Вірус натуральної віспи (Variolavirus) відноситься до сімейства Poxviridae, роду Orthopoxvirus. який включає віруси натуральної віспи, осповакціни, а також віруси віспи тварин (корів, буй-волів, верблюдів, овець, мавп, кроликів і мишей). Цей антропонозний вірус викликає у людини гостру інфекцію з явищами важкої загальної інтоксикації, лихоманкою і появою характерної папульозно-пустулезной висипу на шкірі і слизових обо-оболонка. Натуральна віспа є особливо-небезпечної, на карантинну інфекцію. У 20 столітті віспа була ліквідована, проте існує загроза застосування цього вірусу як засобу біологічного тероризму. Людина може також заразитися вірусом віспи мавп, при цьому клінічні прояви подібні з такими при натуральної віспи, проте людина, заражений вірусом віспи мавп, безпечний для оточуючих
Матеріалом для дослідження при натуральної віспи - зішкріб з елементів висипу - макули і папул, вміст везикул і пустул, скоринки віспяних пустул, слина, носоглоткові змиви, трупний матеріал, кров. Дослідження на вірус натуральної віспи проводять в спеціальних лабораторіях. Застосовуються наступні методи лабораторної діагностики.
Експрес-діагностика - пряме дослідження матеріалу від хворого за допомогою електронної мікроскопії, РІФ, РОПГА, РПГ, ІФА.
Сутність РОПГА полягає у взаємодії антигену, що знаходиться в досліджуваному матеріалі, з баранячими еритроцитами, на поверхні яких фіксовані протівооспенного антитіла (антитільний диагностикум), що призводить до аглютинації еритроцитів.
Вірусологічні методи полягає в зараженні на ХАО 10-12-денних РКЕ з подальшою їх инкубацией протягом 3-5 днів при температурі 35 0 С. Вірус натуральної віспи утворює на ХАО дрібні білі бляшки. Для виділення вірусу використовують також первинно-трипсінізірована і перещеплюваних культури тканини.
Індикацію та ідентифікацію віспяних вірусів в РКЕ зазвичай проводять за допомогою РН, а в заражених клітинних куль-турах - за допомогою РІФ, РОПГА, РПГадс. Диференціація віспяних вірусів від схожих з ними герпесвирусов грунтується на виявленні в клітинах, уражених герпесвирусами, внутрішньоядерних включень, характерного цитопатичної дії при відсутності феномена гемадсорбції.
Серологічний метод - постановка РГГА, РСК, РН на курячих ембріонах і в культурах кле-ток з парними сироватками крові хворих з метою констатації наростання титру антитіл. Облік РН в культурі тканини проводиться по ЦПД і РГадс, а на курячих ембріонах - по утворенню бляшок на ХАО і накопичення гемагглютининов, що виявляються за допомогою РДА.
Вірусологічна діагностика герпесу
Герпес відноситься до поширених рецидивуючим інфекцій з характерними міхур-ковимі висипаннями на шкірі і слизових оболонках. Представники сімейства Herpesviridae (табл. 22) здатні також викликати вроджені каліцтва, ураження різних органів і систем (н-рвно системи, органів дихання, печінки, слизової оболонки порожнини рота і статевих органів, очного яблука), онкологічні захворювання. Рецидиви герпесу виникають на тлі зниження антиінфекційної резистентності при застуді, грипі, ГРВІ, інших гострих інфекційних захворюваннях і т.д.
Матеріалом для дослідження є вміст елементів висипу, коротше-ки, слина, спинномозкова рідина, трупний матеріал (шматочки головного і спинного мозку, печінки, лим-фатические вузли), кров та ін. Лабораторна діагностика герпетичної інфекції включає експрес-методи, вірусологічне і серологічне досліджень-ня (схема 20).
Вірусологічні методи - зараження РКЕ на ХАО, культур тканини (нирок кролика, фібробластів ембріона людини або курей, HeLa та ін.). При наявності цитомегаловірусу в клітинних
культурах через 4-7 днів з'являються багатоядерні гігантські клітини з ознаками дегенерації і внутрішньоядерними включеннями, на ХАО РКЕ герпесвіруси викликають появу характерних бляшок. Вірус вітряної віспи або оперізувального лишаю викликає на 6-13 добу осередкове ЦПД з появою в клітинах цитоплазматических і внутрішньоядерних включень.
Таблиця 22. Герпесвіруси і викликані ними захворювання
Схема 20. Вірусологічна діагностика герпесу
Матеріал для дослідження: вміст елементів висипу, коротше-ки, слина, спинномозкова рідина, трупний матеріал (шматочки головного і спинного мозку, печінки, лим-фатические вузли), кров та ін.
Експрес-діагностика - електронна мікроскопія, РІФ, ІФА - виявлення вірусу герпесу або його антигенів в досліджуваному матеріалі
Вірусологічні методи - зараження РКЕ на ХАО, культур тканини. Індикація вірусу по ЦПД, ідентифікація за допомогою РН на мишах, курячих ембріонах, в куль-турі клітин
Біопроба: зараження лабораторних тварин. Індикація вірусу в мазках-відбитках з допомогою РІФ, виділення - на культурі тканини або на ХАО курячого ембріона
Серологічний метод - ви-явище наростання титрів антитіл в парних сироватках хворих за допомогою РН, РСК, ІФА, РНГА, РТГадс
Ідентифікацію ВПГ проводять за допомогою РН на мишах, курячих ембріонах, в куль-турі клітин.
Серологічний метод - ви-явище наростання титрів антитіл в парних сироватках хворих за допомогою РН, РСК, ІФА (рідше РНГА, РТГадс) з диференціацією антитіл за класами імуноглобулінів. Первинна герпетична ін-фекции характеризується появою антитіл класу IgM.
Біопроба. З метою виділення вірусу герпесу проводиться зараження лабораторних тварин (новонароджених гризунів, білих мишей, кроликів, морських свинок, хом'яків, бавовняних пацюків - зазвичай в мозок), які через кілька днів гинуть. Вірус від загиблих тварин можна виявити в мазках-відбитках з допомогою РІФ, а також виділити на культурі тканини або на ХАО курячого ембріона.
Генодіагностика. Розроблено та широко застосовується ПЛР, що дозволяє протягом від 4 до 48 годин визначити кілька вірусів герпесу.