Розробка живильних середовищ для лабораторної діагностики кампілобактеріальной інфекції

Ключові слова

термофільні кампілобактерії, виділення, культивування, ідентифікація, поживні середовища

Робота присвячена пошуковим науково-прикладних досліджень в області бактеріологічної діагностики гострих кишкових інфекцій, викликаних термофільними кампілобактеріями. Складається з експериментальних досліджень з культивування та ідентифікації термофільних кампілобактерій, результатів бактеріологічного обстеження групи хворих з гострим діарейним синдромом.

Виходячи з переважання в обміні речовин кампілобактерій глютаминового метаболічного циклу, активність якого залежить від концентрації іонів калію, в результаті експериментальних досліджень з різними поживними основами, розроблені 2 нові живильні середовища для ізоляції, диференціації та культивування термофільних кампілобактерій.

Перша живильне середовище для виділення і диференціації термофільних кампілобактерій (містить кров) складається з переварити казеїнового, пептона ферментативного, екстракту дріжджового, агару, калію хлористого, крові донорської і селективної добавки антибіотиків (цефазолін, рифампіцин, поліміксин М сульфат, низорал). Вона забезпечує через 48 годин інкубації при + 420С в умовах мікроаерофіли і гіперкапнії зростання і формування різних типів колоній для C.jejuni і для C.coli, що дозволяє їх диференціювати по морфології колоній на етапі ізоляції. Це дає можливість прискорити на добу видачу результату дослідження, заощадити кошти на додаткових ідентифікаційних тестах.

Друга живильне середовище для виділення і культивування термофільних кампілобактерій (прозора, без крові) сконструйована на тій же живильної основі, що і перша. В її складі кров замінена L-глутамінової кислотою і сумішшю солей, знижує окислювально - відновлювальний потенціал живильного середовища (метабісульфіт натрію і сульфат заліза). Середовище забезпечує зростання перещеплюваних культур кампілобактерій з типовими морфологічними властивостями через 48 годин інкубації при + 420С в умовах мікроаерофіли і гіперкапнії, а також формування різних типів колоній для C.jejuni і для C.coli, що дозволяє їх диференціювати по морфології колоній на етапі ізоляції.

В процесі розробки і випробування нових поживних середовищ обстежені 182 дитини у віці до 3 років з гострим діарейним синдромом. Результати підтвердили переважання в етіології ОКЗ у дітей молодшого віку термофільних кампілобактерій (18,1%) по відношенню до сальмонел (13,7%) і шигеллам (1,6%). Виділені культури кампілобактерій, вивчені по культуральними та біохімічними властивостями, проведена їх родова ідентифікація, видова і внутрішньовидова диференціація. З виділених культур 43,8% склали C.jejuni (біовар 1 - 64,3% і біовар 2 - 35,7%), 56,2% - C.coli (біовар 1 - 72,2% і біовар 2 - 27 , 8%). Ефективність ідентифікації C.jejuni і C.coli культуральним методом підтверджена повністю біохімічними тестами і генетичними дослідженнями.

При вивченні чутливості виділених культур кампілобактерій до антибіотиків встановлена ​​100% чутливість до еритроміцину, левоміцетин, гентаміцину, фурагіну. Резистентними до цефалоспоринів (цефазолін) були всі виділені штами, до поліміксину Б сульфат - 31,3%, до ампіциліну - 18,8%, до ципрофлоксацину - 15,5%, до налідиксової кислоти - 9,4%. Штами, резистентні до 2 антибіотиків, склали 40,6%; до 3 - 9,4% і до 4 - 6,3%.

Розроблено схему тривалого зберігання культур термофільних кампілобактерії на середовищі "MTC-Campуlobacter" в умовах практичної лабораторії.

Офіційні опоненти

Були виконані 15 дисертацій. (За цією спеціальністю)