Винахід відноситься до засобів специфічної профілактики тварин і може знайти широке застосування у ветеринарній практиці для профілактики сказу великої рогатої худоби.
Відома спеціалізована вакцина для великої рогатої худоби, що містить в своєму складі репродукований в культурі клітин, інактивований -пропіолактоном фіксований вірус сказу, а також сапонін і гідрат окису алюмінію. Препарат досить імуногенний, але легкоуязвім при зберіганні, оскільки випускається в рідкому вигляді. Крім цього, він відрізняється високою собівартістю, так як готується з концентрованого антигену.
Відома також рідка мозкова антирабическая вакцина, що включає в якості специфічного антигену фіксований вірус сказу штам "Москва" - овечий, репродукований в мозку овець, представлений 5% -ної вируссодержащей мозковою тканиною, гідратом окису алюмінію і 0,07% -ним сапоніном.
Недолік її в тому, що вона нестабільна при зберіганні і викликає ускладнення у щеплених тварин через наявність великої кількості живого вірусу і енцефалітогенной мозкової тканини. Небезпечний препарат і в екологічному плані, оскільки міститься в ньому вірус здатний репродукуватися в організмі самих різних тварин, в тому числі і гризунів.
Метою пропонованого винаходу є створення високоімуногенною і безпечної сухої вакцини, що забезпечує ефективну профілактику сказу великої рогатої худоби.
Для досягнення мети в вакцині для профілактики сказу великої рогатої худоби, що містить антиген вірусу сказу, стимулятор імунітету, захисну середу на основі пептона, сахарози і желатину, в якості антигену вірусу сказу використовують висушену вируссодержащую середу культивування штаму "Щелково-51" N СВСК-9 , інактивованої -пропіолактоном, а в якості стимулятора імунітету - сапонін при наступному співвідношенні компонентів, мас.%:
висушена віруссо-
тримає середу куль-
тівірованія штаму
"Щелково-51" N СВСК-9,
инактивированного
-пропіолактоном 7-14
сапонін 0,2-0,9
пептон 35-38
сахароза 35-38
желатин Решта
П р и м і р. Для виготовлення сухої вакцини для специфічної профілактики сказу великої рогатої худоби проводять такі операції: репродукування вірусу сказу штам "Щелково-51" в культурі клітин ВНК-21/13 з використанням для культивування інфікованих клітин середовища Голка 199 в суміші з 7-10% сироватки великої рогатої худоби; слив відпрацьованої віруссодержащей середовища культивування в реактор і його інактивацію -пропіолактоном (кінцева концентрація 0,02-0,03%) при 4-6 ° С протягом 2-4 год; приготування вакцинної суміші з 2 ч. неінфекційної віруссодержащей середовища культивування і першої частини стабілізуючою середовища (що складається з пептона 7,5-15%, сахарози 7,5-15%, желатину 3-6%, вода - інше); приготування з сапоніну, ад'ювантна якого для великої рогатої худоби дорівнює 1,5-3,0 мг / дозу, 4-10% -ного водного розчину і його внесення до вакцини суміш до кінцевої концентрації 0,03-0,06% (0, 3-0,6 мг / мл); розфасовка рідкої вакцинної маси у флакони, її сублімаційні висушування, контроль на бактеріальну стерильність, нешкідливість, імуногенність.
Пропонована вакцина придатна до застосування протягом 18 місяців, при зберіганні її при температурі не вище 8 о С. Препарат зберігає імуногенність протягом 12 місяців при температурі 15-20 о С і до 6 місяців при температурі 30-32 о С. Перед використанням суха вакцина розчиняється в стерильній дистильованій воді і вводиться підшкірно в область середньої третини шиї в кількості 5 мл. Тварин вакцинують дворазово з інтервалом в 30-40 днів.
Імунітет у щеплених тварин розвивається через 12-15 днів. Тривалість імунітету не менше 2 років.
Ревакцинацію проводять через кожні 2 роки шляхом одноразової ін'єкції препарату.
У 1975-1980 р досвідчені серії вакцини (56 серій) були реалізовані і застосовані в неблагополучних щодо сказу господарствах країни.
При ісcледованіі в реакції нейтралізації 220 проб сироватки крові великої рогатої худоби було встановлено, що через 14-20 діб після вакцинації та ревакцинації рівень антитіл в крові тварин дорівнює 18-170 Міжнародним одиницям (МО), а через 2 роки - 0,2-1 , 3 МО, що перевищує величину (0,1 МО), яка визнана Міжнародною практикою, достатньою для захисту тварин від сказу.
Висока імуногенна потенція сухої вакцини для великої рогатої худоби отримала також підтвердження в гострому досвіді проти вірусу сказу штам "Москва" - овечий, який вводили в головний мозок в дозі 8,0 10 4 мишачих ЛД50 через 50 діб після вакцинації тварин (6 голів). Паралельно інфікували 6 голів невакцинованих тварин, які служили в якості контролю.
Всі тварини контрольної групи загинули через 6-9 доби з проявом явних ознак сказу. Серед тварин вакцинованої групи ознак сказу не відзначалося (термін спостереження 3 місяці).
Результати цього жорсткого експерименту вказують на те, що пропонована вакцина здатна захистити велику рогату худобу від сказу навіть при таких покус шаленими тваринами, які супроводжуються швидким проникненням вірусу в центральну нервову систему.
Економічна ефективність від впровадження вакцини в ветеринарну практику буде обумовлена зниженням випадків захворювання тварин і, отже, людини сказом, винятком поствакцинальних ускладнень, які призводять до загибелі або зниження продуктивності тварин. Крім цього, буде збережено близько 50 тис. Овець, використовуваних для отримання мозкових вакцин (після вилучення мозку туші переробляються в м'ясо-кісткове борошно).
ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФІЛАКТИКИ сказу ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ, що містить антиген вірусу сказу, стимулятор імунітету, захисну середу на основі пептона, сахарози і желатину, що відрізняється тим, що, з метою підвищення імуногенності і нешкідливості, в якості антигену вірусу сказу використовують висушену вируссодержащую середу культивування штаму " Щелково-51 "N СВСК-9, інактивованої - пропіолактоном, а в якості стимулятора імунітету - сапонін при наступному співвідношенні компонентів, мас.%:
Висушена віруссодержащего середовищі культивування штаму "Щелково-51" N СВСК-9, інактивованої - пропіолактоном 7 - 14
Сапонін 0,2 - 0,9
Пептон 35 - 38
Сахароза 35 - 38
желатин Решта