Васillасеае Рід: Clostridium Види: Cl.perfringens, Cl.septicum, Cl.histolyticum, Cl.novyi (oedematiens) Широко поширені в навколишньому середовищі, є представниками нормальної мікрофлори шлунково-кишкового тракту людини і тварин
Великі Гр + палички, з овальної субтермінально або центрально розташованої спорою. діаметр суперечки перевищує діаметр клітини, тому паличка зі спору має схожість з веретеном. звідси і назва роду (clostrum - веретено). Природним середовищем їхнього життя служить кишечник травоїдних тварин і людини, а також грунт. куди вони надходять з випорожненнями і можуть там тривалий час зберігатися і розмножуватися при сприятливих умовах. Беруть участь в круговороті речовин в природі. Cl.perfringens є санітарно-показовим м / о. Збудники газової гангрени рухливі (крім Cl.perfringens), не мають капсули (крім Cl.perfringens), спороутворення в тваринному організмі не відбувається. Щодо один одного: Cl.perfringens - коротка і товста паличка, Cl.novyi - довга і товста паличка, Cl.septicum - довга і тонка паличка, може бути ниткоподібної форми, Cl.histolyticum - найдрібніша з них паличка.
6 сероварів A-F розрізняються за структурою екзотоксинів. Серовар А - основний. Найбільш патогенними для людини є А, С, D. Серовар А, С, D, крім анаеробної інфекції, також здатні викликати ПТІ або інтоксикації (гастроентериту). Клострідіальном ентероколіт (серовар А і F) - ВЛІ недоношених новонароджених.
Патогенність збудників пов'язана з дією екзотоксинів намембрани різних тканин. екзотоксини # 9688; a-токсин (лецитиназа С) (основний продуцент тип А) Надає дермонекротіческое, гемолітична, летальну дію. # 9688; b-токсин (основний продуцент тип С) - викликає некроз тканин. # 9688; Q-токсин (основний продуцент також тип С) Надає дермонекротіческое, гемолітична, летальну дію. # 9688; k-токсин (коллагеназа і желатинази) (основні продуценти - типи С і А) - руйнує колагенові волокна сполучної тканини і м'язи, володіє некротическим і летальною дією. # 9688; m-токсин (гіалуронідаза) - підвищує проникність тканин # 9688; n-токсин (ДНК-аза) - розщеплює НК і порушує синтез білка # 9688; Ентеротоксин (основні продуценти - типи С і А при споруляции в товстій кишці, викликає ПТІ) - викликає некротичний ентерит з кишковим розладом, блювота, діарея.
Суворі анаероби. Мезофіли. • C.perfringens і C.histolyticum - аеротолерантнимі анаероби • C.novyi і C.septicum - строгі анаероби Cl.perfringens: МПБ - дифузне помутніння і інтенсивне газоутворення. швидке створаживание молока з утворенням пухкого згустка; На кров'яному агарі - круглі колонії із зоною гемолізу. на Вільсона-Блера агарі - чорного кольору колонії і розрив середовища за рахунок газоутворення. Cl. novyi МПБ - легке помутніння, помірне газоутворення; молоко згортає повільно; КА - сірі шорсткі колонії із зоною гемолізу. Cl.septicum МПБ - помутніння, помірне газоутворення; молоко згортає повільно; КА - колонії з тонкими відростками із зоною гемолізу; Cl.histolyticum МПБ - диф. помутніння, без газу; КА - колонії дрібні, гладкі, прозорі з вузькою зоною гемолізу
Превалюють сахаролитические св-ва - Cl.perfringens, Cl.novyi, Cl.septicum. Протеолітичні св-ва у Cl.histolyticum. Найбільшою біохімічної активністю і вираженим газоутворенням володіє C.perfringens (розкладає до кислоти і газу багато вуглеводи, крім маніту). • Ферментативна активність різна і використовується для диференціації видів
