A61B10 - Інші способи і інструменти для діагностики, наприклад інструменти для взяття проби клітин, для біопсії, для діагностики шляхом вакцинації (вакцинація для профілактики або терапії A61B 17/20); визначення статі дитини в ембріональному періоді; визначення періоду овуляції (таблиці менструального циклу G06C 3/00); прилади для огляду гортані
Власники патенту RU 2274473:
Всеросійський науково-дослідний інститут пантового оленеводства (ВНІЇПО) (RU)
Винахід відноситься до біотехнології. Після постановки внутрішньошкірної проби туберкуліну, тваринам, що реагує на неї, ін'єктують внутрішньовенну пробу туберкуліну. Тварин, що реагують підвищенням температури тіла вище фізіологічної норми на 0,5 # x000B0; С в період від 8 до 12 годин після введення внутрішньовенної проби, вважають хворими. Спосіб дозволяє з високою точністю діагностувати туберкульоз великої рогатої худоби шляхом виключення впливу на кінцевий результат парааллергіческіх реакцій на туберкулін і виключити необґрунтовану вибракування здорових тварин. 2 з.п. ф-ли, 1 мул.
Винахід відноситься до ветеринарії, зокрема до способів діагностики туберкульозу з урахуванням диференціації парааллергіческіх і специфічних туберкулінових реакцій.
Відомий спосіб діагностики туберкульозу великої рогатої худоби за допомогою внутрішньовенної ін'єкції туберкуліну в дозі 4-5 мл (50% розчин очищеного туберкуліну) з оцінкою термічної реакції через кожні 2 години. Позитивно реагують тварин (підвищення температури тіла на 1,2-1,6 # x000B0; С у порівнянні до вихідної) вважають хворими (Див. А.І.Кузін "Оздоровлення тваринницьких господарств від туберкульозу", М. Россельхозіздат, 1987, с. 74-75). Однак даний спосіб по точності поступається діагностиці по внутрішньошкірній пробі. Так при застосуванні способу з 55 досліджених корів визнано позитивно реагують - 9, в той час як послеубойной оглядом встановлено патологоанатомічним виражений туберкульозний процес у 33 корів, а серед 9-ти позитивно реагують туберкульозні зміни встановлені у 7 тварин.
Відомий спосіб діагностики туберкульозу внутрикожной туберкулінової проби в дозі 0,2 мл. Тварини вважаються реагують на туберкулін при наявності на місці ін'єкції запальної припухлості зі збільшенням шкірної складки на 3 мм і більше. Однак даний спосіб вимагає дуже високої кваліфікації фахівців, як при проведенні ін'єкцій, так і при оцінці результатів дослідження. Так, при введенні алергену під шкіру (а не всередину шкіри) або введення всередину шкіри бульбашок повітря специфічної реакції у хворих тварин може не виникнути, а при декількох уколах в одне місце може з'явитися припухлість у здорових тварин. Величина і консистентность припухлості залежить також від того, чи введений алерген в поверхневий шар шкіри або в глибокий її шар. Оцінка результатів дослідження, що здійснюється через 72 години після ін'єкції, - процес ще більш складний: визначення характеру припухлості, температури і хворобливості, вимір шкірної складки на місці ін'єкції, її консистенції і т.д. (Див. "Оздоровлення тваринницьких господарств від туберкульозу", А.І. Кузін, Россельхозіздат, М. 1987, С.60-65 прототип). Крім цього дослідженнями заявника в області протікання внутрішньошкірних алергічних реакцій у тварин, викликаних атиповими мікобактеріями, мікобактеріями паратуберкульозу і факторами нетуберкульозної етіології, виявлено високу схожість реакцій у тварин, хворих на туберкульоз, що при наявності сенсибілізованих різними видами мікобактерій тварин з стад, при діагностиці туберкульозу внутрикожной пробою туберкуліну, вибраковується великий відсоток здорових тварин.
