2. Механізм дії
2.1. фунгістатичний ефект
Фунгіцидна активність є наслідком прямої взаємодії сертаконазола з мембраною грибів, що приводить до утворення в ній воронок і пір і викликає масивний вихід цитоплазми і АТФ. Це призводить до збільшення кількості нежиттєздатних клітин. Структурна подібність бензотіофена і триптофану полегшує проникнення сертаконазола в плазматичну мембрану грибів. Придушення біосинтезу ергостеролу (фунгістатичний механізм дії, обумовлений наявністю азолового угруповання) проявляється при використанні сертаконазола навіть в дуже низьких концентраціях.
Протигрибковий ефект сертаконазола і багатьох інших протигрибкових засобів базується на наявності в складній структурі клітинної мембрани грибів ригидной дисковидной молекули ергостеролу. Це з'єднання регулює внутрішню "рухливість" або "плинність" мембрани. Будь дефіцит ергостеролу викликає порушення стійкості і щільності мембрани.
Ергостерол утворюється в результаті біосинтезу з простіших речовин через ланцюг реакцій, яка включає синтез проміжної речовини ланостерола. Ключову роль у перетворенні ланостерола в ергостерол грає фермент 14-α-деметілазу (рис. 2).
Малюнок 2. Перетворення ланостерола в ергостерол через ряд проміжних етапів з видаленням метильної групи у С14 14-α-деметілазу
14-α-деметілазу входить в групу ферментів, відомих під загальною назвою цитохром Р450. Всі ферменти групи Р450 містять гематіновий железосодержащий пігмент. Вважається, що сертаконазол, подібно до інших протигрибкових засобів з групи азолів, зв'язується з атомом заліза гематіновой групи і інактивує 14-α-деметілазу. Це призводить до порушення синтезу ергостеролу і накопичення ланостерола та інших стеролів. Їх включення замість ергостеролу в мембрану значно порушує структуру і функцію клітинної мембрани грибів (рис. 3).
Малюнок 3. Зміна властивостей мембрани, що викликається включенням "помилкових" стеролов замість ергостеролу
Було показано, що гальмівну дію сертаконазола на синтез ергостеролу у Candida albicans є дозозалежним [2]. Сертаконазола нітрат додавали в культуру Candida albicans в концентраціях від 2,0 × 10 -7 до 7,07 × 10 -8 моль / л через чотири години після інокуляції. Через 24 години культури піддавали вивченню. Ергостерол екстрагували з використанням ліпофільного розчинника, а його концентрацію визначали методом рідинної хроматографії високого тиску.
Результати представлені в таблиці 2 і на малюнку 4.
Таблиця 2. Залежний від концентрації пригнічення сертаконазола синтезу ергостеролу у Candida albicans [2]
Концентрація сертаконазола (моль / л)
Концентрація ергостеролу в сухому міцелії (нг / мг)
Пригнічення синтезу ергостеролу (в% в порівнянні з контролем)
Малюнок 4. Концентрація ергостеролу в сухому міцелії після культивування в присутності прогресивно знижуються концентрацій сертаконазола [2]
Залежне від концентрації придушення сертаконазола синтезу ергостеролу
2.2. Специфічність дії сертаконазола на синтез ергостеролу
14-α-деметілазу є монооксигенази або гідроксилази, тобто фермент переносить один атом кисню з молекули О2 на органічну молекулу, яка стає придатною для інших реакцій. Цей тип реакції досить част у метаболічних реакціях, і тому зазвичай є велика кількість монооксигеназ. Найбільш важливою групою є група Р450, яка складається з декількох сотень дуже схожих окремих ферментів, хоча кожен з них має специфічність відносно певного субстрату. Крім 14-α-деметилази ця група включає також деякі ферменти, які відіграють ключову роль в синтезі статевих гормонів і гормонів кори надниркових залоз людини. Одним з цих ферментів є 17,20-десмолази, яка бере участь в біосинтезі тестостерону, перетворюючи 17-α-гідроксіпрогестерон в андростерон за рахунок відщеплення бічного ланцюга (рис. 5).
Малюнок 5. Перетворення у людини 17-α-гидроксипрогестерона в андростендион під дією 17,20-десмолази
При використанні сертаконазола важливо знати, чи може препарат, крім пригнічення 14-α-деметилази грибів, змінювати активність будь-якого іншого ферменту ссавців, наприклад, 17,20-десмолази.
Інгібування 17,20-десмолази є небажаним побічним ефектом, оскільки будь-який дефіцит цього ферменту викликає порушення статевої функції у чоловіків [3, 4]. Хоча ці міркування більш важливі в разі лікування протигрибковими засобами, що застосовуються системно, протигрибкові препарати для місцевого використання також повинні мати максимальну вибірковість дії відносно 14-α-деметилази грибів.
Для вивчення сертаконазола в цьому аспекті була досліджена активність 17,20-десмолази, виділеної з тестикул щурів, за дією на 17-α-гідроксіпрогестерон в присутності сертаконазола, еконазола, кетоконазолу і біфоназолу в різних концентраціях. Зниження активності ферменту на 50% було виявлено в присутності досліджених речовин в концентраціях, представлених в таблиці 3 і на рис. 6.
Таблиця 3. Вплив сертаконазола на 17,20-десмолази є мінімальним