Лабораторна діагностика ку-лихоманки

Ку-лихоманка (Q-febris) - природно-осередкова риккетсіозних хвороба мно-гих видів тварин і людини. У сільськогосподарських тварин забо-Леваном протікає щодо доброякісно, ​​але вони можуть служити джерелом збудника для людини, у якого Ку-лихоманка проявля-ється як гостра системна інфекція, зазвичай поєднується з інтерстиціальної пневмонією. У тварин (велика і дрібна рогата худоба, мули, коні, свині, собаки, кури) хвороба характеризується короткочасною лихоманкою, може супроводжуватися кон'юнктивітом, ринітом, бронхоп-невмоніей, артритами, маститами, абортами, орхітамі.

Передача збудника від тварини до тварини може здійснювати-ся інфікованими кліщами (понад 50 видів) або аліментарно.

Збудником хвороби є Coxiellaburneti, рід Coxiella. триба Rickettsiae. Лабораторна діагностика заснована на результатах бактерії-логічного і серологічного досліджень.

бактеріологічне дослідження

Прижиттєво беруть кров. Для зараження курячих ембріонів готують проби гепаринизированной крові, виділення з матки і піхви, плаценту в разі аборту, проби молока, кліщів з тваринного; посмертно - изме-ненние ділянки легких, фрагменти селезінки, паренхіми вимені, голов-ного мозку, регіонарні ураженим органам лімфатичні вузли.

Мікроскопічне дослідження вихідного матеріалу, експрес-методи діагностики. З досліджуваного матеріалу готують мазки, забарвлюють за Романовським-му, Гіменечу і ін. (Див. «Хламідіози»). В позитивних випадках всередині клітин при забарвленні за Романовським знаходять пурпурно-червоні кокковидной клітини розміром 0,2-0,4 мкм або короткі палички, схожі на C.psittaci.

Використовують сендвіч - варіант твердофазного ІФА для виявлення антигену збудника в досліджуваному матеріалі. Дані ІФА в 100% слу-чаїв збігаються з результатами біопроби на білих мишах. Близькою чутливістю при виявленні збудника облада-ет метод флуоресціюючих антитіл (прямий варіант). Детекцию ДНК воз-будителя в матеріалі ефективно проводять за допомогою ПЛР.

Виділення і ідентіфікаціяС.burneti

Культивування в курячих ембріонах. Для зараження курячих ембріонів підходить нітровані кров. У разі можливої ​​контамінації матеріалу сторонньої мікрофлорою тка-невий гомогенат на фізіологічному розчині (1:10) обробляють пені-циллином (1000 ОД / мл) і стрептоміцином (500ЕД / мл) протягом 60 хвилин, роблять контрольні висіву на МПА, МПБ. Суспензію в обсязі 0,2-0,25 мл або нітровані кров вводять в жовтковий мішок (див. «Мотлох-діози»). Використовують 5-7-денні курячі ембріони, починаючи з 4-5 су-ток яйця щодня овоскопіруют. Полеглі ембріони розкривають у міру загибелі, після 8 діб допускається розтин живих ембріонів. При отри-цательних результатах проводять до 4-6 «сліпих» пасажів. Рикетсії виявляють в оболонках жовткового мішка в забарвлених препаратах або за допомогою методу люминесцирующих антитіл. Після адаптації штам-ма до курячим ембріонам з тканини ембріона можна екстрагувати антиген і ідентифікувати його в серологічних реакціях з імунними сиворот-ками проти фаз I і II C.burneti.

Вирощування в культурі клітин. Культивування C.burneti може бути проведено в культурі фібробла-стов курячого ембріона, епітелію жовткового мішка, ниркового епітелію і т.д. Рикетсії добре розмножуються в клітинах ФСЦ, Нер-2, КП, ПК, ТК, СК, трипсінізірована клітинах курячих ембріонів. З п'ятого дня заражені культури клітин досліджують шляхом мікроскопії забарвлених мазків, в РИФ і ПЛР.

Зараження лабораторних тварин. Суспензію з вихідного матеріалу (1: 5) обробляють антибіотиками і вводять інтраперитонеально морським свинкам масою 250-300 г в дозі 3-5 мл або молодим кроликам. Морських свинок щодня термометріруют, проводять до 3-5 «сліпих» пасажів. У загиблих або вбитих в пе-ріод лихоманки тварин беруть зіскрібки з очеревини, готують мазки, микроскопируют, досліджують в РИФ. Про результати зараження судять з готівкового о-Чию рикетсією в препаратах. Тривале спостереження за тваринами (35-40 днів) дозволяє поставити діагноз на підставі дослідження сиворо-ток крові в РСК.

Схожі статті