Реакція відноситься до серологічним реакціям за участю мічених антигенів або антитіл.
Проводиться прямим і непрямим методами.
При прямому методі виявляють антиген в матеріалі від хворого. Використовується діагностична флюоресцирующая сироватка, яка містить імуноглобуліни, виділені з імунних сироваток і мічені флюорохромами.
Специфічний антиген виявляється у вигляді яскраво-зелених люминесцирующих конгломератів, а фон препарату забарвлюється в оранжево-червоний колір.
Компоненти реакції прямої імунофлюоресценції:
Для пошуку антигену при експрес-діагностики:
1) досліджуваний матеріал;
2) специфічна люмінесцентна сироватка;
3) люмінесцентний мікроскоп.
При діагностиці грипу проводять диференціацію від збудників парагрипу та аденовірусної інфекції. Носоглотковий мазок обробляють флюоресцирующей грипозної сироваткою або грипозних імуноглобуліном.
«+» Результат у вигляді зеленого світіння отримують через 3 години.
При непрямому методі проводять виявлення і титрування специфічних антитіл. Титром сироватки називається її максимальне розведення, при якому відзначається флюоресценція на «+ +».
Компоненти реакції непрямої імунофлюоресценції
Для пошуку антигену при експрес-діагностики:
1) досліджуваний матеріал (антиген);
2) специфічна сироватка;
3) антиглобулінова люмінесцентна сироватка
4) люмінесцентний мікроскоп.
I фаза специфічна
Сироваткові антитіла адсорбуються на антигене.
II фаза неспецифічна
Використовується антиглобулінова сироватка з антитілами, міченими флюорохромами. Утворюється комплекс антиген + антитіло (I) + антиглобулінова сироватка (II), який світиться.
РПГА для визначення напруженості протидифтерійного поствакцинального імунітету
Антитоксичний протидифтерійна імунітет перевіряють за допомогою РПГА з дифтерійним еритроцитарних діагностикумів (анатоксином).
Неімунной вважаються особи з титром антитоксина менше 0,03 МО / мг
1. Випробувана сироватка, адсорбована баранячими еритроцитами;
2. Ерітроцтарний диагностикум;
3. Фізіологічний розчин;
4. протидифтерійна контрольна сироватка активністю 10 МО.
1) Сироватку розводять фізіологічним розчином в 12 лунках від 1:10 до 1: 20480 (1: 40-1: 5120)
2) В кожну лунку додають по 1 краплі диагностикума;
3) протидифтерійна контрольну сироватку розводять також від 1:10 до 1: 20480 та вносять по 1 краплі диагностикума;
4) Залишають на 3 години при кімнатній температурі.
Розрахунок активності: Х = -----------, де
Х - активність досліджуваної сироватки;
10 - титр контрольної сироватки;
А - максимальне розведення досліджуваної сироватки з позитивним результатом;
В - максимальне розведення контрольної сироватки з позитивним результатом.
Протікає in vitro (у пробірці) при еквівалентному співвідношенні антигену і антитіла. Супроводжується помутнінням і випаданням осаду. Феномен флокуляції використовують:
- для визначення флоккулірует активності токсинів;
- для титрування антитоксических сироваток.
Наприклад, при дифтерії використовується реакція флокуляції з дифтерійним анатоксином. У пробірці, де кількість сироватки і анатоксину еквівалентно, випадають ніжні пластівці. Кількість анатоксину, що дає в суміші 1 АЕ сироватки ініціальний флокуляцію, називається 1 иммуногенной одиницею анатоксину (1 ИЕ).