Чистої культурою називається популяція бактерій од-ного виду або одного різновиду, вирощена на живильному середовищі. Багато видів бактерій підрозділяють за однією ознакою на біологічні варіанти - біовари. Біовари, що розрізняють-ся за біохімічними властивостями, називають хемоварамі, по анти-генним властивостями - сероварами, по чутливості до фагу - фаговаров. Культури мікроорганізмів одного і того ж виду, або биовара, виділені з різних джерел або в різний час з одного і того ж джерела, називають штамами, які зазвичай позначаються номерами або будь-якими сім-волами. Чисті культури бактерій в діагностичних бактерії-логічних лабораторіях отримують з ізольованих колоній, пересіваючи їх петлею в пробірки з твердими або, рідше, рідкими живильними середовищами.
Колонія являє собою видиме ізольоване скопа-ня особин одного виду мікроорганізмів, що утворюється в результаті розмноження однієї бактеріальної клітини на щільному живильному середовищі (на поверхні або в глибині її). Колонії бактерій різних видів відрізняються один від одного за своєю мор-фологіі, кольором та іншими ознаками.
Чисту культуру бактерій отримують для проведення диагно-стических досліджень - ідентифікації, яка досягається шляхом визначення морфологічних, культуральних, біохімічних та інших ознак мікроорганізму.
Морфологічні та тинкторіальних ознаки бактерій вивчають при мікроскопічному дослідженні мазків, забарвлених різними методами, і нативних препаратів.
Культуральні властивості характеризуються живильник-ними потребами, умовами і типом росту бактерій на пліт-них і рідких поживних середовищах. Вони встановлюються по мор-фологіі колоній і особливостям зростання культури.
Біохімічні ознаки бактерій визначаються на-бором конститутивних і індуцибельних ферментів, властивих певного роду, виду, варіанту. В бактеріологічній прак-тику таксономическое значення мають найчастіше сахаролитические і протеолітичні ферменти бактерій, які визначаються-ють на диференційно-діагностичних середовищах.
При ідентифікації бактерій до роду та виду звертають ува-гу на пігменти, що забарвлюють колонії і культуральне середовище в різноманітні кольори. Наприклад, червоний пігмент обра-товують Serratiamarcescens, золотистий пігмент - Staphylococcusaureus (золотистий стафілокок), синьо-зелений пігмент - Pseudomonasaeruginosa.
Для встановлення биовара (хемовара, серовар, фаготип) проводять додаткові дослідження по виявленню відповідного маркера - визначення ферменту, антигену, чутливості до Фанам.
Методи виділення чистих культур бакте-рій.
Універсальним інструментом для виробництва посівів є-ється бактеріальна петля. Крім неї, для посіву уколом при-міняють спеціальну бактеріальну голку, а для посівів на чашках Петрі - металеві або скляні шпателі. Для посівів рідких матеріалів поряд з петлею використовують пасті-ровськ і градуйовані піпетки. Перші попередньо через готовляют з стерильних легкоплавких скляних трубочок, які витягають на полум'я у вигляді капілярів. Кінець ка-пілляра відразу ж запаюють для збереження стерильності. У пастерівських і градуювальних піпеток широкий кінець за-кривают ватою, після чого їх поміщають в спеціальні пенали або обгортають папером і стерилізують.
При пересеве бактеріальної культури беруть пробірку в ліву руку, а правою, обхопивши ватяну пробку IV і V пальцями, виймають її, проносячи над полум'ям пальника. Утримуючи дру-шими пальцями тієї ж руки петлю, набирають нею посівної ма-теріал, після чого закривають пробірку пробкою. Потім в пробірку зі скошеним агаром вносять петлю з посівним матеріалом, опускаючи її до конденсату в нижній ча-сти середовища, і зигзагоподібним рухом розподіляють мате ріал по скошеної поверхні агару. Вийнявши петлю, обпалюють край пробірки і закривають її корком. Петлю стерилізують в полум'ї пальника і ставлять в штатив. Пробірки з посівами підписують, вказуючи дату посіву і характер посівного мате-ріалу (номер дослідження або назва культури).
Посіви «газоном» виробляють шпателем на поживний агар в чашці Петрі. Для цього, відкривши лівою рукою кришку, пет-лей або піпеткою наносять посівний матеріал на поверхню поживного агару. Потім проводять шпатель через полум'я горіло-ки, остуджують його про внутрішню сторону кришки і розтирають матеріал по всій поверхні середовища. Після інкубації посіву з'являється рівномірний суцільний ріст бактерій.