Застосування стерилизаций в лабораторному контролі

Найбільш широко застосовують методи теплової стерилізації: кип'ятінням, сухим жаром в атмосфері гарячого повітря або вологим жаром за допомогою пари, а також прожарювання предметів у вогні.


Прожарювання на вогні - надійний метод стерилізації бактеріологічних петель, металевих і скляних предметів. Однак застосовується обмежено з огляду на їх псування.


Стерилізація сухим жаром або гарячим повітрям виробляється в сушильних шафах або печах Пастера при температурі 160-170 ° С протягом 1-1,5 год після досягнення заданої температури. Цим методом стерилізують лабораторний посуд, інструменти, мінеральні масла. вазелін. Рідини і гуму сухим жаром стерилізувати не можна. Предмети, що підлягають стерилізації, загортають у папір або закладають в металеві пенали для запобігання від подальшого забруднення. Необхідно пам'ятати, що при темпера-, турі вище 170 ° С починається обвуглювання паперу, вати, марлі, а при більш низькій температурі не відбувається загибелі суперечка.


Стерилізація шляхом кип'ятіння протягом 30 хв вбиває вегетативні форми мікробів. Спори багатьох бактерій при цьому зберігаються, витримуючи кип'ятіння протягом кількох годин. Для знищення вірусів - збудників хвороби Боткіна необхідно кип'ятіння протягом 45-60 хв. Кип'ятіння в спеціальних стерилізаторах піддають шприци, хірургічні інструменти, голки, гумові трубки. Для підвищення точки кипіння і усунення жорсткості води додають 2% бікарбонату натрію.
Стерилізація насиченою парою під тиском (автоклавування) є найбільш надійним і швидким методом стерилізації. Знепліднювання досягається впливом пара, температура якого під тиском вище, ніж температура киплячої води: при тиску 0,5 атм 112 ° С, при 1 атм. 121 ° С. при 1,5 атм 127 ° С і при 2 атм 134 ° С.


Стерилізацію проводять в автоклаві. Він являє собою двухстенний металевий казан, покритий зовні кожухом і має герметично закривається кришку. В сучасних горизонтальних автоклавах під робочою котлом знаходиться бачок з водомірним склом і електронагрівальними елементами, куди наливають воду до певної мітки на водомірному склі. Вода нагрівається і утворюється при цьому пар за спеціальним патрубку, з'єднаному з котлом автоклава, надходить в робочу камеру котла. Пар поступово витісняє з робочої камери повітря, який виходить назовні через спеціальний випускний кран. Після того як повітря буде повністю витіснена з робочої камери паром і з випускного клапана піде насичений «сухий пар», кришку герметично закривають. Пар доводять до потрібного для стерилізації тиску, яке визначають за наявним на автоклаві манометру, і проводять стерилізацію протягом 20 хв. Після закінчення стерилізації автоклав відключають, чекають, поки тиск не знизиться до нуля, випускають поступово пар і відкривають автоклав. Для контролю надійності роботи автоклава і режиму стерилізації застосовують фізичні, хімічні методи і бактеріологічні тест-об'єкти. В автоклаві зазвичай стерилізують при тиску 1 - 1,5 атм різні поживні середовища, розчини, білизна, гуму, перев'язувальний матеріал і ін. При тиску 2 атм знезаражують інфікований матеріал і відпрацьовані культури бактерій. Стерилізація в автоклаві таких речовин, як вазелін, масло, пісок, малоефективна внаслідок того, що в них пара проникає погано або зовсім не проникає. Деякі поживні середовища (наприклад, що містять цукру) не можна стерилізувати парою під тиском, так як вони карамелізуются, тому їх піддають дробової стерилізації текучим паром.


Стерилізація текучим паром проводиться в апараті Коха або в автоклаві прі не загвинченою кришці і відкритому випускному крані. На дно апарату Коха наливають воду і нагрівають до 100 ° С. Пара, що утворюється рухається вгору через закладений матеріал і стерилізує його. Так як одноразове дію парів води не вбиває спори, застосовують дробову стерилізацію - 3 дні поспіль по 30 хв. Спори, що не загиблі при першому прогріванні, проростають до наступного дня в вегетативні форми і гинуть при другому і третьому прогрівання.


