Вітальних Фарбування (лат. Vitalis життєвий, живий) - прижиттєва забарвлення тварин або рослинних клітин і тканин. З цією метою користуються майже нешкідливими або малотоксичних барвниками. Вперше вітальне фарбування справив австрійський вчений Унгер (F. Unger, 1848), який ввів в білі пелюстки гіацинта сік червоних плодів Phytolacca. У гістофізіології тварин В. о. за допомогою аміачного карміну і ін-Діго-сірчанокислого натрію вперше була застосована російським ученим Н. А. Хржонщевський (1864, 1866) при дослідженні функції нирок і печінки.
В. о. є одним з важливих експериментальних методів цито- і гістофізіології. Іноді В. о. використовується в клініці в якості функціональної проби при вивченні физиол, повноцінності нирок (див. Хромоцистоскопия).
За допомогою В. о. можливо: 1) вивчення закономірностей надходження, накопичення і виділення речовин, що беруть участь у метаболізмі організму; 2) візуальне дослідження деяких физиол, процесів (секреції, екскреції); 3) маркування певних ділянок організму (органів, ембріональних зачатків тварин і рослин, клітин або їх органел); 4) вивчення фізіолого, стану клітини в нормі і при різних дратівливих і ушкоджують впливах; 5) виявлення в клітці певних хім. речовин (нуклеїнових кислот, білків). Найбільш зручний об'єкт для проведення В. об.- культури клітин і тканин, однак В. о. успішно застосовується і для шматочків органів і навіть невеликих тварин і рослин, цілком занурюються в барвник. В. о. проводиться також шляхом ін'єкції барвника в тваринну або рослинну тканину. Розподіл барвника в клітинах і тканинах зазвичай спостерігають під світлооптичних мікроскопом, а в тих випадках, коли для В. о. використовують флюоресцирующие барвники (флюорохромами), - за допомогою люмінесцентного мікроскопа, що значно підвищує чутливість дослідження.
Мал. 1. Макрофаг з підшкірної сполучної тканини пацюка (толуїдиновий синій).
Мал. 2. Луска лука при різної реакції середовища: а - pH = 4,7 - пофарбовані тільки оболонки клітин; - pH = 7,2 - дифузно забарвлений клітинний сік вакуолей (нейтральний червоний).
Мал. 3. Нервові клітини п'явки: а - в нормі, барвник відклався у вигляді гранул, ядро не пофарбовані; 6 в умовах паранекроза, дифузна забарвлення цитоплазми, пофарбовані структури ядра (нейтральний червоний).
Для В. о. використовують гл. обр. різні анілінові барвники, що застосовуються при гістол, методах дослідження: кислотні (аніонні), основні (катіонні) і нейтральні (кольор. рис. 1-3). Водні розчини кислотних барвників погано проникають в нормальну клітку. Оскільки проникність різко підвищується при ушкоджують впливах, ці барвники (еозин) використовують для виявлення клітинного пошкодження. Колоїдні розчини кислих барвників (трипановий синій, літієвий кармін і ін.) Проникають у клітину шляхом фагоцитозу і використовуються гл. обр. для вивчення ретикулоендотеліальної системи.
Основні барвники, як правило, добре проникають в живу клітину. Їх подальший розподіл в клітині залежить від її стану. В непошкодженій або мало пошкодженій клітині основні барвники акумулюються в лізосомах у вигляді ясно виражених цитоплазматических гранул, тому флюорохром акридіновий помаранчевий широко використовується для прижиттєвого виявлення лізосом. При значному пошкодженні клітини припиняється накопичення барвників в лізосомах і з'являється дифузна забарвлення ядра і цитоплазми. Зміна забарвлення може носити оборотний характер - так зв. Паранекроз (див.).
Особливе місце серед основних барвників займає янус зелений, який має здатність вибірково акумулюватися в мітохондріях; його широко використовують для їх прижиттєвого виявлення.
Багато нейтральні або слабо-іонізовані основні барвники та флюорохромами (фосфін 3R, бензпірен) мають гарну розчинність в жирах і тому застосовуються для прижиттєвого виявлення жирових включень.
Нешкідливість барвників, що застосовуються для В. о. відносна, вони завжди впливають на ті чи інші клітинні процеси: янус зелений блокує дихання, акридіновий помаранчевий гальмує синтез білка; тривалий вплив нейтральним червоним, акридиновим помаранчевим, толуїдиновим синім і т. п. призводить до аглютинації рибосом з утворенням так зв. крінома - базофильной цитоплазматичної структури, що виникає в клітці під впливом В. о.
Бібліографія: Граменіцкий E. М. Прижиттєва забарвлення клітин і тканин в нормі і патології, Л. 1963 библиогр. ; Зеленін А. В. Взаємодія аміно-похідних акридину з кліткою, М. 1971, бібліогр .; Л e в і н С. В. та Голь-ф а н д К. А. Методика цитофотометрії вітально забарвлених клітин, Цитологія, т. 6, № 4, с. 525, 1964, бібліогр.
Ю. І. Афанасьєв, С. Я. Залкинд.