Матеріал для дослідження: ранові відокремлюване (ексудат), некротизованих тканина, кров. Ведучий збудник - CL.perfringens. 1. Мікроскопічний метод: Матеріал щільний подрібнюють, центрифугують і з осаду готують препарати з забарвленням по Граму і по Буррі-Гінсу ►Гр + палички при відсутності лейкоцитів 2. Бактеріологічний метод: 1-й етап: оброблений матеріал засівають на поживні середовища (Кітта- Тароцці, знежирене молоко (середа Тукаева), Вільсона-Блера, агар Цейсслера). Рідкі середовища регенерують (кип'ятять) і заливають вазеліновим маслом. Чашки вирощують в анаеростатах. 2-й етап - вивчення зростання на середовищах: найбільш характерні зміни середовищ при зростанні Cl.perfringens. Помутніння і утворення бульбашок газу на середовищі Кітт-Тароцці настає через 6 годин, молоко згортається через 2-3 години. До цього ж часу настає почорніння з розривами середовища Вільсона-Блера (через 3 години). Інші збудники зазначені середовища змінюють пізніше і менш типово. На середовищі Цейсслера Cl.perfringens утворюють сірі великі дисковидні колонії із зоною гемолізу. На середовищі Вільсона-Блера - колонії чорного кольору. З окремих колоній роблять мазки за Грамом і їх відсівати на середу Кітт-Тароцці (для накопичення чистої культури). 3-й етап - вивчення виділеної культури: - мазок за Грамом; - визначення ферментативних властивостей; # 9619; Реакція нейтралізації (РН) на білих мишах для визначення типу токсину; В РН використовують діагностичні протигангренозну сироватки (полівалентні і моновалентні) .Вид клостридий встановлюють по антитоксин, який забезпечив виживаність мишей при обов'язковій загибелі всіх інших досвідчених тварин, які отримали іншу сироватку, і контрольних мишей, яким вводили матеріал без сироватки (див. Протокол) 3. біологічний метод: заражають підшкірно білих мишей суспензією матеріалу. Тварини гинуть при картині експериментальної газової гангрени (місцевий набряк з газоутворенням, розплавлення підшкірно-жирової клітковини). 4. Експрес-діагностика (РІФ). Газорідинна хроматографія дозволяє швидко виявити анаероби по спектру виділених жирних кислот. Також ставлять РНГА з полівалентним еритроцитарних антитоксическим діагностикумів для виявлення екзотоксину в крові обстежуваних.
Газова гангрена - полімікробна анаеробна ранова інфекція, що характеризується вираженою інтоксикацією. швидким омертвлянням тканин (некрозом) з газоутворенням (при відсутності запальних явищ) і розвитком набряку в них. У розвитку інтоксикації беруть також участь всмоктується продукти розпаду сполучної і м'язової тканин. Перебіг хвороби посилює супутня, в тому числі гноеродная, мікрофлора (стафілококи, протеї, кишкова паличка, бактероїди та ін.). Газова гангрена дає різні клінічні прояви в залежності від місця локалізації. - Анаеробна інфекція м'яких тканин кінцівок та тулуба; - Анаеробна інфекція мозку, черевної порожнини, грудної клітки; - Анаеробний остеомієліт; - Післяпологова або післяабортні анаеробна інфекція. Патогенез: газоутворення - результат ферментативної активності клостридій, а некроз - результат дії токсинів і ферментів, інтоксикація - результат отруєння токсинами і продуктами тканинного розкладання. ІП - кілька годин до 5 днів. Клінічні форми газової гангрени: 1. емфізематозних (рясне газоутворення в рані). 2. Змішана форма (набряк, газоутворення). 3. Токсична (швидкий розвиток набряку з різким зблідненням шкіри). 4. Флегмонозна (набряк + вторинна інфекція).
ІІ - грунт і забруднене спорами матеріал (сапронозов) МП - контактний черезшкірний (забруднення ран грунтом або різними споросодержащімі матеріалами). Анаеробна інфекція (в тому числі і газова гангрена) виникає при наявності таких умов: Наявність глибокої рваної рани з кишенями, затекло. Інфікування рани грунтом і іншими матеріалами, що містять клостридий (шовний матеріал, шматочки одягу) Наявність в рані мікробних асоціацій з гнійними кокками або гнильними мікроорганізмами - нетоксігенние сапрофітні клостридії (змішані інфекції). Факультативні анаероби використовують тканинної кисень, створюючи анаеробіоз в тканинах. Зниження імунного статусу організму. Здавлення тканин, велика ступінь опіку, відмороження. Найголовніша умова - порушення кровопостачання тканин (в результаті знижується ОВП).
