Збудник - Coxiella burnetii.
Ку-лихоманка (від анг. Guery - неясний, невизначений, сумнівний) - природно-осередкова зооантропонозная хвороба домашніх, промислових і диких ссавців і птахів, частіше протікає безсимптомно, характеризується розвитком риніту, бронхіту, пневмонії, кон'юнктивіту, плевриту, маститу (у самців орхита), а також абортами.
Назва хвороби походить від першої літери англійського слова Guery fever буквально: «питальна лихоманка», так як на початку причина була не ясна, тобто «лихоманка не з'ясованими походження».
Як окремі захворювання вперше Ку-лихоманка була виявлена в 1935 році Дёрріком в Південному Куінсленді (Австралія), збудник був ідентифікований в 1937 році і за пропозицією Дёрріка названий Coxiella burnetii. Незалежно від австралійських ісследоварелей в США Кокс виділив фільтрівний агент кліщів переносників, довівши його Риккетсіозних природу (1938).
Короткі епізоотологичеськие дані
Ку-рикетсіоз має повсюдне поширення, але частіше зустрічається в Австралії.
Економічний збиток, що заподіюється Ку-риккетсиозом значний. Він складається: з недоотримання приплоду тварин (аборти, народження нежиттєздатного молодняку, безпліддя); зниженням удою у корів і несучості у домашніх птахів і виснаження.
До рикетсій Бернета найбільш сприйнятливі велика і дрібна рогата худоба, свині, коні, верблюди, буйволи, собаки, кури, гуси і голуби. C. burnetii здатні спонтанно інфікувати 70 видів ссавців, 50 видів птахів і понад 50 видів різних кліщів з родів Dermacentor, Ambliomma, Yxodes, Rhipiceрhalus, Hyalomma, Haemaphisalis, а також десяти видів вошей і бліх.
Джерелом збудника інфекції можуть служити сприйнятливі тварини, а також в природних осередках кліщі і гризуни, які є резервуаром збудника.
У природних умовах тварини і людина заражаються трансмісивно через укуси кліщів, аерогенно, аліментарно з кормом і водою, через забруднені екскретів хворих тварин корми, тваринну сировину (шкіра, шерсть, м'ясо, молоко та ін.).
Інфіковані тварини виділяють збудника з кров'ю, слиною, сечею, калом і молоком. Особливо інфіковані плодові оболонки і води, тому людина частіше заражається при допомозі породіллі.
При спільному утриманні хворих і здорових тварин збудник може передаватися і прямим шляхом. Особливу небезпеку становлять в стадах тварин інфіковані сторожові собаки, які виділяють збудника з сечею та калом. Вони частіше заражаються при поїданні плацент, через укуси кліщів.
Епідемічні спалахи Ку-лихоманки в сільських місцевостях частіше збігаються з сезонами отелення і окоту.
У місцевості з теплим кліматом Ку-рикетсіоз зустрічається частіше і протікає важче.
У хворих тварин в маткових виділеннях були виявлені в 78% випадків рикетсії Бернета.
Завдяки безсимптомному хронічного перебігу летальність при Ку-ріккетсиозі мінімальна.
При Ку-лихоманці патогенез найбільш повно вивчений на експериментальних тварин. Встановлено, що збудник, потрапивши в організм господаря аерогенним, аліментарним, контактним або трансмісивним шляхом, викликає стан Ріккетсіемія і потім розмножується в тканинах і клітинах СМФ - гістіоцитах і макрофагах, після руйнування яких відзначається генералізація процесу і токсинемія. Після стадії генералізації, внаслідок вираженої виборчої здатності збудника до тканин, процес локалізується і C. burnetii починають рясно розмножуватися в легенях, лімфовузлах, вимені, сім'яниках і особливо часто в вагітної матці. В результаті утворюються мікронекротіческіе фокуси, які замінять в наступному сполучною тканиною. З локальних фокусів збудник знову може проникати в кров'яне русло.
Така органотропность призводить до абортів, кон'юнктивітів, бронхопневмонія, маститу і виділенню риккетсий з навколоплідної рідиною, плацентою, виділеннями з очей, носа і молоком.
В процесі інфекції розвивається реакція гіперчутливості уповільненого типу і виявляються комплементсвязивающіе антитіла.
