Матеріали та обладнання: 1) цибулина синього лука або листя традесканції; 2) 1 М розчин сахарози в крапельниці; 3) лезо бритви; 4) скальпель; 5) пінцет; 6) препаровальной голка; 7) мікроскоп; 8) предметні і покривні скла; 9) стакан з кип'яченою водопровідною водою; 10) скляна паличка; 11) шматочки фільтрувального паперу; 12) спиртівка; 13) сірники.
Короткий теоретичний матеріал. Рослинну клітину можна розглядати як осмотичну систему, в якій роль розчину осмотично діючих речовин грає клітинний сік, а роль напівпроникною перетинки - цитоплазматичні мембрани. Клітинний сік, як і будь-який розчин, має потенційним осмотичним тиском, яке прямо пропорційно числу частинок в одиниці об'єму незалежно від розмірів і характеру цих частинок (молекули, іони). Розчин, відокремлений від чистої води напівпроникною перетинкою (пропускає воду і непроникною для розчинених речовин), смокче воду з силою, чисельно рівний його потенційному осмотичного тиску, тобто тиску, яке потрібно прикласти, щоб перешкодити пересуванню води в сторону розчину.
Для кожної клітини можна підібрати такі розчини: 1) гіпотонічний, осмотичний тиск якого менше осмотичного тиску клітинного соку, 2) ізотонічний, що має осмотичний тиск, що дорівнює осмотичного тиску клітинного соку, 3) гіпертонічний, осмотичний тиск якого більше, ніж тиск клітинного соку.
При зануренні клітини в гіпертонічний розчин вода з неї виходить назовні до вирівнювання осмотичних тисків клітинного соку і зовнішнього розчину. При цьому клітина зазнає такі зміни (рис. 1): спочатку клітина скорочується, а після повної втрати тургору протопласт відстає від клітинної стінки по кутах (кутовий плазмоліз) потім у багатьох місцях (увігнутий плазмоліз) і, нарешті, протопласт округляється (опуклий плазмоліз) .
Мал. 1. Послідовні стадії плазмолізу:
1 - тургесцентная клітина; 2 - загальне скорочення клітини; 3 -уголковий плазмоліз; 4 - увігнутий плазмоліз; 5 - опуклий плазмоліз
Утворюється простір між протопластом і клітинною стінкою (добре проникною як для води, так і для розчинених речовин) заповнюється зовнішнім розчином. Як плазмолітіков (речовин, розчини яких викликають плазмоліз) використовують неотруйні речовини, погано проникають або не проникає через цитоплазму в вакуоль.
Плазмоліз - оборотний процес. Зникнення плазми-Молізе називається деплазмолізу.
Хід роботи. Зрізати бритвою шматочок епідермісу, кліть-ки якого містять антоціан. Щоб уникнути пошкодження клітин епідермісу бажано, щоб зріз складався з двох шарів клітин.
Помістити зріз в краплю води на предметне скло, на-крити покривним склом і розглянути в мікроскоп кліть-ки з пофарбованим клітинним соком. Замінити воду 1 М раст-злодієм сахарози, для чого на предметне скло поруч з по-кровним нанести велику краплю розчину і відсмоктати воду шматочком фільтрувального паперу, прикладаючи його з дру-гой боку покривного скла. Повторити цей прийом 2-3 рази до повної заміни води розчином. Весь час стежити в мікроскоп за тим, що відбувається в клітинах.
Зробити схематичні малюнки клітин в стані тургору, уголкового, увігнутого і опуклого плазмолізу, позначення-чив основні складові частини клітин.
Ввести під покривне скло 2-3 краплі води, отсаси-вая розчин фільтрувальної папером, і негайно приставні-пити до спостереження деплазмолізу клітин (зверніть ува-ня на швидкість цього процесу в порівнянні з плазмо-лізом).
Після закінчення деплазмолізу вбити клітини, тримаючи край предметного скла пінцетом і обережно нагріваючи препарат на полум'ї спиртівки, не допускаючи випаровування по-ди. Замінити воду на 1 М розчин сахарози і, розглядаючи препарат в мікроскоп, встановити, чи відбувається плазмоліз.
Записати результати спостережень і відповісти на слідую щие питання:
Що таке плазмоліз і які його причини?
Які типи плазмолізу ви знаєте?
Як відбувається деплазмолізу? Яка швидкість деплазмолізу в порівнянні з плазмо-лізом?
Чи здатні плазмолізіроваться мертві клітини?