Clostridium difficille відкритий Холом і Туломе (1935). Факторами вірулентності збудника виступають білкові токсини:
1.Токсін А (ентеротоксин) викликає діарею і володіє летальним дією, призводить до активації мембраноасоційова гуанілатциклази і порушення транспорту електролітів в кишечнику, придушення абсорбції іонів натрію і підвищення секреції іонів хлору;
2.Токсін В (цитотоксин) володіє летальним дією, порушує функції мембран, пригнічує синтез білка.
Висока резистентність цього виду до антибіотиків широкого спектра дії визначає його здатність до великої колонізації кишечника у людей, що піддаються антибіотикотерапії.
Розмноження мікробів в кишечнику супроводжується секрецією великих доз токсину, що діє на кишкову стінку.
Захворювання протікає в двох основних клінічних формах: антибиотиковой коліт (профузная водяниста діарея, колікоподібні болі в животі, підвищення температури тіла до 39 ° С і вище); псевдомембранозний ентероколіт - характеризується виділенням з фекаліями пленчатого матеріалу (фібрин зі слизом).
Інфекція, що викликається C. difficille - госпітальна, зустрічається в 3 рази частіше, ніж сальмонельоз. C. difficille чутливий до метронідазолу, ванкоміцину.
Ботулізм - інфекційна хвороба, що характеризується інтоксикацією організму з переважним ураженням ЦНС, виникають при вживанні харчових продуктів, що містять екзотоксини збудника - Clоstridium botulinum.
Збудник ботулізму відкритий Е. Ван Ерменгемом (1896), що виділив мікроб з організму загиблої людини та залишків ковбаси, яку той приймав в їжу (звідси назва: лат. Botulus - ковбаса).
Властивості. Являють собою палички з закругленими кінцями, розмірами 4-9х0,6-1,0 мкм, утворюють субтермінальние суперечки, звідси мають вигляд тенісної ракетки, рухливі перитрихи, грамположительни.
C. botulinum - строгий анаероб. Зростає на середовищі Кітт-Тароцці, температурний оптимум 25-35 ° С, pH - 7,2-7,4. На кров'яному агарі утворює дрібні сіруваті колонії із зоною гемолізу. У високому стовпчику цукрового агару має вигляд пушинок або зерен сочевиці.
Розкладають цукру, желатин, білки, виділяють сірководень.
Антигенні властивості. Збудник має О і Н антигени і виділяє екзотоксин. Залежно від антигенної структури екзотоксину розрізняють 8 сероварів збудника: А, В, С1 (a). С2 (b). D, Е, F, G Найбільш патогенні для людей серовар А, В, Е. Для ідентифікації збудника використовується антигенная специфічність токсинів.
Резистентність. Спори C. botulinum високорезистентними до різних впливів, витримують кип'ятіння протягом 6 годин, тривалий висушування, заморожування при -253 ° С. Зберігають життєздатність в 5% розчині фенолу до 1 доби.
Екологія. C. botulinum мешкають в кишечнику тварин, молллюсков, раків, потрапляють в грунт з фекаліями. Можуть розмножуватися в овочевих, рибних і м'ясних консервах, особливо домашнього виготовлення.
Фактор патогенності - екзотоксин, найсильніший з усіх біологічних отрут. Смертельна доза для людини 0,1 нг / кг ваги людини. Ботулинический екзотоксин надає нейротоксическое, гемагглютинирующих дію (мішень дії - Zn-МЕТАЛОПРОТЕАЗ). Його особливості: висока стійкість до нагрівання - при 100 ° С зберігається протягом 10-15 хвилин; стійкий до кислого середовища, до високих концентрацій NaCl, до заморожування, до травних ферментів.