Для речовин, які руйнуються при 100 ° С (наприклад, рідини містять білок), застосовують інший вид дробової стерилізації - тиндалізація. Стерилізується речовина прогрівають на водяній бані по 1 ч при 56- 60 ° С протягом 5-6 днів. Для звільнення від вегетативних форм мікробів вдаються до пастеризації - однократному прогріванню при 70 ° С протягом 30 хв з наступним швидким охолодженням і зберіганням на холоду, щоб не проросли суперечки. Цей метод застосовують для знезараження і збереження молока.
Стерилізація фільтруванням (холодна стерилізація) через бактеріальні фільтри застосовується для звільнення рідин від бактерій. Цей метод використовують в тих випадках, коли стерилізуюча рідина псується від нагрівання, при необхідності відділення бактеріальних клітин від розчинних продуктів їх життєдіяльності (екзотоксини, антибіотики та ін.), Фагів, вірусів. Бактеріальні фільтри виготовляють з порцеляни, каоліну, дрібно пористого скла пирекс, азбесту, целюлози, нітроклітковини і інших дрібнопористих матеріалів. У механізмі стерилізації фільтруванням грають роль розмір пір і адсорбція мікробів на стінках пір фільтрів. Фільтри мають форму свічок (Шамберлана, Беркефельда) або пластинок з азбесту, нітроцелюлози (мембранні фільтри), які вкладають в спеціальні фільтрувальні прилади (апарат Зейтца, прилад Рублевской водопровідної станції). Перед роботою їх стерилізують. Фільтрацію виробляють з розрідженням повітря всередині посудини-приймача.

Хімічна стерилізація застосовується в тому випадку, якщо об'єкти не можна автоклавувати. Зазвичай це поживні середовища, що містять термолабільні речовини. Хімічна речовина має бути не тільки токсичним, але і летючим для швидкого зникнення з простерилізованого об'єкта. Найкращим є окис етилену - рідина кипить при 10,7 ° С. Окис етилену в рідкому вигляді додають в розчин при температурі від 0 до 4 ° С в кінцевій концентрації 0,5-1%. При температурі вище точки кипіння окис етилену використовують як стерилізує газ, для стерилізації складної медичної апаратури. Окис етилену згубно діє на вегетативні і спорові форми бактерій. Її використовують в промисловості для стерилізації пластмасових чашок Петрі та інших предметів, які плавляться при температурі вище 100 ° С. Застосування окису етилену обмежена, так як речовина токсична, ненепохитно, вибухонебезпечне.


Дезінфекція - знищення патогенних мікробів в навколишньому середовищі. Методи і способи дезінфекції. різні, але вони мають на меті знищення не всіх мікроорганізмів, а тільки патогенних. Знищення збудників інфекційних захворювань в переносчиках називають дезинсекцією, а в організмі гризунів - джерел інфекції - дератизацією.


Дезінфекція має велике значення в системі профілактичних і протиепідемічних заходів. З урахуванням ролі дезінфекції її поділяють на профілактичну та осередкову. Профілактична дезінфекція дозволяє попередити поширення інфекційних хвороб серед населення. Такий вид дезінфекції проводять в харчових об'єктах, місцях торгівлі харчовими продуктами, на підприємствах з переробки тваринної сировини, в місцях громадського користування, в спорудах водопостачання, медичних установах, бактеріологічних лабораторіях. Вогнищева дезінфекція здійснюється в епідемічному осередку: в лікарні чи вдома, де знаходиться хворий (поточна дезінфекція) або після госпіталізації, одужання чи смерті хворого (заключна дезінфекція). Завданням поточної дезінфекції є знезараження виділень хворого (випорожнення, сеча, блювотні маси, мокротиння) або предметів домашнього вжитку, на які могли потрапити патогенні мікроби. Вона виключає зараження осіб, які спілкуються з хворим. Завдання заключної дезінфекції - знезаразити об'єкти, з якими стикався хворий (приміщення, предмети обстановки і догляду, білизна, одяг, залишки їжі та ін.).


При виконанні різних видів дезінфекції при-міняють механічні, фізичні і хімічні способи і засоби. До перших відносяться миття рук з милом і щіткою, вологе прибирання приміщень, прання білизни, провітрювання приміщень та ін. Мають на меті видалення мікроорганізмів з об'єкта. Фізичні способи: кип'ятіння, спалювання, обробка парою (текучим і під тиском) з використанням автоклава і дезінфекційних камер, призводять до знищення патогенних мікробів. Застосування хімічних дезінфікуючих засобів доцільно поєднувати з механічними способами і дією фізичних факторів.

Схожі статті