Мікробіологічні (бактеріологічні, мікологічні, вірусологічні) методи засновані на виділенні чистої куль-тури збудника і її подальшої ідентифікації на основа-нии морфологічних, культуральних, біохімічних, антиген-них (серологічних) та інших ознак. Маючи в своєму розпорядженні чистої культурою бактерій, можна визначити їх родову і видову приналежність, фактори патогенності, а також чутливість-ність до антибіотиків і хіміотерапевтичних препаратів.
Мікологічні дослідження здійснюються рідше, ніж бактеріологічні, оскільки мікроскопічна діагностика мікозів досить надійна. Мікологічні дослідження про-водять при діагностиці кандидозов шляхом визначення наростити-ня кількості клітин дріжджоподібних грибів роду Candida, а також глибоких мікозів.
Вірусологічні методи є найбільш достовірним в діагностиці вірусних інфекцій. Однак його трудомісткість, пов'язана з приготуванням культури клітин, обробкою дослі-дуємо матеріалу, а також з порівняно частим отри-ням негативних результатів, обмежують застосування дан-ного методу. Крім того, він вимагає витрати порівняно біль-шого часу, особливо при проведенні «сліпих» пасажів. У багатьох випадках вірусологічний метод використовують для ретроспективної діагностики вірусних інфекцій.
Всі мікробіологічні методи мають визначальне зна-ня в лабораторній діагностиці, є найбільш інформа-тивними і достовірними, особливо якщо вони підтверджені до-виконавчими серологічними даними.
Віруси бактерій - бактеріофаги. Морфологія і будова бактеріофагів, їх хімічний склад. Фаги вірулентні і помірні, стадії їх взаємодії з бактеріальною клітиною. Явище лизогении, фагів конверсія, значення цих явищ.
Бактеріофаги - віруси бактерій, що володіють здатністю специфічно про-никать в бактеріальні клітини, репродукуватися в них і ви-викликають їх розчинення (лізис).
Взаємодія фага з бактеріальною клітиною. По механізму взаємодії розрізняють вірулентні і помірні фаги.
Ві-рулентние фаги. проникнувши в бактеріальну клітину, авто-автономних репродукується в ній і викликають лізис бактерій. Про-процес взаємодії вирулентного фага з бактерією протікає у вигляді декількох стадій і дуже схожий з процесом взаємодії вірусів людини і тварин з кліткою господаря. Однак для фагів, що мають хвостовий відросток з скорочують-ся чохлом, він має особливості. Ці фаги адсорбуються на по-поверхні бактеріальної клітини за допомогою фібрил хвостового-го відростка. В результаті активації фагового ферменту АТФази відбувається скорочення чохла хвостового відростка і впровадження стержня в клітку. У процесі «проколювання» клітинної стінки бактерії бере участь фермент лізоцим, що знаходиться на кінці хвостового відростка. Слідом за цим ДНК фага, яку воно містить-яся в голівці, проходить через порожнину хвостового стрижня і ак-тивно впорскується в цитоплазму клітини. Решта структур-ні елементи фага (капсид і відросток) залишаються поза клітиною.
Після біосинтезу фагових компонентів і їх самозборки в бактеріальної клітці накопичується до 200 нових фагових ча-стіц. Під дією фагового лізоциму і внутрішньоклітинного ос-мотіческого тиску відбувається руйнування клітинної стін-ки, вихід фагового потомства в навколишнє середовище і лізис бактерії. Один литический цикл (від моменту адсорбції фагів до їх виходу з клітини) триває 30-40 хв. Процес бактеріофагії проходить кілька циклів, поки не будуть лизировать всі чутливі до даного фагу бактерії.
Взаємодія фагів з бактеріальною клітиною характеризують-ся певним ступенем специфічності. За спеціфічнос-ти дії розрізняють полівалентні фаги, здатні взаємодіяти з родинними видами бактерій, моновалентні фаги, які взаємодіють з бактеріями певного виду, і типові фаги, які взаємодіють з окремими варіантами (типами) даного виду бактерій.
Помірні фаги лизируют не всі клітини в популяції, з частиною з них вони вступають в симбіоз, в результаті чого ДНК фага вбудовується в хромосому бактерії. В такому випадку гено-мом фага називають профаг. Профаг, що став частиною хромосо-ми клітини, при її розмноженні реплицируется синхронно з геном бактерії, не викликаючи її лізису, і передається по наслед-ству від клітини до клітини необмеженому числу нащадків.
Біо-логічне явище симбіозу мікробної клітини з помірним фагом (профагом) називається Лізогенія. а культура бакте-рій, що містить профаг, отримала назву лізогенной. Ця назва відображає здатність профага мимовільно або під действи третьому ряду фізичних і хімічних факторів виключатися з хро-мосом клітини і переходити в цитоплазму, т. Е. Вести себе як отруйний фаг, лізуючий бактерії.
Лізогенія культури за своїми основними властивостями не від-личать від вихідних, але вони несприйнятливі до повторного зараження гомологічним або близькоспоріднених фагом і, крім того, набувають додаткові властивості, які знаходяться під контролем генів профага. Зміна властивостей мік-роорганізмов під впливом профага отримало назву Фаго-вої конверсії. Остання має місце у багатьох видів мік-роорганізмов і стосується різних їх властивостей: культуральних, біохімічних, токсигенних, антигенних, чутливості до антибіотиків і ін. Крім того, переходячи з інтегрованого стану в вірулентну форму, помірний фаг може захва-тить частину хромосоми клітини і при лизисе останньої перено-сит цю частину хромосоми в іншу клітку. Якщо мікробна кліть-ка стане лізогенной, вона набуває нових властивостей. Таким чином, помірні фаги є потужним фак-тором мінливості мікроорганізмів.