Патогенез. Ботулінічний токсин володіє нейротропностью. Він потрапляє з їжею в кишечник і адсорбується на клітинах епітелію. Стійкий до дії травних ферментів, токсин швидко всмоктується через стінку кишечника в кров, обумовлює тривалу токсінеміі, вражає периферичні нервові закінчення (a-моторні нейрони передніх рогів спинного мозку). Токсин потрапляє в нервово-м'язові синапси. Екзотоксин складається з двох субодиниць. Одна субодиниця токсину зв'язується мембраною сінаптосомах, а інша проникає в нервову клітину шляхом ендоцитозу і пригнічує кальцій-залежне звільнення ацетилхоліну, блокує функціональну активність нейрона, викликає руйнування синаптичних білків (сінаптобревіна, целлюбревіна). В результаті настає параліч м'язів.
Клініка. Інкубаційний період триває від 6-24 годин до 2-6 днів. Чим коротший інкубаційний період, тим важче протікає хвороба. Захворювання починається гостро, але температура залишається нормальною. Можуть бути різні варіанти ботулізму з переважанням симптомів ураження шлунково-кишкового тракту або розладом зору і дихальної функції. У першому випадку захворювання починається з появи сухості в роті, нудоти, блювоти, проносу. У другому випадку перші прояви хвороби пов'язані з порушенням зору (хворий скаржиться на туман перед очима і двоїння). В результаті паралічу м'язів гортані з'являється осиплість голосу, а потім голос може пропадати. Відзначається розлад акомодації, опущення верхньої повіки (птоз), розширення зіниці - мідріаз, головний біль, запаморочення. Може наступити параліч дихання. Крім ураження ЦНС, ботулотоксин викликає периферичні порушення нервово-м'язової передачі, які проявляються млявістю рухів, розвитком паралічів м'язів (очних, глоткових, гортанних, шиї, кінцівок). Летальність до 60%.
Раневой ботулізм виникає при забрудненні некротизованих тканин грунтом.
Імунітет. Після перенесеного захворювання імунітет не формується. Антитіла, які виробляються в перебіг захворювання, спрямовані проти певного серовара.
1.Експресс-метод - постановка РПГА з еритроцитарних антитільним антитоксическим діагностикумів з метою швидкого виявлення екзотоксину в крові хворого. Можна використовувати ІФА і ВІЕФ.
2.Біологіческая метод (реакція нетралізаціі токсину антитоксином in vivo) дозволяє виявити екзотоксин в матеріалі (залишки їжі, блювотні маси, промивні води шлунка, випорожнення, кров, секційний матеріал - печінку, кишечник, шлунок). Мишам внутрішньоочеревинно вводять фільтрат матеріалу в суміші з полівалентною протівоботулініческой сироваткою А, В, Е. Інша група мишей отримує матеріал без сироватки. У тому випадку, коли тварини другої групи гинуть, ставлять розгорнуту реакцію нейтралізації для визначення типу екзотоксину.
3.Бактеріологіческій метод. Матеріал засівають на середу Кітт-Тароцці, далі виробляють пересівши в високий стовпчик цукрового агару, а потім ідентифікують культуру і в реакції нейтралізації визначають екзотоксин.
Профілактика і лікування. При наявності ранніх ознак ботулізму, а також особам, які брали заражену їжу, вводять протівоботулініческой антитоксичну сироватку. Коли невідомий серовар токсину, вводять полівалентної сироватку проти токсинів А, В, С, Е, а після визначення типу екзотоксину - відповідну моновалентну.
Для специфічної профілактики застосовують анатоксини типів А, В, Е, в тому числі в складі ряду асоційованих вакцин.
Грам що не утворюють спор анаеробні
Таксономія: сімейство Bacteroidaceae. У рід Bacteroides включено понад 40 видів, з яких найбільш часто гнійно-запальні процеси у людини викликають B. fragilis і B. melaninogenicus.
Властивості. Бактероїди - поліморфні палички середніх розмірів, розташовуються по 1 або по 2, грамнегативні, не мають спор. B. fragilis має капсулу, можуть бути джгутики. Суворі анаероби. Ростуть на спеціальних поживних середовищах в присутності 10% СО2. вітаміну К, крові, дріжджового екстракту, глюкози.
