груба, нерівномірна, крупно-глибчатого, без нуклеол. Цитоплазма рожевого кольору, іноді з фіолетовим відтінком займає більшу частину клітини, містить багату нерівномірну дрібну рожево-синю або блідо-фіолетове зернистість.
Паличкоядерний нейтрофільний лейкоцит
Сегментоядерние нейтрофіли мають розмір 10-15мкм, полиморфное вузьке ядро розділене на 3-5 окремих сегментів, з'єднаних тонкими, не завжди помітними перемичками. Базіхроматін ядра накопичується в окремі грубі грудочки, переважно по периферії ядра, фарбуючи його в темно-фіолетовий колір. Структура ядра нерівномірна, крупногл ибчатая. Цитоплазма рожевого кольору, містить багату дрібну блідо-фіолетове зернистість. Ядерно-цитоплазматическое ставлення зрушено на користь цитоплазми. Полісегментірованних нейтрофіли (6-12 сегментів і більш) зустрічаються при патології - В12-дефіцитної анемії, хронічному мієлофіброзі, МДС, променевої хвороби.
Еозинофільні гранулоцити - клітини розміром 12-15 мкм, мають більш велике ядро, ніж у нейтрофілів, і менша кількість сегментів (2, рідше 3). Ядро пухке, забарвлюється блідіше, ніж у нейтрофілів, а цитоплазма блідо-рожева (блідо-блакитна у еозинофільних паличкоядерних гранулоцитів). Зернистість рясна, велика, рожева, займає всю цитоплазму. Паличкоядерні еозинофільні гранулоцити зустрічаються рідко.
Базофільні гранулоцити мають дещо менший розмір - 8-12 мкм. Базофільні паличкоядерні гранулоцити практично не зустрічаються. Ядро сегментоядерних базофілів порівняно велике, Темна, безструктурне, розпливчасте і рідко розділене більш ніж на дві частини. Базофільні сегменто гранулоцити мають трехсегментірованное, порівняно велике фіолетове ядро, іноді невизначеної форми або у вигляді листа рослини. Структура ядра нерівномірна, крупноглибчатая. Цитоплазма фіолетова або блідо-рожева, нерідко з розмитими ділянками (частина зерен розчиняється в воді), містить необільную, нерівномірну зернистість бруднуватого темно-фіолетового кольору, розташовану на ядрі і в цитоплазмі. Сегментоядерние базофіли відрізнити від паличкоядерних форм в більшості випадків неможливо через рясної зернистості, що покриває ядро.
Лімфоцити є унікальною за різноманітністю популяцію клітин, що походять з різних попередників і об'єднуються єдиної морфологією. За походженням лімфоцити поділяються на дві основні субпопуляції: Т-лімфоцити і В-лімфоцити. Розподіл клітин лімфатичного ряду за ступенем зрілості на підставі морфологічних рис є умовним і не може претендувати на послідовність проліферації і диференціювання, як в інших паростках кровотворення. Дуже часто клітини-попередники при світловій мікроскопії приймають за лімфоцити. Лімфоїдні елементи крові та кровотворних органів при зовнішньому морфологічному схожості можуть бути різноспрямованими як в функціональному відношенні, так і за ступенем зрілості. Лімфоцити - один з найбільш поліморфних класів клітин, вивчення лімфоцитів крові здорових осіб в світловому та електронному мікроскопах показало, що за розмірами, морфологічною будовою ці клітини неоднорідні (Файнштейн Ф. Е. і ін. 1976).
Великі лімфоцити (12% від загального числа лімфоцитів) характеризуються присутністю в цитоплазмі вільних рибосом, мітохондрій і довгих канальців ендоплазматичної мережі. У цих клітинах ядро велике, широка зона цитоплазми, хроматин менш щільний, ніж у малих лімфоцитів, розподіляється рівномірно, майже завжди виявляється ядерце.
