Лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції

5 копій РНК / мл) у пацієнтів з кількістю CD4-лімфоцитів менше 300 в 1 мкл завжди свідчить про прогресування хвороби.

2. Серологічна діагностика. В даний час набула найбільшого поширення.

Матеріал для дослідження - сироватка крові.

У серологічної діагностиці ВІЛ-інфекції на першому етапі використовують ІФА зі стандартними імуноферментними діагностичними системами. Метод скринінговий. Принцип методу заснований на класичному варіанті прямого ІФА. Імуносорбент для антигенів ВІЛ є полістиролові планшети. В лунки планшет вносять випробувану сироватку в розведенні і проводять інкубацію. Після зв'язування АГ з АТ планшети трикратно відмивають від незв'язаних білків. Після цього в лунки планшет вносять кон'югат - антитіла до імуноглобулінів людини, мічені ферментом. Освіта специфічного комплексу АГ + АТ виявляють внесенням субстрату для ферменту (розчин ортофенілендіамін і перекису водню). В результаті впливу ферменту на субстрат змінюється забарвлення середовища пропорційно кількості виявлених в пробі антитіл. Результати дослідження враховують на фотометрі. Наявність вирусспецифических антитіл в сироватці крові в подальшому необхідно підтвердити за допомогою дослідження методом імунного блоттинга.

Імунний блот - підтверджує тест, що дозволяє виявити і диференціювати наявність антитіл до різних білків ВІЛ. В його основі лежить поділ білків ВІЛ за молекулярною масою методом електрофорезу в поліакриламідному гелі. В подальшому антигени ВІЛ переносять на мембрану з нітроцелюлози. Потім нітроцелюлозні мембрани з антигенами ВІЛ обробляють випробуваної сироваткою. При цьому вірусспеціфіческой антитіла утворюють комплекс з конкретним АГ (gp120, gp41, p24, p18). Заключний етап дослідження - виявлення комплексів антиген-антитіло з різними білками ВІЛ. Для цього в систему додають кон'югат - антитіла проти білків людини, мічені ферментом або радіоізотопної міткою. При цьому в місцях утворення імунних комплексів фіксується мітка. Таким чином, в сироватці пацієнта виявляють (або не виявляють) вірусспеціфіческой антитіла до всіх або до кількох антигенів ВІЛ.

3. Оцінка імунного статусу. Дослідження спрямовано на виявлення:

співвідношення CD4 / CD8 клітин (в нормі = 2 і>, при СНІДі - 0,5 і <);

змісту CD4 клітин (<200 клеток/мл.);

наявності лейкопенії, тромбоцитопенії, лимфопении;

підвищення концентрації Ig A, Ig G і ЦВК в сироватці крові;

зниження проліферативної відповіді лімфоцитів на Т-клітинні мітогени;

відсутність шкірної реакції ГЗТ на кілька анамнестичних антигенів (стану анергії).

Схожі статті