Необхідна розробка способу діагностики туберкульозу великої рогатої худоби, що дозволяє з великою точністю диференціювати при діагностиці парааллергіческіе і специфічні туберкулінові реакції, а отже, скоротити необґрунтоване забій здорового поголів'я худоби, тобто розробити найбільш чутливі і статистично достовірні критерії.
Зазначений технічний результат досягається тим, що в способі діагностики туберкульозу за допомогою внутрішньошкірної ін'єкції туберкуліну, тварин, що реагують на внутрішньошкірної проби, ін'єктують внутрішньовенної пробою туберкуліну, при цьому хворими визнаються тварини, що реагують підвищенням температури тіла після внутрішньовенної ін'єкції туберкуліну протягом 8-12 годин при наявності величини перевищення межі фізіологічної норми не менше 0,5 # x000B0; С, при цьому діагностична доза внутрішньошкірної проби туберкуліну складає 0,2 мл, внутрішньовенна НЕ більше 4 мл.
Суть методу полягає в тому, що діагностування туберкульозу внутрикожной пробою при низькій витраті туберкуліну (0,2 мл) не враховує реакції, викликані факторами туберкульозної етіології, а діагностування внутрішньовенної пробою зумовлює високий витрата туберкуліну. Однак внутрішньовенної пробою, як показали дослідження, можливо диференціювання парааллергіческіх і специфічних туберкулінових реакцій шляхом виявлення тварин, що реагують підвищенням температури тіла протягом 8-12 годин при наявності величини перевищення межі фізіологічної норми за цей період не менше 0,5 # x000B0; С. При цьому внутрішньовенної пробою діагностуються тільки ті тварини, які прореагували на внутрішньошкірної проби.
Дослідження проводилися на 20 здорових тварин, а також 247 тварин, частина з яких сенсибілізірована мікобактеріями пташиного виду, друга частина атиповими і сопрофітнимі мікобактеріями, третя - мікобактеріями туберкульозу, четверта - факторами немікобактеріальной етіології, крім цього внутрішньовенну пробу відчували на 197 тварин, інфікованих збудником туберкульозу бичачого виду. У тварин, сенсибілізованих факторами нетуберкульозної етіології, через 2, 4, 6, 8, 10 годин температура тіла відповідно підвищувалася на 0,2 # x000B1; 0,1; 0,4 # x000B1; 0,1; 0,4 # x000B1; 0,1; 0,3 # x000B1; 0,1 і 0,2 # x000B1; 0,1 # x000B0; С. У хворих на туберкульоз тварин через 2; 4; 6; 8; 10; 12; 24 і 36 годин температура тіла підвищувалася відповідно на 0,3 # x000B1; 0,2; 0,8 # x000B1; 0,2; 0,5 # x000B1; 0,3; 0,9 # x000B1; 0,1; 0,8 # x000B1; 0,2; 0,5 # x000B1; 0,1; 0,4 # x000B1; 0,1 і 0,3 # x000B1; 0,1 # x000B0; С. Ці дані, відображені на графіку (див. Креслення) наочно відображають суть досліджень. На графіку (див. Креслення) видно, що у тварин з неспецифічним фоном сенсибілізації при впливі внутрішньовенної пробою туберкуліну підвищення температури тіла вище меж фізіологічної норми не перевищує 0,4 # x000B1; 0,1 # x000B0; С, в той час як у хворих туберкульозом тварин цей показник протягом від 3 до 24 годин був вище цієї межі, що дозволило диференціювати парааллергіческіе і специфічні туберкулінові реакції. Згідно з графіком, якщо у тварини протягом від 2 до 6 годин температура тіла не перевищувала кордон фізіологічної норми на 0,4 # x000B1; 0,1 # x000B0; С, то тварина слід вважати здоровим, а підвищення температури є наслідком сенсибілізації факторами нетуберкульозної етіології . Тварин при наявності перевищення температури за цей період вище 0,5 # x000B0; С слід вважати хворими. Однак, для більш точної діагностики проводили заміри температур через 8, 12, 24, 36 годин після внутрішньовенної ін'єкції туберкуліну. Виявилося, що поодинокі (в даному досвіді 3 тварин з 197 досліджуваних) особини, з незрозумілих поки причин, будучи здоровими реагували на постановку внутрішньовенної проби підвищенням температури вище фізіологічної норми на 0,6-0,7 # x000B0; С, однак після закінчення, як правило, 8 годин температура приходила в норму. Проведені дослідження показують, що з метою диференціації алергічних реакцій у великої рогатої худоби доцільно використовувати ППД-туберкулін для ссавців. При цьому велика рогата худоба, інфікований збудником туберкульозу бичачого виду, реагує на внутрішньошкірне введення діагностичної дози (10 тис.ME). Внутрішньовенна проба менше 4 мл, як показали дослідження, є недоцільною, з огляду на те, що при великій вазі тварини доза менше 4 мл може забезпечувати недостовірний результат.
