Діагностика сибірської виразки. Бактеріологічне дослідження сибірки
Сибірська виразка. збудником якої є сібіроязвенная паличка (Вас. anthracis), вражає переважно велику і дрібну рогату худобу, коней.
Сібіреязвенная паличка, найважливіша з усіх патогенних бактерій, має від 5 до 10 р в довжину і 1-2 | а в товщину. Вона розташовується поодиноко і ланцюжками. Кінці паличок живих бактерій закруглені, на забарвлених препаратах вони як би обрубані або увігнуті, що є, мабуть, результатом впливу фарби. Ці палички - аероби - нерухомі, утворюють спори, капсули. Спори овальної форми розташовуються в центрі клітини, розвиваються лише поза організмом, на штучних середовищах. Капсули утворюються в організмі і зникають в культурах на штучних середовищах. Вважають, що капсульні форми вірулентніші, а палички, що втратили капсули, стають менш вірулентними. Часто одна капсула охоплює як би футляром відразу кілька особин.
бактеріоскопічне дослідження
Для дослідження на збудника сибірської виразки беруть гній з міхура, а у випадках ураження легень - мокроту.
Отриманий матеріал розмазують на кількох чистих знежирених предметних стеклах. Висушені на повітрі препарати фіксують триразовим проведенням на полум'я спиртового пальника і забарвлюють по Граму або метиленової синькою. В позитивних випадках у препараті мікроскопічно чітко виділяються великі грампозитивні палички з увігнутими кінцями, що лежать поодиноко, парами або ланцюжками.
Характерна увігнутість решт паличок, як і наявність капсул, особливо рельєфно виділяється в мазках, пофарбованих метиленової синькою. Наявність капсул якнайкраще виявити при фарбуванні препарату по Ольто. Для цього фіксований на полум'я мазок забарвлюють при підігріванні протягом 1-2 хвилин свіжоприготовленим профільтрованим 2% сафранін, розчиненим у гарячій воді. Після цього препарат промивають водою і висушують на повітрі. На висушений мазок наносять одну краплю дистильованої води. Покривають чистим покривним склом, поверх якого наносять трохи иммерсионного масла.
В поле зору мікроскопа видно тіло мікроба, забарвлене в коричнево-червоний колір, що оточує його капсула блідо-жовтого кольору.
Проходження променів через шар води підсилює різницю заломлення променів світла тілом бактерій і капсулою.
бактеріологічне дослідження
Палички сибірки невибагливі і для отримання культури можна користуватися звичайними середовищами.
Роблять посів в пробірках і чашках з простим агаром, желатином і в пробірки з бульйоном Добре спостерігається спорообразование на пшеничному агарі Колонії на агарі в бактеріологічній чашці сірувато-білого кольору виростають через 20-24 години Під мікроскопом вони мають вигляд переплетених ниток, більш щільних в центрі , і локонообразних завитків, спрямованих до периферії Під впливом протеолітичного ферменту сібіреязвенной палички згорнута кров'яна сироватка повільно розріджується Паличка створаживаться молоко на 3-4-й день росту, розкладає цукор (Глюкозу, мальтозу, лактозу) без газу з утворенням кислоти.
При посіві на косому агарі утворюється сірувато-білий наліт. Сібіреязвенние палички при посіві на бульйон дають зростання на дні пробірки у вигляді грудки вати при абсолютно прозорому середовищі. При посіві матеріалу уколом в пробірку з желатином через кілька днів утворюється вздовж уколу білувата смуга, від якої відходять білі відростки, коротшає донизу і мають вигляд перекинутої вниз ялинки Через деякий час відбувається поступове розчинення желатину від поверхні середовища вглиб
Сібіреязвенная паличка зростає при температурі в межах 15-43 °. Оптимальна температура 30-40 ° С. Зі зниженням температури утворення спор паличок сповільнюється. Найкраща реакція середовища рН-7,0-9,4.