Основні симптоми і патологоанатомічні зміни
Інкубаційний період при Ку-лихоманці триває від 3 до 30 днів. Хвороба розвивається повільно, часто латентно з накопиченням специфічних антитіл в сироватці крові.
На третій день інкубаційного періоду (після експериментального зараження) у великої рогатої худоби підвищується температура тіла до 41-41,8 0С і утримується 3-5 днів. Відзначають пригнічення, відмова від корму, серозний риніт і кон'юнктивіт, значне і тривале (до декількох місяців) зниження удою молока, у тільних корів аборти, плацентиту. Протягом 3-8 місяців реєструють повторні нерегулярні підйоми температури тіла.
У природних умовах зараження хвороба у корів протікає частіше безсимптомно і виявляють її лише серологічними дослідженнями і зараженням лабораторних тварин. Однак іноді відзначають напади гострого гарячкового стану, аборти в другому періоді тільності, тривале виділення рикетсій з молоком, сечею, випорожненнями. Крім того, відзначають бронхопневмонию, ураження статевих органів, мастити (у биків орхіти), кон'юнктивіти.
Важкий перебіг у тварин експериментальна інфекція: з поразкою селезінки та інших внутрішніх органів, абортами.
Патологоанатомічні зміни не специфічні, у тільних корів уражаються легені, плодові оболонки і матка, спостерігають вогнища фібрінозного маститу, збільшення і гіперемію надвимянних лімфовузлів, збільшення селезінки з полосчатим і точковимикрововиливами, набряк междольчатой сполучної тканини легенів і дистрофічні зміни в печінці та нирках.
Морфологічні та тинкторіальних властивості.
Рикетсії Бернета (Coxiella burnetii) - плеоморфние мікроорганізми, переважають кокковидной і паличкоподібні форми шириною 0,2-0,4 мкм і довжиною 0,4-1 мкм, рідше ниткоподібної форми до 10-12 мкм, розташовуються поодиноко, попарно, іноді короткими ланцюжками . Утворюють фільтрівні форми, здатні до фазового мінливості. Зустрічаються в природі в I фазі, а після тривалих пасажів перетворюються в II фазу. Рикетсії II фази схильні до спонтанної аглютинації і аглютинації в нормальній сироватці крові, фагоцитируются при відсутності антитіл (див. П. 2.4.3.). Іноді утворюють спорообразние форми, що забезпечують стійкість до високих температур і висушування.
C. burnetii - аероби, культивують при 37 0С будучи облігатними внутрішньоклітинними паразитами коксіелл не ростуть на звичайних поживних середовищах.
В умовах лабораторії коксіелл культивують в РКЕ, організмі лабораторних тварин (білі миші, морські свинки, хом'ячки, кролики), рідше - в іксодових кліщів, а також в культурах клітин (фібробласти, клітини L і інші).
Антигенна структура рикетсій Бернета відрізняється від мікроорганізмів сімейства Rickettsiaceae, серологічних перекрестов з іншими риккетсиями не встановлено. Вони мають два антигени: поверхневий (розчинний) полісахаридних, присутній у рикетсій фази 1 і соматичний (корпускулярний) - у фази 2. Обидва антигени імунологічно активні і викликають утворення антитіл у експериментально і природно заражених тварин. Діагностичний титр антитіл до антигенів фази 1 з'являється на 40-60 день, а до антигенів з фази 2 на 7-10 день.
У людей антигени другої фази використовують для імунізації і в якості алергену для постановки внутрішньошкірних проб.
Рикетсії Бернета більш стійкі до факторів зовнішнього середовища по порівняння з іншими риккетсиями, як у вологому так і сухому матеріалі. У висохлої сечі інфікованих тварин коксіелл виживають протягом кількох тижнів, в сухих фекаліях до двох років, в висохлої крові, взятої від хворих тварин, зберігаються 180 днів, у фекаліях іксодових кліщів і мертвих кліщів багато місяців. У стерильній водопровідній воді - до 160 днів. У стерильному молоці коксіелл зберігають життєздатність до 257 днів.
У свіжому м'ясі при зберіганні в льодовику коксіелл виживають не менше 30 днів, в засоленому - до 80 днів і більше, в маслі і сирі при 4 градусах залишаються життєздатними більше року.