Приклад: На фермі, що має 115 голів великої рогатої худоби, була проведена діагностика туберкульозу заявленим способом. Всі тварини після обробки 70-градусним спиртом поля, попередньо вистрижених на середньої третини шиї, ін'єктором БІ.1.М.01-01.000ТО була проведена діагностична внутрішкірна проба туберкуліну в дозі 0,2 мл. Через 72 години, після зчитування реакції встановлено, що у 21 тварини величина шкірної складки перевищувала норму на 3 мм. Відразу після зчитування реакції на внутрішньошкірної проби після попереднього виміру температури тіла 21 тварині, що реагує позитивно на внутрішньошкірної проби, була проведена внутрішньовенна проба туберкуліну в дозі 4 мл без розведення. Замір температури протягом часу діагностування проводився в області прямої кишки ртутним термометром. На 12-й годині після постановки внутрішньовенної проби у 7 тварин спостерігалося підвищення температури тіла на 0,5; 0,7; на 0,7; 0,6; 0,5; 0,8; 0,6 # x000B0; С вище фізіологічної норми. При діагностичному забої у всіх 7 тварин констатували туберкульоз лімфатичних вузлів (заглоткових, підщелепних, бронхіальних і т.д.) і органів (легені, печінка, костальная плевра). Дані патологоанатомічного методу були підтверджені бактеріологічними та культурально-біологічними дослідженнями.
В даному випадку, застосування заявленого способу дозволило зберегти від необґрунтованого забою 14 тварин.
Дослідження можливості діагностування туберкульозу заявленим способом шляхом заміру температур через 8-12 годин після внутрішньовенної ін'єкції туберкуліну забезпечувало 97; 99; 98% виявлення хворих на туберкульоз тварин з підтвердженням туберкульозу на розтині.
Таким чином, на відміну від діагностики туберкульозу внутрикожной туберкулінової пробою, яка при первинному і повторному (через 30-45 днів) протягом 6 місяців заявлений спосіб (при поєднанні діагностики внутрикожной і внутрішньовенної пробою туберкуліну) дозволяє протягом 5 днів виявити і ізолювати майже 100 % контингент хворих на туберкульоз тварин. Слід зазначити, що витрата туберкуліну на внутрішньовенні проби в даному випадку скорочений від 1,3 до 25 разів.
1. Спосіб діагностики туберкульозу великої рогатої худоби за допомогою внутрішньошкірної ін'єкції туберкуліну, який відрізняється тим, що тваринам, що реагує на внутрикожную алергічну пробу, після читки реакцій ін'єктують внутрішньовенну пробу туберкуліну, при цьому хворими визнаються тварини, що реагують підвищенням температури тіла вище межі фізіологічної норми не менше 0 , 5 # x000B0; С в період від 8 до 12 годин від початку постановки внутрішньовенної проби.
2. Спосіб за п.1, що відрізняється тим, що внутрішньовенну пробу вводять в дозі не менше 4 мл.
3. Спосіб за п.1, що відрізняється тим, що внутрішньошкірної проби ін'єктують в дозі не менше 10 ME в обсязі 0,2 мл.