Анатоксини - перфрингенс і едематіенс Лікувально-профілактичні антитоксичні сироватки • антіперфрінгенс • антіедематіенс • антісептікум Секстанатоксін - містить 6 анатоксинів (перфрингенс, нови, тетанія, ботулінум А, В, Е). протигангренозну анатоксин
Клостридії - ЗБУДНИКИ правця
Cl.tetani - нормальний мешканець кишечника тварин і людини. Хворі не заразні. Вегетативні форми Cl.tetani не володіють особливою стійкістю і при кип'ятінні руйнуються протягом 5 хв. Спори відрізняються виключно високою стійкістю до різних фізичних і хімічних впливів. Для їх руйнування потрібно кип'ятіння протягом 1-3 год. Автоклавирование при 120 ° С вони переносять до 40 хв. Нечутливі до низьких температур, до розсіяного сонячного світла; досить стійкі до дезінфектантів.
Клостридії правця мають форму паличок, утворюють термінально розташовані круглі суперечки. надають збудника вид барабанної палички. капсули не утворює, перитрихи, Гр +.
Екзотоксин - складається з 2-ух фракцій: тетаноспазмін і тетанолізін (тетаногемолізін). 1) тетаноспазмін (нейротоксин) - впливає на процес передачі нервових імпульсів в головному і спинному мозку. Тетаноспазмін діє дистанційно (тобто бактерії рідко покидають межі рани). Токсин фіксується на поверхні відростків нервових клітин, проникає в них шляхом ендоцитозу і за допомогою аксонного транспорту потрапляє в ЦНС, накопичуючись тут в основному в рухових зонах спинного і головного мозку (за винятком переднього мозку і мозочка). Механізм його дії пов'язаний з придушенням вивільнення гальмівних медіаторів в синапсах. Виникаючі імпульси безперервно надходять до м'язів, викликаючи їх скорочення (мимовільне скорочення поперечно-смугастих м'язів через поразки синапсів). 2) тетанолізін (мембранотропні токсин) - викликає гемоліз еритроцитів, пригнічує фагоцитоз, що сприяє поширенню збудника в організмі і продукції їм токсинів. Володіє кардиотоксическим і летальною дією.
Хемоорганотрофи, строгий анаероб. оптимальна t ° C зростання 37 ° С. Росте на всіх ПС, які використовують для культивування анаеробів: середа Китта-Тароцці, молоко по Тукаева, тиогликолевая (зростання з рівномірним помутнінням), кров'яний цукровий агар Цейсслера (округлі, плоскі, з нерівними краями, напівпрозорі сіруваті колонії з шорсткою поверхнею, нерідко в вигляді переплетених ниток (нагадують павучків), з зоною гемолізу навколо); Середа Вільсона-Блера.
Практично відсутні сахаролитические св-ва і слабо виражені протеолітичні св-ва (біохімічно інертні). Культура видає неприємний запах вигрібної ями.
Діагностика в основному клінічна. До мікробіологічної діагностики вдаються з метою: - підтвердження клінічного діагнозу, - дослідження на стерильність (на наявність спор збудника) перев'язувального, шовного (кетгут) матеріалу, препаратів для парентерального введення, - при санітарно-біологічному дослідженні грунту. Досліджуваний матеріал: шматочки тканин рани, перев'язувальний матеріал, виділення пуповини у новонароджених; виділення з вагіни, матки при кримінальних абортах; шовний матеріал. Бактеріоскопічний метод Бактеріологічний метод. Посів на Китта-Тароцці (спостерігається помутніння); пересівши на агар Цейсслера, де утворюються зони гемолізу навколо отросчатую колоній. Спеціально для виділення Cl.tetani П.Філдс запропонований метод посіву досліджуваного матеріалу в конденсаційну воду кров'яного агару - через добу спостерігається повзуче зростання у вигляді плівки (через наявність джгутиків). 3. біопроб на білих мишах, морських свинках: Одній групі мишей фільтрат матеріалу або культури вводять в корінь хвоста, і при наявності екзотоксину через 1-2 дня у них розвивається висхідний правець (хвіст миші стає ригідні, задні кінцівки витягуються, тулуб викривляється і тварини гинуть від паралічу дихального центру). Іншій групі мишей вводиться фільтрат, оброблений протиправцевої антитоксичної сироваткою; тварини при цьому виживають. 4. З метою швидкого виявлення екзотоксину в крові хворого ставлять РНГА з еритроцитарних антитільним діагностикумів.