Бактероїди стійкі до жовчі, що використовується при диференціюванні їх від інших анаеробів.
Бактероїди ростуть повільно, посіви інкубують не менше 5 діб. B. fragilis утворюють на кров'яному агарі невеликі опуклі непігментовані колонії.
B. melaninogenicus дає пігментовані колонії чорного або темно-коричневого кольору. Окремі штами мають гемолітичною активністю.
Бактероїди зброджують багато вуглеводи, ферментують пептони.
Продукти метаболізму включають сукцинат, ацетат, лактат, пропіонати, що використовується при газорідинної хроматографії для швидкого виявлення цих мікробів по спектру виділених жирних кислот.
Антигени. Антигенна структура вариабельна.
Екологія та поширення. Основні резервуари цих бактерій - ротова порожнина, шлунково-кишковий тракт, шкіра та жіночі статеві шляхи. Анаероби переважають в мікрофлорі ротової порожнини. Їх концентрація становить '10 9 / мл слини. У ротовій порожнині співвідношення аеробів і анаеробів 1: 1. У товстому кишечнику в 1 г фекалій міститься 10 12 анаеробів, і співвідношення анаеробів і аеробів складає 1000: 1. В 1 мл секрету з жіночих статевих органів міститься приблизно 10 9 мікроорганізмів, співвідношення анаеробів і аеробів складає 10: 1.
Анаеробна інфекція розвивається при порушенні гармонійних взаємин між макро- і мікроорганізмом і порушення співвідношення між аеробами і анаеробами. Бактероїди - умовно-патогенні мікроорганізми. Будь-який орган чутливий до цих вегетуючим в нормі мікробам. При пошкодженні шкіри і слизових, при операціях, після травм, пріопухолях, ішемії, некрозу, що сприяють зниженню окисно-відновного потенціалу тканин створюються сприятливі умови для анаеробів.
Ці бактерії викликають некротическую пневмонію, абсцес легені, перитоніт, абсцес печінки, вульвовагінальний абсцес, ендометрит, сальпінгіт, бактериемию. До найбільш частих анаеробним інфекцій центральної нервової системи відносяться абсцес мозку, субдуральна емпієма (рис. 16).
Фактори патогенності, що зумовлюють хвороботворні властивості бактерій, пов'язані з їх липопротеидами і білками зовнішньої мембрани, які проявляють себе як ендотоксин, жирні кислоти, що пригнічують фагоцитоз.
У B. fragilis є капсула, що забезпечує антіфагоцітарние властивості; фермент гепаріназа, яка бере участь в патологічної активації внутрішньосудинного згортання.
Є інші ферменти - нейрамінідази, фібринолізин, ДНКаза.
Імунітет: при багатьох формах інфекційного процесу виявляються антитіла в значних титрах, але після перенесеного захворювання титр антитіл поступово знижується протягом декількох місяців.
У діагностиці мають значення 3 умови: отримання відповідних проб, швидка доставка їх в лабораторію в середовищі, призначеної для транспортування анаеробів, відповідна обробка проб в лабораторії.
Забір проб проводять безпосередньо з ділянки ураження з запобіганням від забруднення нормальною флорою.
До числа проб, непридатних для бактеріологічного дослідження, відносяться: 1) мокрота, отримана при мимовільному виділенні або виділення з носа або трахеї, 2) проби, отримані при бронхоскопії, 3) проби, отримані безпосередньо з вагінальних склепінь, 4) сеча, отримана при вільному сечовипусканні, 5) фекалії.
До числа проб, які можуть бути досліджені методом посіву відносяться: кров, плевральна рідина, транстрахеального аспірати, гній, отриманий методом прямої аспірації з порожнини абсцесу, рідина, отримана при центез, аспірат, отриманий при надлобковій пункції сечового міхура, спинномозкова рідина та пунктати легких .