Малі світлі лімфоцити складають 15% всіх лімфоцитів периферичної крові і відрізняються від інших груп клітин бідної органеллами цитоплазмою. Через незначної кількості рибосом їх цитоплазма виглядає світлою. Ядро займає практично всю клітку, наближається до сферичної формі. Іноді в ядрах виявляється досить глибока борозна або виріз. Хроматин, як правило, має вигляд грубих, компактних грудочок. Значний обсяг ядра по відношенню до цитоплазми становить суттєвий морфологічна ознака лимфоцита. Жодна інша клітина в організмі не має менше цитоплазми, ніж лімфоцит.
Малі темні лімфоцити (12%) містять велику кількість рибосом в цитоплазмі, що обумовлює їх темне забарвлення в світловому мікроскопі, гранулярна ендоплазматична сітка розвинена слабо.
Лімфоплазмоціти в периферичної крові здорових осіб зустрічаються рідко (менше 1%). Ядерно-цитоплазматическое ставлення зрушено в бік збільшення ядра. Ядро зазвичай кругле, але іноді з однією або декількома виїмками, розташоване в центрі клітини або ексцентрично. Щільний хроматин розподіляється нерівномірно, в основному Сконденсована уздовж ядерної мембрани. В ядрі видно одне, рідше два ядерця, що мають компактну або кільцеподібної форми.
Е. А. Кост (1975) описує в крові здорових осіб два види зрілих лімфоцитів.
- Узкоцітоплазменние лімфоцити зустрічаються найбільш часто. Це досить вузькі клітини, розмір яких коливається від 7 до 9 мкм (Абрамов М. Г. 1985). Ядро темно-фіолетове, кругле, овальне або з невеликими нерівностями контурів. Іноді ядро має вдавлення, що надає йому бобовидную або ниркоподібну форму. Структура ядра компактна, часто складається з щільних, грубих грудок базіхроматіна, що створює враження глибчатого, і невеликої кількості оксіхроматіна, що імітує ядерця. Цитоплазма розташовується у вигляді вузького обідка, часто ледь помітного, світло-синього кольору, може бути просвітлення навколо ядра. Поодинокі азурофільние включення у вузькій цитоплазмі практично невидимі.
- Шірокоцітоплазменние лімфоцити можуть досягати 12-13 мкм в діаметрі (Абрамов М. Г. 1985). Це клітини з більш блідим ядром, нерідко бобовидной форми і широким обідком менш інтенсивно забарвленою, сірувато-синьою або блакитним цитоплазми. Околоядерное просвітлення менш виразне, ніж у лімфоцитів з вузьким обідком цитоплазми. Деяка частина лімфоцитів має в цитоплазмі неспецифічну азурофільную зернистість, забарвлюється в червоний або фіолетовий колір.
Існує також умовний розподіл лімфоцитів на малі і великі (Карр Я. І. та ін. 1980).
Термін «великий лімфоцит» - синонім Лімфобласти. Малий лімфоцит легко дізнатися по інтенсивно забарвлюється щільному ядру. Досить важко розділити лімфоцити на Т- і В-клітини на підставі морфологічного дослідження. У сканирующем електронному мікроскопі видно, що морфологічно В-лімфоцити мають більш нерівну і ворсинчастий поверхню, ніж Т-лімфоцити.
Моноцити - найбільші клітини, розміром 12-20 мкм. Ядро займає більшу або рівну з цитоплазмою частина клітини. Воно світло-фіолетового кольору, іноді блакитнувате або червоно-фіолетове, поліморфної форми - округле, бобовідное, трехлопастное, у вигляді метелика, з ніжною, рівномірної, крупносетчатой структурою (як би розріджене). Нитки базіхроматіна у вигляді звивистих грубих тяжів утворюють широку сітку з потовщеннями. В осередках сітки є значні просвітління за рахунок оксіхроматіна. Цитоплазма блідо-блакитна або сіра (димчастий), іноді синя, часто містить велику кількість дрібної, пилоподібної, азурофільной зернистості. Нерідко в цитоплазмі містяться вакуолі, розташовані навколо ядра, фагоцитовані клітини, пігментні зерна.