Правець (tetanus) - ранова інфекція, що викликається Cl.tetani, що характеризується ураженням нервової системи, нападами тонічних і клонічних судом. Розрізняють такі форми захворювання: - посттравматичний - постабортний - післяпологовий - післяопераційний правець - правець новонароджених ІП становить 6-14-21 днів. Захворювання характеризується як спадний правець. Починається у вигляді тягнуть болю в області рани. Потім з'являється 3 класичних симптому: 1) спазм жувальної мускулатури (тризм) - не може відкрити рот; 2) спазм мімічної мускулатури (сардонічна посмішка); 3) виражене напруження потиличних м'язів і м'язів спини (хворий приймає характерне положення - опістотонус, тобто голова закинута назад, піднята поперековий область, хворий спирається на потилицю і п'яти (тому що тонічне скорочення розгинальній мускулатури спини виражено сильніше, ніж згинальних м'язів живота). Хворий знаходиться в ясній свідомості. Смерть настає від паралічу дихального центру або від асфіксії внаслідок ураження м'язів гортані, міжреберних м'язів і діафрагми. При правці новонароджених першим симптомом є від аз дитини від грудей (дисфагія - порушення ковтання за рахунок спазму мускулатури глотки), скорочення щелепних м'язів, з'являється типова «поза жабеня» - дитина лежить на спині із зігнутими і притиснутими до тулуба ніжками. Смерть настає від асфіксії. Летальність при правці висока - щорічно в світі гинуть від нього понад 100 000 чоловік. Особливо небезпечний післяопераційний, післяпологовий і післяабортний правець, так як при цих формах нерідко спостерігається блискавичний перебіг захворювання, при якому смерть настає від паралічу дихательног про центру або серцевої недостатності раніше, ніж встигають розвинутися характерні симптоми хвороби. Летальність при цих формах правця сягає 90%.
• Правець повсюдно викликає спорадичну захворюваність. Збудник правця виявляється в кишечнику тварин і людини, звідки з випорожненнями потрапляє в грунт, де у вигляді спор може зберігатися роками, десятиліттями. ІІ - людина і тварини. Механізм зараження - черезшкірний. контактний. ВВ - пошкоджена шкіра і слизові оболонки; у новонароджених вхідні ворота інфекції - пуповина. Сприяють розвитку захворювання так ие фактори, як: - контамінація ран грунтом, що містить спори клостридій, - пошкодження, ішемія, некроз тканини, - рвані і колоті рани (з кишенями, затекло) - чужорідні тіла в рані. Інфекція виникає при наявності рани травми. уколи, порізи, опіки, операційні рани, кримінальні аборти (травмовані родові шляхи). Іноді дуже мала рана залишається непоміченою (криптогенний правець).
Планова активна імунопрофілактика ведётсявакціной АКДС (адсорбована коклюшно-дифтерійно-правцевим вакцина) - триразова вакцинація, починаючи з 3-х-місячного віку з інтервалом в 45 днів; далі ревакцинація АКДС (1-я), АДС-анатоксином (наступні) через кожні 5-10 років. Екстрена профілактика правця проводиться при травмах і, в залежності від попередніх щеплень анатоксином, здійснюється у вигляді або: - пасивної імунізації (вводять одноразово гетерологічние антитоксичну сив-ку по Безредки - дуже анафілактогенна!); - активно-пасивної імунізації (вводять правцевий анатоксин і сив-ку або гомологічний протиправцевий людський імуноглобулін); - екстрена ревакцинація стобнячним анатоксином. Попередньо визначають титри правцевих антитоксинів в РПГА. ►Еслі людина прищепленої, то йому вводять тільки анатоксин (підтримуюча доза); ►Еслі нещеплених, то повна доза анатоксину в поєднанні з ППЛІ (при відсутності його використовують протиправцеву гетерологичеським сироватку - введення останньої передує внутрикожной пробою) Для специфічного лікування правця застосовують протівостобнячную антитоксичну сив-ку; протиправцевий людський імуноглобулін (для серотерапії). Антибіотикотерапія (пеніциліни, цефалоспорини). • Дані про постінфекційної імунітет суперечливі (не формується?). Поствакцинальний антитоксичний імунітет тривалий (до 10 років) і напружений.
Клостридії - ЗБУДНИКИ ботулізму