У зв'язку з тим, що навіть короткочасна експозиція з киснем може викликати загибель анаеробів і перешкодити їх виділенню, з шприца повинен бути вилучений повітря, і голку слід закрити стерильним гумовим ковпачком. Отриману пробу необхідно помістити в закупорені контейнери з скороченої живильним середовищем. Доставляти матеріал необхідно не пізніше 1,5 години від моменту взяття.
У лабораторній діагностиці використовують:
1.Мікроскопіческій метод. Виявлення грамнегативних паличок, без суперечка, розташованих поодинці або парами вказує на наявність анаеробів і необхідність проводити посів в строго анаеробних умовах. Виділену культуру ідентифікують за морфологічними, біохімічними ознаками, визначають чутливість до антимікробних препаратів.
2.Експресс-методи - газорідинна хроматографія, ІФА, ПЛР.
Лікування. Застосовують карбенициллин, хлорамфенікол, метронідазол, кліндаміцин, цефокситин. Багато штамів B. fragilis виробляють бета-лактамазу, тому резистентні до пеніциліну.
Рід Fusobacterium відноситься до сімейства Bacteroidaceae. включає 16 видів; бактерії є природними мешканцями організму людини і теплокровних тварин і можуть викликати гнійно-запальні процеси з некротізаціей тканини. Уражаються шлунково-кишковий тракт, сечостатева система, верхні дихальні шляхи, викликають ангіну Венсана в асоціації зі спірохетами. У стоматологічній практиці фузобактерии вельми часто викликають періодонтити.
Відкрито Кнор (1892), він же дав назву Fusobacterium (веретеноподібні палички), виходячи з особливостей одного з патогенних для людини видів F. nucleatum. Другий патогенний для людини вид F. necrophorum - являє собою полиморфную паличку, здатну вражати верхні дихальні шляхи і урогенітальний тракт. Рід Fusobacterium включає грамнегативні поліморфні палички, що не мають спор і капсул, нерухомі.
Температурний оптимум для їх росту 37 0 С, рН 7,6. Фузобактеріі добре ростуть на м'ясних рідких середовищах, печеночном бульйоні, серцево-мозковому бульйоні з глюкозою під вазеліновим маслом. Зростання відбувається в строго анаеробних умовах. Культура фузобактерій видає гнильний запах. Головний продукт бродіння - масляна кислота.
Желатин і згорнуту сироватку НЕ розріджують, не відновлюють нітрати в нітрити, виділяють індол і сірководень, не ростуть в присутності жовчі.
Основний фактор вірулентності фузобактерій - ендотоксин (ЛПС), у F. пecrophorum виявлений екзотоксин. Є ферменти агресії і інвазії - плазмокоагулаза, фібринолізин, нуклеаза, фосфоліпаза А, лейкоцідін.
Резистентність. Фузобактеріі при 65 0 С гинуть протягом 15 хвилин, при кип'ятінні - миттєво, при висушуванні на повітрі гинуть через 24-48 годин. У випорожненнях людини і тварин можуть зберігатися до 40 діб.
Мікроскопічний метод використовують при діагностиці уражень шкіри і слизових оболонок. Матеріал для приготування мазка беруть на кордоні живий і некротизованої тканини, фарбують за Грамом і виявляють довгі веретеноподібні клітини з загостреними кінцями.
Для бактеріологічного дослідження беруть гній, виділення з виразок, вміст з порожнин при ураженні внутрішніх органів. Посів роблять на поживні середовища та інкубують в анаеробних умовах. Чисту культуру ідентифікують за біохімічними властивостями.
Біологічний метод застосовують при роботі з сильно забрудненим сторонньої середовищем патологічним матеріалом. Білим мишам матеріал вводять у підстави хвоста, де розвивається некроз, і вони гинуть на 8 добу.
Специфічна профілактика не розроблена.
Лікування. Більшість фузобактерій чутливо до метронідазолу, левоміцетин, клиндамицину, іміпенем, фосфаміціну.