Сісібол - визначення трипсину

визначення трипсину

Досліджується переварюючу дію цього ферменту на білки.

Проба з рентгенівською пленкой.Методіка виконання. У 10 - 12 пробірок розливають по 2 мл 5% розчину двовуглекислого натрію.

В одну з цих пробірок наливають 2 мл підлягає дослідженню панкреатичного соку і ретельно змішують.

З першої пробірки піпеткою переносять близько 2 мл в другу, з другої - в третю і т. Д. Таким чином отримують серію розведень 1: 2, 1: 4, 1: 8, 1. 16, 1. 32 і т. Д. потім з кожної пробірки беруть по 1 краплі і наносять на непроявлену рентгенівську плівку (шар плівки складається в основному з желатину, т. е. з речовини, що містить білок). Щоб уникнути злиття крапель їх треба наносити так, щоб між окремими краплями залишалася достатня відстань.

Плівку ставлять на 1 годину в термостат при 37 ° і потім промивають холодною водою.

Оцінка. У нормі принаймні на місці перших крапель білковий шар перетравлюється, т. Е. Ці місця стають світлими і прозорими, чого не настає, якщо панкреатичний сік містить недостатню кількість трипсину.

Кількісній оцінці ця проба не піддається внаслідок надзвичайної мінливості складу дуоденального соку і великих відмінностей желатинового шару на рентгенівських плівках.

Примітка. Казеїнова проба також заснована на перетравлюються дії трипсину на білок.

Мал. 52. Визначення трипсину за допомогою проби з рентгенівською плівкою. А - до ефірного рефлексу; В - після ефірного рефлексу; В - повна відсутність ферментів в панкреатическом соку.

До 10 мл 1% розчину казеїну в 1% розчині соди додають 1 мл дуоденального соку і залишають на 10 хвилин при 37 ° в термостаті. При наявності трипсину білковий розчин перетравлюється, т. Е. Проба з оцтовою кислотою стає негативною.

Гросс -Фулд розробив варіант цієї проби для кількісного визначення.

Схожі статті