Пластрон самців червоновухих черепах має вм'ятину, яка допомагає під час спарювання. Хвіст у них довгий, трохи потовщений біля основи, саме тут розташований статевий орган черепахи.
Щоб стимулювати процес спаровування черепах у неволі можна поміняти в акваріумі воду на більш теплу. Перед спарюванням самець цікаво заграє з самкою. Він плаває навколо неї і лоскоче їй кігтями підборіддя. Він також може вдарити самку своїм панциром. Парування цих тварин відбувається безпосередньо в воді, а кладку самка робить вже на суші.
Для того щоб у черепах почався період розмноження, необхідна наявність декількох дорослих особин протилежної статі. Вони повинні знаходитися на одній території, в теплій воді при підвищеній вологості повітря. Варто відзначити, що в домашніх умовах черепашки можуть спаровуватися практично цілий рік, але для цього їм необхідно забезпечити відповідні умови. Потрібно збільшити тривалість сонячного дня, за рахунок лампочки і ультрафіолетових променів, а також використовувати тільки теплу воду. Підсаджувати потрібно не самок до самців, а навпаки, таким чином, самці будуть менш агресивні.
Запліднену самку необхідно відсадити від самця, щоб він їй не нашкодив, так як часто самці поводяться досить грубо по відношенню до своїх співмешканців, хоча за розмірами вони набагато менше самок.
Перед Клак у самки можна помітити зміни в настрої: вона стає дратівливою, неспокійною, погано їсть і намагається захистити свою територію. Черепаха відкладає яйця в ямку діаметром 10-20 сантиметрів, яку вона попередньо змочує своєї ж слиною - рідиною з клоакальних бульбашок. Відкладені яйця необхідно якомога швидше перенести в штучний інкубатор. При цьому яйця не можна перевертати і мочити. Необхідно стежити за тим, щоб вони не опинилися у воді. А в разі, якщо червоновуха черепаха запліднилася в воді, то яйця потрібно терміново звідти прибрати в сухе і тепле місце.
Запам'ятайте, що якщо у вас тільки одна самка, то вона все одно буде відкладати яйця, але вони незапліднені, тому не варто їх перекладати в інкубатор, так як це не принесе вам позитивного результату. Перевірити запліднене чи яйце чи ні можна таким способом: якщо яйце в першу добу на просвіт однорідне і має темне плямочка в центрі, то це означає, що воно запліднене, а якщо воно просто однорідне або ж в деяких місцях темне, то це жирове яйце, тобто неоплодотворенное. Через 2 або 3 місяці в заплідненої яйце на світлі буде видно зародок.