Для запобігання ускладнень при переливанні крові внаслідок реакції аглютинації необхідно попередньо визначати групу крові людини.
Мета роботи: визначити групи крові в системі АВО (за допомогою Цоліклони).
Оснащення: Цоліклони, стерильний скарифікатор, дві скляні палички, стандартні сироватки груп I, II, III; кахельна біла плитка, вата, спирт, йод, ефір. Об'єкт дослідження - людина.
Проведення роботи. Групи крові визначають за властивостями еритроцитів, які встановлюють за допомогою стандартних сироваток, що містять відомі аглютиніни (антитіла).
На кахельну плитку наносять, не змішуючи, по одній краплі стандартних сироваток I, II і III груп, що містять відповідно наступні аглютиніни: I- # 945; і # 946 ;, II- # 946; і III - # 945 ;. Потім, отримавши краплю крові з пальця, першої скляною паличкою переносять невелику кількість її в краплю сироватки I групи, другим чистим кінцем цієї ж палички така ж кількість крові переносять в сироватку II групи. За допомогою другої скляної палички третю краплю досліджуваної крові переносять в сироватку III групи. Кожен раз кров ретельно розмішують в краплі сироватки, поки суміш не стане рівномірно рожевого кольору. Реакція аглютинації настає через 1-5 хв. При наявності аглютинації крапля втрачає гомогенність і стає прозорою, а еритроцити склеюються у вигляді грудочок. Групу крові встановлюють залежно від наявності або відсутності аглютинації.
1. Якщо аглютинації немає у всіх трьох краплях, це свідчить про відсутність агглютиногенов в еритроцитах досліджуваної крові і, отже, вона належить I (0) групи.
2. Якщо аглютинація відбулася з сироватками I і III груп, що містять відповідно аглютиніни # 945; + # 946; і # 945 ;, то еритроцити досліджуваної крові містять агглютиноген А і ця кров належить II (А) групи.
3. Якщо аглютинація відбулася з сироватками I і II груп, що містять аглютиніни # 945; + # 946; і # 946 ;, то еритроцити досліджуваної крові містять агглютиноген В і вона належить III (В) групи.
4. Якщо аглютинація відбулася з сироватками I, II і III груп, що містять відповідно # 945; + # 946 ;, # 946; і # 945; аглютиніни, то еритроцити досліджуваної крові містять як агглютиноген А, так і агглютиноген В. Отже, досліджувана кров належить IV (АВ) групи.
Останнім часом визначення груп крові людини системи АВО проводять за допомогою Цоліклони Анти-А і Анти-В (антитіла моноклональні Анти-А і Анти-В), які застосовують або замість або паралельно з поліклональними імунними сироватками. Моноклональні Анти-А і Анти-В антитіла продукуються двома мишачими Гібридоми і належать до імуноглобулінів класу М. Цоліклони виготовляються з асцитної рідини мишей-носіїв анти-А і анти-В гібридом. Технологія виготовлення реагенту виключає можливість його контамінації патогенними для людини вірусами.
Таблиця 1. Оцінка результатів визначення груп крові із застосуванням Цоліклони
Результати реакції з Цоліклони
Проведення роботи. Нанесіть на пластину індивідуальними піпетками Цоліклони Анти-А і Анти-В по одній великій краплі. Поруч з краплями антитіл нанесіть по одній маленькій краплі досліджуваної крові. Спостерігайте за ходом реакції з Цоліклони візуально при легкому погойдуванні пластини протягом 3 хвилин. Аглютинація еритроцитів з Цоліклони зазвичай настає в перші 3-5 сек, але спостереження слід вести 3 хв через більш пізнього появи аглютинації з еритроцитами, що містять слабкі різновиди антигенів А або В. Позитивний результат виражається в аглютинації еритроцитів. При негативній реакції крапля залишається рівномірно забарвленою в червоний колір.
Знаком плюс (+) позначена наявність аглютинації, знаком мінус (-) - відсутність аглютинації.
Оформлення протоколу. Запишіть, до якої групи крові належить ваша кров. Визначте: реципієнтам з якими групами крові можна переливати вашу кров і кров якої групи можна переливати вам?
Ситуаційні завдання для визначення кінцевого рівня знань студентів:
При тривалому голодуванні у людей з'являються так звані голодні набряки. В чому причина?
Людина з'їв недоброякісну їжу. Через деякий час у нього виявляється підвищення в'язкості в крові. Чим можна пояснити це?
При дослідженні крові виявлено, що 80% гемоглобіну становить фетальний гемоглобін. Кому належить кров?
При підрахунку в великих квадратах камери Горяєва виявилося 580 еритроцитів. Скільки їх міститься в 1 мл крові, якщо кров в меланжер набиралася до позначки 0,5?
У 25 великих квадратах камери Горяєва виявилося 100 лейкоцитів. Скільки їх міститься в 1мм 3 крові, якщо вона набиралася в меланжер до позначки 0,5?
У 1мм 3 крові міститься 6млн. еритроцитів. Скільки всього їх в циркулюючої крові, якщо 20% всієї крові знаходиться в кров'яному депо? Вага тіла прийняти за 80кг.
В результаті переливання несумісної групи крові відбудеться склеювання еритроцитів, що в подальшому призведе до гемолізу. Назвіть вид гемолізу?
Чому жінкам заборонено працювати на виробництві з високим рівнем вібрації, водити великовантажні машини і т.д.?
У чому причина збільшення білірубіну в крові при отруєнні оцтовою кислотою?
Кров батька резус-позитивна, матері резус-негативна, перша вагітність. Чи існує небезпека резус-конфлікту матері і плоду, якщо плід має резус-позитивну кров?
Батько має резус-негативну кров, мати - резус-позитивну. У плода резус-фактора немає. Чи існує небезпека резус-конфлікту між плодом і матір'ю?
Чому при гострому психічному стресі може статися інфаркт міокарда?
Згортання крові являє собою складний багатокомпонентний «каскадний» ферментативний процес. Нормальне протікання кожної попередньої фази забезпечує розвиток і завершення кожної наступної. Що відбувається в першу, другу і третю фази коагуляційного гемостазу? Що включає послефаза гемокоагуляции?
Для нормального протікання згортання крові необхідний ряд факторів: протромбин, тромбопластин, АС - глобулін, іонізований кальцій, проконвертин і ін. Назвіть фактор, участь якого необхідно для протікання всіх фаз гемокоагуляции. Який фактор забезпечує перетворення розчинного фібрин - полімеру в нерозчинний фібрин? Де утворюється протромбін? Які фактори беруть участь в освіту плазмової і тканинної протромбінази?