На вовни коксіелл виживають в залежності від температури зберігання - від 4 до 16 місяців. Збудник дуже стійкий до ультрафіолетового опромінення (до 5 годин) і підвищеній температурі (годинне нагрівання до 80-90 градусів не забезпечує його загибелі). Кип'ятіння вбиває коксіелл протягом однієї хвилини.
Низькі температури (від -4 до -70 градусів) створюють особливо сприятливі умови для збереження риккетсий, а поєднання з ліофільним висушуванням на білкової середовищі забезпечує «консервацію» їх на протязі багатьох років. При цьому вірулентні властивості коксіелл не змінюють зовсім або, знижуються в процесі зберігання, але досить швидко відновлюються в сприятливих умовах.
Стійкість коксіелл Бернета до впливу факторів зовнішнього середовища обумовлює збереженість їх при транспортуванні з забрудненим сировиною тваринного і рослинного походження на будь-які відстані, і створює передумови виникнення захворювань лихоманкою Ку - в місцевостях, досить віддалених від ензоотичних районів.
Лабораторна діагностика Ку-риккетсиоза.
Вона проводиться відповідно до «Методичних вказівок з лабораторної діагностики лихоманки-Ку», затвердженим Головним управлінням ветеринарії Державного агропромислового комітету СРСР 3.06.86 р № 432-5.
При підозрі на наявність лихоманки-Ку у сільськогосподарських тварин, а також при появі в господарстві захворювання невідомої етіології, з ознаками, що нагадують лихоманку-Ку, поводять лабораторну діагностику шляхом дослідження кліщів і гризунів.
Матеріал для дослідження.
Об'єктами лабораторного дослідження можуть бути: за життя тварини - кров, взята з яремної вени (2-1,5 мл), кліщі, зібрані з тварин, на пасовищі, дрібні звірки, гризуни (полівки, щури), або їх свіжі трупи, ексудат з матки і піхви, плацента абортованих тваринного, від загиблих або забитих з діагностичною метою сільськогосподарських тварин, частини ураженої легені, головного мозку, селезінки, регіонарних лімфовузлів, паренхіми вимені, кров.
Матеріал відправляють в спеціалізовану лабораторію в герметичних контейнерах, підтримуючи температуру в контейнерах +4 0С.
Лабораторна діагностика лихоманки-Ку полягає в:
виявленні специфічних антитіл в сироватці крові сільськогосподарських тварин і гризунів в реакції тривалого зв'язування комплементу (РДСК) з використанням антигену з збудника фази 1 лихоманки-Ку (ретроспективна діагностика);
виявленні та ідентифікації збудника цієї хвороби в патологічному матеріалі гризунів і сільськогосподарських тварин, а також від кліщів, зібраних в природному вогнищі і від тварин, шляхом постановки біологічної проби і мікроскопії мазків.
Серологічна діагностика лихоманки-Ку
Її проводять відповідно до «Методичних вказівок по серологічної діагностиці лихоманки-Ку тварин», затвердженим Головним управлінням ветеринарії Мінсільгоспу СРСР 14.09.84 р № 115-6а.
Серодиагностика заснована на проведенні РДСК, а також розроблені РСК, РП, РА, РІФ (непрямий метод).
Біопробу проводять або на морських свинках з живою масою 300-400 г або білих мишах з живою масою 8-10 г або 6-7-денних курячих ембріонах (КЕ).
Зараження морських свинок
Для кожного досліджуваного матеріалу беруть по 4 морських свинки. Приготований матеріал вводять внутрішньочеревно по 2,5 мл. тривалість інкубаційного періоду може коливатися від 3-5 днів до 2-4 тижнів. Морських свинок щодня термометріруют. Хвороба характеризується підвищенням температури до 40,5 0С і вище, пригніченням загального стану і втратою апетиту. Для отримання чіткої реакції проводять 3-5 «сліпих» пасажів. На 2-3 день після підвищення температури проводять діагностичний забій морських свинячий. З паренхіматозних органів готують мазки-відбитки і досліджують відповідно до пункту 2.10.5. Патологоанатомічні зміни характеризуються ознаками пневмонії, дегенеративними змінами печінки, на селезінці виявляють фібринозний наліт.
