серологічна діагностика

Для ретроспективної діагностики хламидиозов тварин використовують РСК, РДСК, ІФА. Абортованих тварин досліджують на наростання титру антитіл (позитивний результат - збільшення титру антитіл в 4 рази і більше). Тварин, вакцинованих проти хламидийного аборту, не досліджують протягом 12 місяців.

РСК ставлять в обсязі 1 мл (по 0,2 мл кожного компонента) або в мікро-варіанті за загальноприйнятою схемою. Комплемент, розведений 1:20, титрують з дози 0,02 до 0,2 мл з інтервалом 0,02 мл. Гемолізин використовують в подвоїти-енном титрі, еритроцити у вигляді 2,5% -ної, а для РДСК - 3% -ної суспензії. Группоспецифических хламідійний антиген беруть в робочому тит-ре, зазначеному на коробці. Сироватки крові досліджують в розведеннях 1: 5 і 1:10. Попередньо випробовувані і контрольні сироватки розводять 1: 5, інактивують при 56-60 ° С, в залежності від виду тварини, протягом 30 хвилин. Першу фазу РСК проводять на водяній бані при 37-38 ° С в тече-ня 30 хвилин, другу фазу - 20 хвилин.

Контролі головного досвіду РСК: позитивна сироватка в розведенні 1: 5 без антигену і з контрольним антигеном; в розведеннях від 1: 5 до граничних-ного титру - зі специфічним антигеном; негативна сироватка в хіба-дениях 1: 5 і 1:10 зі специфічним антигеном в розведенні 1: 5 з конт-рольним антигеном і без антигену; контроль антигенів на антікомплемен-тарность: специфічний і контрольний антиген в подвійній дозі + комплек-мент + гемсістема; контроль антигенів на гемотоксічность: специфічні-кий і контрольний антиген в подвійній дозі + гемсістема, комплемент не додають.

При постановці РДСК першу фазу проводять при 2-6 ° С протягом 16-18 годин, другу фазу - 20 хвилин при 37-38 ° С.

Комплемент використовують в робочому розведенні 1:25 або 1:30.

Варьирующим компонентом є гемолітична система, її тит-ють на позитивною, негативною і однією з досліджуваних сироваток. Для цього при проведенні другої фази РДСК гемсістему беруть в дозах від 0,1 мл до 1 мл, з інтервалом 0,1 мл. Сироватки для титрування гемсістеми раз-водять і додають інші компоненти одночасно з досліджуваними сироватками.

При оцінці результатів РСК і РДСК за позитивний результат при-ють затримку гемолізу на 2-4 хреста в розведенні сироватки 1:10; сумнівний - затримка на 1 хрест в сироватці, розведеною 1:10, і на 1-4 хреста в сироватці, розведеною 1: 5.

Для діагностики хламідіозу свиней через присутність неповних (бло-кірующіх) антитіл замість класичної РСК і РДСК рекомендується при-міняти реакцію непрямої зв'язування комплементу (РНСК, РПСК). У ре-акцію вводять додатковий компонент (позитивна сироватка, содер-жащая повні антитіла) і тому загальний обсяг компонентів реакції з-ставлять НЕ 1 мл, а 1,2 мл.

Схожі статті