ПЛР (PCR або полімеразна ланцюгова реакція) - методика сучасного діагностування інфекційних та вірусних захворювань, що є головним досягненням молекулярної біології.
ПЛР діагностика - це надчутлива і точна методика визначення і виявлення збудників в організмі людини інфекційного характеру. Принцип лабораторних досліджень заснований на методиках генної інженерії, тому і використовувався метод ПЛР раніше виключно в наукових цілях. Молекулярна біологія вважає розглянутий метод власним найкращим досягненням. Трохи пізніше медицина запозичила настільки унікальний спосіб визначення збудників за допомогою полімеразної ланцюгової реакції. Розглянемо, що ж це таке.
Принцип і суть ПЛР-методики
ПЛР діагностика використовує методи, яким є виявляти РНК і ДНК (нуклеїнові кислоти) організмів, які перебувають в будь-якому біологічному матеріалі людського організму: крові, сечі, тканинах, слизу, слині, мокротинні та інше. Так вибір забору біологічного матеріалу для цілей лабораторних досліджень залишається за лікарем, правильна розшифровка результатів від якого і залежить для постановки діагнозу і майбутнього лікування. При діагностуванні спеціалізований медик з досвідом практики виявляє передбачувану інформативну середовище проживання тих чи інших шкідливих організмів. Вартість діагностування ПЛР способом в кожній лабораторії або дослідному центрі різниться.
Методом діагностики ПЛР виявляються не просто ДНК або РНК генетичного інфекційного генома, а й розпізнаються індивідуальні характерні ознаки, властиві певному типу мікроорганізмів. Відновити картину для дослідження методикою вдається за допомогою полімеразної ланцюгової реакції, тобто багаторазового копіювання і розмноження суб'єкта поза людським організмом в лабораторних умовах. Варто розібратися, як же це таке розмноження допомагає виявити захворювання на ранніх етапах розвитку.
Так кожен мікроорганізм наділений генетичною інформацією (це ДНК) незалежно від розмірів. Основне правило генетики говорить про комплементарності. Іншими словами, ДНК складається з 4-х нуклеотидів, а сусідні спіралі возз'єднуються в певному біологією порядку, і ніяк не інакше. Щоб виявити ДНК певного біологічного створення, досить отримати невеликий фрагмент, так зване сховище основоположною генетичної інформації для дослідження.
Варто відзначити, що деякі підвиди організмів можуть зберігати генетичний код інформації в іншого роду нуклеїнової кислоти (РНК), як, наприклад, це імунодефіцит організму людини. Методика ПЛР відшукує і це.
Фрагменти такого типу і виявляються розглянутої унікальною методикою ПЛР, де принцип діяльності заснований на виявленні окремого мікроорганізму. Для кожного досліджуваного чужорідного організму створений в практиці генетичний специфічний детектор, який шукає «споріднений» фрагмент РНК або ДНК, запускаючи діяльність відтворення і розмноження його копій у величезній кількості. Всього протягом декількох хвилин в лабораторних умовах допустимо отримати багатомільярдні кількість знайденої шкідливої молекули. Таким чином, визначається тип збудника інфекцій конкретного захворювання.
Діагностика методикою ПЛР: практика та гідності
Теоретична складова лабораторного дослідження з використанням методики ПЛР дає цілий ряд практичної вигоди при діагностуванні захворювань:
- хламідіоз дихальних і статевих шляхів і органів (гонорея та інші);
- мікоплазмоз;
- уреаплазмоз;
- гепатит типу С і В;
- гарднерельоз (бактеріальний вагіноз);
- молочницю (кандидоз);
- мононуклеоз (інфекційного характеру);
- трихомоніаз;
- СНІД (ВІЛ-інфекцію);
- ВПЛ (папіломавірусну інфекцію) - вірус онкогенного типу;
- туберкульоз;
- віруси грипу В і А;
- герпесних інфекцію;
- бореліоз;
- кліщовий енцефаліт;
- лістеріоз;
- хелікобактеріоз.
Методом діагностики полімеразної ланцюгової реакцією, як видно, допустимо отримати масу результатів визначення інфекцій для подальшого діагностування та призначення виліковує терапії. Можна відзначити масу позитивних достоїнств генетичних досліджень ПЦР методики:
- Універсальність - методика дозволяє відшукувати приховані РНК або ж ДНК за умови, що інші дослідження безсилі. При цьому, що використовується в лабораторних умовах обладнання має стандартний тип, і даний не залежить від сфери пошуку і зібраного біологічного матеріалу.
- Чутливість. Методом діагностики інфекцій ПЛР допустимо знайти всього єдиний екземпляр частки збудника в матеріалі, і зібрати цілу картину захворювання.
- Специфічність дослідження прихована в тому, що в одному фрагменті одноразово можна знайти кілька типів чужорідних генетичних збудників без шкоди на якість інших мікроорганізмів.
- Оперативність - часто є основним і головним пріоритетом в обстеженні людини. Дослідницький процес у вигляді постановки реакції організмів, їх розмноження і діагностування, від самого моменту забору біологічного матеріалу пацієнта, займає всього 1 день.
До гідності оперативності допустимо додати фактор конкретного визначення збудника інфекцій, а не вивчити реакцію організму на його вторгнення. Тобто, ПЛР дає можливість на 100% діагностувати хворобу в період інкубації мікроорганізму на етапі, коли не існує ніяких лабораторних або ж клінічних ознак захворювання.