У разі відсутності клінічних ознак захворювання морських свинок через 30 днів після введення досліджуваного матеріалу, беруть кров і сироватку досліджують на наявність специфічних антитіл. Постановку реакції проводять відповідно до «Методичних вказівок по серологічної діагностиці лихоманки Ку тварин».
Зараження білих мишей
Для кожної досліджуваної проби матеріалу беруть не менше 4-х білих мишей. Досліджуваний матеріал вводять внутрішньочеревно по 0,5-1,0 мл. Спостереження ведуть протягом 12 днів. Миші, полеглі в протягом 3 днів після введення матеріалу, утилізуються. Мишей, полеглих через 4 і більше днів і залишилися в живих, після закінчення 12 днів вбивають під ефірним наркозом і розкривають з дотриманням асептики. Для мікроскопії готують мазки-відбитки з кіс. При патологоанатомічному дослідженні виявляються ознаки пневмонії, збільшення селезінки і печінки.
Як лабораторних тварин можна використовувати білих щурів, хом'ячків, ховрахів і кроликів.
Якщо заражати лабораторних тварин внутрішньовенно або в передню камеру ока (після попередньо анестезії) Ку-рикетсіоз протікає безсимптомно. Після забою тварин риккетсий виявляють в нирках, селезінці (Т.С. Костенко, 1989 г.).
Зараження курячих ембріонів
При використанні КЕ досліджуваний матеріал вводять в жовтковий мішок не менше 4 ембріонів 6-7 денного, по 0,3-0,5 мл і спостерігають протягом 12 днів. Загибель ембріонів на 1-3 добу після введення матеріалу вважається неспецифічної і вони утилізуються. Загиблих ембріонів через 4 і більше днів, що залишилися в живих через 12 днів розкривають в асептичних умовах, витягають жовткові мішки і з них готують мазки-відбитки для мікроскопії.
Мікроскопічне дослідження мазків на наявність збудника Ку - лихоманки
Проводять з використанням забарвлення мазків за методом Здродовского. Висушені на повітрі мазки фіксують звичайним способом на полум'я і забарвлюють основним фуксином Циля, розведеним бидистиллированной водою з розрахунку 15-18 крапель фуксину на 10 мл води. Мазки забарвлюють протягом 5 хвилин, потім фуксин змивають водою, препарат занурюють на 2-3 секунди в 0,5% розчин лимонної кислоти і промивають водою. Потім протягом 15-30 секунд фарбують 0,5% водним розчином метиленової сині і знову промивають водою, мазок висушують фільтрованої папером і проводять мікроскопію в иммерсионной системі при збільшенні 7 90. При цьому рикетсії мають вигляд паличок або коків червоного кольору на синьому тлі.
При відсутності збудника в мазках в першому пасажі проводять 3 послідовних пасажу.
Диференціація збудника Ку-лихоманки
При диференціації виключають хламідіоз, бруцельоз, пастерельоз та лістеріоз, які можуть протікати самостійно і у вигляді змішаних інфекцій.
Діагноз на Ку-лихоманку вважають встановленим при отриманні одного з таких результатів:
- виявленні специфічних антитіл в сироватці крові сільськогосподарських тварин і гризунів в реакції тривалого зв'язування комплементу з використанням антигену з збудника фази I лихоманки Ку (ретроспективна діагностика);
виявленні та ідентифікації збудника цієї хвороби в патологоанатомічному матеріалі гризунів і сільськогосподарських тварин, а також від кліщів, зібраних в природному вогнищі і від тварин, шляхом постановки біологічної проби і мікроскопії мазків.
Остаточний діагноз на лихоманку Ку встановлюється на підставі епізоотологічних, клінічних і патологоанатомічних даних з урахуванням лабораторних досліджень.
Діагностична оцінка результатів досліджень
У разі виділення збудника від кліщів і гризунів або виявленні специфічних антитіл в сироватці крові морської свинки при постановці біопроби місцевість (регіон) вважають природним вогнищем Ку-лихоманки, а при виділенні збудника з організму сільськогосподарських тварин (ферму) вважати неблагополучної по цій хворобі.
У природному вогнищі і в неблагополучне господарстві проводять заходи відповідно до «Тимчасової інструкції з профілактики та ліквідації Ку-лихоманки сільськогосподарських тварин».
Терміни досліджень: біопроби на морських свинках - до 30 днів, на білих мишах і курячих ембріонах - до 13 днів.