Будова бактеріальної клітини. Складні методи забарвлення для виявлення різних структур бактеріальної клітини
Мікроорганізми - це невидимі неозброєним оком представники трьох царств: Еукаріоти, Прокаріоти, Віруси.
Прокарнотіческая клітина має середні розміри 1-10 мкм, генетичний матеріал представлений кільцевою молекулою ДНК, розташованої вільно в цитоплазмі, немає ядерної мембрани, відмежовує генетичний матеріал від цитоплазми, гістони відсутні. Синтез білка відбувається на рибосомах 70 S, вільно розташованих в цитоплазмі. Тип розподілу - бінарний. Клітинна стінка утворена пептідогліканов. Анаеробне дихання можливо.
Еукаріотична клітина має середні розміри 10-100 мкм. Генетичний матеріал відмежований від цитоплазми ядерною мембранйй, має форму хромосоми, гістони є, синтез білка здійснюється на рибосомах 80 S. Рибосоми знаходяться в складі ендоплазматичноїмережі. Тип розподілу - мито-тичний. Клітинна стінка (якщо є) містить хітин або целюлозу. Є стероли. Анаеробне дихання відсутнє.
До прокаріотів відносяться бактерії (в т. Ч. Актиноміцети, ціанобактерії, спірохети, рикетсії, хламідії, мікоплазми) і архебактерии.
До еукаріотичних мікроорганізмів відносяться гриби, найпростіші, одноклітинні водорості.
Віруси - не мають клітинної будови.
Бактерії мають такі обов'язкові структури: клітинну стінку (за винятком мікоплазм), цитоплазматическую мембрану, цитоплазму, нуклеоїд, рибосоми.
Необов'язкові (непостійні структури бактеріальної клітини): капсула, джгутики, суперечки, включення в цитоплазмі.
Складні методи забарвлення використовуються для виявлення окремих структур клітини і вимагають застосування двох і більше барвників і впливу деяких додаткових речовин і фізичних факторів.
До складних методів забарвлення відносяться:
за Цілем-Нільсеном та ін.
Забарвлення еукаріотів здійснюється методом Романовського-Гімза. Цей метод широко застосовується для вивчення різних деталей еукаріотичної клітини (а першу чергу-ядра); для підрахунку формених елементів крові (еритроцитів, лейкоцитів, тромбоцитів); для виявлення найпростіших, грибів, внутрішньоклітинних паразитів (рикетсій, хламідій), а також для виявлення спірохет в кроенная.
Метод Грама є універсальним методом забарвлення і рекомендується для фарбування прокаріотів клітин. Всі бактерії по відношенні до цього методу діляться на дві групи: грампозитивні (стафілококи, стрептококи, сарціни, коринебактерії, клостридії, бацили та інші, забарвлюються в фіолетовий колір) і грам негативні (ешерихії, псевдомонади, нейсерії, сальмонели, клебсієли, протеї та інші , забарвлюються в рожевий колір).
У грам позитивних бактерій основною речовиною клеточ ної стінки (до 90%) є муреин (пептидогликан), в поєднанні з тейхоевой кислотою і рубонуклеатом магнію. Він розташовується в три шари.
У грамнегативних бактерій пептидогликан одношаровий, його менше в клітинній стінці (близько 10%), а основний компонент представлений ліпополісахаридами. Тейхоевих кислот немає.
Проникність клітинної стінки у грам позитивних бактерій менше, ніж у грамнегативних. Тому що утворився комплекс: генііан в польоту, йоду і пептидогликана у грампозитивних бактерій утримується в клітинній стінці при обробці етиловим спиртом, тоді як грамнегативнібактерії втрачають цей комплекс, знебарвлюються спиртом і потім дофарбовував водним фуксином в рожевий колір.
Бактерії, що втратили клітинну стінку частково або повністю, називаються протопластами, сферопласти, L-формами. Метод Грама не може бути застосований для їх ідентифікації.
У цитоплазмі бактерій можуть перебувати різні за своєю природою включення, такі як ліпопротеїдні тільця, глікоген, гранулеза, пігментні скупчення, сірка, кальцій. У деяких бактерій в цитоплазмі зустрічаються зерна волютина. Включення волютина добре виражені у Spirillum volutans, по найменуванню яких волютин отримав назву, у Bacillus subtilis, а також у збудників сибірської виразки і дифтерії. Гранули волютина мають відносно великі розміри, фарбуються різними барвниками, змінюючи колір останніх. Наприклад, при фарбуванні метил-вим синім волютин забарвлюється в яскраво-червоний колір (наприклад, при фарбуванні за методом Леффлера). Таке явище отримало назву метахромазії. Гранули волютина представлені поліфосфатами - запасним речовиною, яке служить джерелом фосфатних груп. Наявність гранул волютина враховують при лабораторній діагностиці дифтерії, так як для цього збудника характерно біполярний розташування зерен. Метод Нейесера, який використовується для виявлення зерен волютина, заснований на виборчій фіксації зернами волютина уксусно-метиленової синьки Нейесера. При подальшому фарбуванні везувіном зерна волютина, міцно фіксували метиленовую синьку, залишаються темно-синього (майже чорного) кольору, а цитоплазма набуває жовтого кольору.
Підписуйтесь на наш Telegram. щоб бути в курсі важливих новин медицини