Винахід відноситься до ветеринарії. Спосіб полягає в тому, що тваринам під шкіру вводять ППД-туберкулін в дозі не менше 10 ME в обсязі 0,2 мл. Хворими визнають тварин з тривалістю прояву алергічної реакції понад 168 годин. Спосіб дозволяє спростити процес діагностики туберкульозу та запобігти необґрунтованому забій тварин. 1 табл.
Винахід відноситься до ветеринарії, зокрема до способів діагностики туберкульозу з урахуванням диференціації парааллергіческіх і специфічних туберкулінових реакцій.
Відомий спосіб діагностики туберкульозу внутрикожной туберкулінової пробою в дозі 10,0 тис. МО в обсязі 0,2 мл. Оцінка результатів дослідження здійснюється через 72 години після ін'єкції. Тварин, що вважаються реагують на туберкулін (при наявності на місці ін'єкції запальної припухлості шкірної складки на 3 мм і більше), визнають хворими і піддають забою (Див. "Оздоровлення тваринницьких господарств від туберкульозу", А.І.Кузін. М. Россельхозіздат, 1987 , С.60-65, - прототип).
Однак основним недоліком використання при діагностиці туберкульозу внутрикожной туберкулінової проби (ППД - туберкуліну для ссавців) є прояв парааллергіческіх реакцій на туберкулін, що зумовлює вибракування здорових тварин, в той час як вони сенсибілізовані атиповими мікобактеріями, I, II, III, IV груп по Раньон, або факторами немікобактеріальной етіології, і в паренхіматозних органах, травматичний ретикуло-перикардит, ехінококоз, фінноз, фаеціолез, дикроцеліоз і інші паразитарні захворювання.
Крім цього спосіб вимагає дуже високої кваліфікації фахівців, як при проведенні ін'єкцій, так і при оцінці результатів. Критерії прояви алергічних реакцій хворобливість, місцева температура, ступінь консистентності місця ін'єкції найчастіше інтерпретуються суб'єктивно. Так, наприклад, при оцінці реакцій щільні і тверді по консистенції спостерігалася в обох випадках. У зв'язку з тим, що парааллергіческіе реакції мають широке поширення і відзначаються в 50-73% господарств, а при кратності діагностичних досліджень 2 рази в рік виділяється від 2,1 до 18,6% реагують тварин, але діагноз не підтверджується регламентованими методами досліджень, необгрунтований забій тварин завдає господарствам значних економічних збитків. Крім необгрунтованого забою до визначення офіційного статусу таких господарств порушується виробнича діяльність (обмежуються перегрупування худоби, припиняється племінна продаж, вводиться пастеризація молока, вимушена дезінфекція тваринницьких приміщень і т.д.).
У зв'язку з викладеним необхідна розробка способу діагностики туберкульозу великої рогатої худоби, що характеризується найбільш значимо достовірними і практично об'єктивно фіксуються показниками, що дозволяють з великою точністю диференціювати парааллергіческіе і специфічні туберкулінові реакції, що дозволить скоротити необґрунтоване забій худоби та спростити цей процес.
Зазначений технічний результат досягається тим, що в способі діагностики туберкульозу великої рогатої худоби за допомогою внутрішньошкірної ін'єкції туберкуліну в дозі 10 МО і обсязі 0,2 мл з подальшою оцінкою реакції, з урахуванням тривалості її прояви хворими визнаються тварини з тривалістю прояву алергічної реакції понад 168 годин ( понад 7 діб).
Суть методу полягає в тому, що, як показали дослідження, тривалість прояви парааллергіческіх реакцій досягає 168 годин - 7 діб, що підтверджує необґрунтованість зчитування реакції через 72 години з подальшим забоєм реагують тварин.
У таблиці наведено порівняльну оцінку критеріїв туберкулінових реакцій у великої рогатої худоби і дані патолого-анатомічних і лабораторних досліджень тварин.
Таблиця
Критерії прояви у великої рогатої худоби внутрішньошкірних алергічних проб
Як видно з таблиці, величина потовщення шкірної складки для специфічних туберкулінових реакцій коливалася в межах від 10 до 40 мм, а парааллергіческіх відповідно від 3 до 21 мм. За оцінкою тривалості реакції, викликані неспецифічним фоном чутливості до туберкуліну, зберігаються протягом 144-168 годин (6-7 доби), а обумовлені збудником туберкульозу бичачого виду протягом 192-242 годин (період спостереження).
З метою з'ясування діагностичної цінності досліджуваних критеріїв прояви алергічних реакцій забою піддали 15 досвідчених тварин, що реагують на туберкулін, тривалість реакцій у яких тривала 6 і 7 діб (144-168 годин). При патолого-анатомічному розтині змін, характерних для туберкульозу, не виявлено. Причиною сенсибілізації тварин до туберкуліну були атипові мікобактерії M.Kansasii, M.phlai, M.flavescens, M.vaccae і комплекс М.avium-antracellulare) II, III, IV групи по Раньон. У 6 тварин з тривалістю реакції понад 168 годин (192, 218, 242, 266 годин) туберкульоз встановлено патолого-анатомічними і лабораторними дослідженнями.
