Трансгенні тварини - студопедія

Трансгеноз - експериментальний перенесення генів, виділених з певного геному або штучно синтезованих, в інший геном. Тварини, в геном яких інтегрують чуже-рідні гени, називають трансгенними. У ряді експериментів було встановлено, що миші, що розвиваються із зиготи, в кото-рую була введена чужорідна ДНК, містять в своєму геномі фрагменти цієї ДНК, а іноді у них відбувається і експресія чужорідних генів. У 1980 р Дж. Гордон з співр. вперше показу-ли можливість трансформації миші шляхом введення в пронук-Леус заплідненої яйцеклітини миші рекомбінантних молі-кул, що містять ген тимідинкінази (ген ТК) вірусу герпесу. Кращі результати були отримані при мікроін'єкції реком-бінантной ДНК в чоловічій більший пронуклеус. Метод мікроін'єкції чужорідної ДНК в чоловічій пронуклеус зиготи використовується в даний час у всіх ссавців, включаючи сільськогосподарських тварин. Створені лінії трансгенних мишей, які різнилися між собою структурою чужорідний-ної ДНК. Мишам були введені гени: гемоглобіну кролика, Р-глобіну людини, лейкоцитарного інтерферону людини, гір-мона росту пацюка і людини.

На особливу увагу заслуговує досвід Пальмітера і співр. в якому здійснено пересадку мишам гена гормону росту пацюка. В цьому випадку промотор бактерій був непридатний. Для мікроін'єкції була створена рекомбінантна ДНК, що складається із сполучених фрагментів різних генів: промоторной частини гена - металлотіонеінов МТ-1 миші і структурної частини - гена гормону росту пацюка, в якому власні про- мотор і ініціатор були видалені. У зиготи миші ін'єктували по 600 копій рекомбінантної ДНК. Отримано 21 нащадок. У семи мишей був виявлений чужорідний ген - ген гормону росту пацюка. Жива маса трансгенних мишей була в 1,8 рази більше, ніж контрольних. Таких трансгенних тварин назвали супермишу. В середньому у трансгенних мишей інтегрується 25-30% копій введеної ДНК.

Успішні досліди з мишами сприяли проведенню робіт з отримання трансгенних кроликів і сельскохозяйствен-них тварин. Схема отримання трансгенних тварин в ос-новному така ж, як і при роботі з мишами. Вона складається з наступних етапів: 1) вибір, отримання і клонування чуже-родного гена; 2) отримання зигот і виявлення пронуклеусов, - 3) мікроін'єкція певного числа копій генів у видимий пронуклеус; 4) трансплантація зиготи в статеві шляхи гормо-нально підготовленої самки; 5) оцінка народжених тварин за генотипом і фенотипом: інтеграція чужорідної ДНК, експрес-ся ДНК, вплив на ознаку (наприклад, висока інтенсив-ність зростання), встановлення спадкування гена.

Найбільш важкою проблемою в дослідах з перенесення генів в тканини або організми тварин виявилася експресія внесених генів. З'ясувалося, що тільки чотири промотора (генів метал-лотіонеіна, трансферину, імуноглобуліну, еластази) з мно-гих досліджених здатні активувати приєднані до них гени.

В Австралії отримали перше в світі трансгенних овець. У віці 2-4 років трансгенні вівці в 1,5 рази перевищували за масою однолітків тієї ж породи. Австралійські вчені перед- вважають ввести вівцям і інші гени, які повинні привести до прискорення росту вовни, посилення резистентності до хворо-ням.

Трансгенні свині вперше були отримані в лабораторіях Р. Хаммера (1985) і Г. Брема (1986) на основі ін'єкції гормо-на зростання людини. У деяких таких свиней в плазмі крові відзначався високий рівень гормону росту людини. У нашій країні отримані трансгенні свині на основі ін'єкції в зиготи гена гормону росту великої рогатої худоби.

При роботі з великою рогатою худобою, для того щоб обна-ружіть пронуклеуси, застосовують ДНК-специфічні флуорес-центні забарвлення і центрифугування зигот. У 1987 р народився перший трансгенний теля молочно-м'ясного типу.

В порядку вдосконалення процесу трансгенозу розробника-розробляються метод запліднення яйцеклітин in vitro за допомогою мікроін'єкції одного сперматозоїда з включеною в нього чу-жеродной ДНК.

У перспективі передбачається отримання трансгенних живіт-них для виробництва нових продуктів, які можна буде виробляти в промисловому масштабі, якщо вони будуть поліз-ни з медичної точки зору. З цією метою буде вико-тися рекомбінантна ДНК, за допомогою якої від трансгени-них тварин отримуватимуть, наприклад, з коров'ячого молока, крові або печінки такі білки, як інсулін людини, Інтерфом-рон і гормони. Розробляється біотехнологія виробництва фактора згортання крові з молока трансгенних овець. Передбачається, що фактор згортання, необхідний для ліку-ня гемофілії, буде синтезуватися в клітинах молочної желе-зи овець і переходити в молоко.

Впровадження сучасних біотехнологій - гібридизації со-тичних клітин, клітинній і генної інженерії в поєднанні з ембріогенетіческой інженерією - визначає нові підходи в справі створення більш стійких до хвороб високопродуктів-них порід тварин з ознаками, яких не було у вихідних порід або вони були слабко виражені. Відкриваються нові пер-спективи для отримання лікарських речовин: гормонів, вакуум-цин, амінокислот, вітамінів і т. Д. Синтез генів і здійснений-ствование методів їх введення дозволяють ввести в клітку на місце пошкоджених генів нормальні гомологи, що забезпечить лікування спадкових хвороб. Широке поширення отримають способи нейтралізації дії шкідливих генів за допомогою на-гою введення репрессоров.

Контрольні питання. 1. Що таке біотехнологія і яка її роль в ветерина-наріі, тваринництві, медицині? 2. Що таке генна інженерія, які завдання вона вирішує? 3. Які відомі методи отримання генів? 4. Як створюються рекомбінантні ДНК і з якою метою вони вводяться в реципієнтную клітку? 5. Що таке клітинна інженерія? 6. Які завдання вирішує ембріогенетіческая інженерія? 7. У чому полягає клонування ембріонів? 8. Яких тварин називають химерами і як їх отримують? 9. Як і з якою метою здійснюється трансгеноз?

Схожі статті