У 9 корів з раніше благополучного щодо туберкульозу господарства (при впровадженні заявленого способу) з щільними, різко контуріровани з некрозом в центрі реакціями, з величиною потовщення шкірної складки від 15 до 26 мм, тривалістю їх прояви 192-242 години (період спостереження) характерні для туберкульозу зміни виявлені в підщелепних, заглотковий, бронхіальних і середостіння лімфовузлах. Лімфовузли були збільшені в 3-10 разів у порівнянні з нормою, тверді і горбисті на дотик. На розрізі в них виявлені гнійно-некротичні туберкулому з петрификатов, оточені сполучно-тканинної капсулою.
У 11 тварин цього господарства при внутрішньошкірної ін'єкції ППД-туберкуліну для ссавців тривалість реакції не перевищувала 168 годин. Подальші патолого-анатомічні та лабораторні дослідження підтвердили відсутність туберкульозу. При цьому алергічні реакції, викликані атиповими мікобактеріями, в порівнянні зі специфічними дещо відрізнялися по консистенції (75,0% - тестові, 25,0% щільні), в той час як у хворих тварин ці показники склали відповідно 0 і 70% і 30% - твердої консистенції. Тому цей критерій не може бути об'єктивним при диференціації туберкулінових реакцій, крім цього його оцінка може інтерпретуватися оператором суб'єктивно, як втім, і такі критерії як хворобливість і місцева температура.
Таким чином, для диференціації специфічних і парааллергіческіх туберкулінових реакцій найбільш значущим практично об'єктивно фіксується показником є період тривалості їх прояви.
Приклад 1. У благополучному щодо туберкульозу господарстві 396 корів при плановій профілактичній туберкулинизации проводили вистриг вовняного покриву в області середньої третини шиї справа, обробляли місце інокуляції 70 ° спиртом-ректифікатом і за допомогою безігольного ін'єктора БІ-7М під шкіру ін'єктували 10 тис. МО ППД - туберкуліну для ссавців в обсязі 0,2 мл. Через 168 годин (7 діб) після внутрішньошкірного введення алергену (ППД-туберкулін) проводили читка реакцій візуально і методом пальпації місця інокуляції алергену.
При цьому у всіх 396 тварин до цього моменту алергічні реакції повністю були відсутні. Хоча у 18 (4,5%) тварин на 72 год - 120 годину спостерігалися алергічні реакції з величиною потовщення шкірної складки від 3,6 до 9,4 мм.
Відсутність алергічних реакцій через 168 годин після ін'єкції ППД-туберкуліну означало відсутність туберкульозу в даному господарстві, що дозволило запобігти необґрунтованому забій 18-ти тварин.
Приклад 2. У благополучному щодо туберкульозу господарстві при планових діагностичних дослідженнях на туберкульоз була проведена туберкулінізація 245 корів відповідно до прикладу 1. При закінченні 168 годин (7 діб) після ін'єкції туберкуліну проведена читка реакцій виявила, що у 224 тварин до цього моменту повністю зникли алергічні реакції, це вказувало на відсутність інфікування їх збудником туберкульозу, 21 тварина, у яких цей показник зберігався понад 168 (192 ч, 216 ч) визнавалося зараженим туберкульозом. При діагностичному забої у них туберкульоз підтверджений патолого-анатомічними і лабораторними методами досліджень.
Приклад 3. У неблагополучному щодо туберкульозу господарстві була проведена туберкулінізація 485 корів (відповідно до прикладами 1, 2). Після закінчення 168 годин (7 діб) після внутрішньошкірної ін'єкції ППД-туберкуліну проведена читка реакцій показала, що у 423 тварин до цього моменту алергічні реакції повністю зникли, це вказувало на відсутність їх інфікування збудником туберкульозу, 62 тварин, у яких цей показник зберігався понад 168 годин (192, 216, 240 ч) з величиною потовщення шкірної складки від 3 до 18 мм, визнавалися зараженими туберкульозом, так як при діагностичному забої у них туберкульоз встановлено патолого-анатомічними і лабораторними методами досліджено й.
Таким чином, і практично об'єктивно фіксується критерій (тривалості прояви туберкулінових реакцій) дозволяє з великою точністю диференціювати парааллергіческіе і специфічні туберкулінові реакції, що дозволяє спростити спосіб діагностики і скоротити необґрунтоване забій тварин.
ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
Спосіб діагностики туберкульозу великої рогатої худоби за допомогою внутрішньошкірної ін'єкції ППД-туберкуліну в дозі не менше 10 ME в обсязі 0,2 мл з наступною читанням реакції, що відрізняється тим, що хворими визнаються тварини з тривалістю прояву алергічної реакції понад 168 ч.