Постановка біологічної проби
Для встановлення остаточного діагнозу на інфекційну хворобу в ряді випадків, а також при вирішенні питання про зняття карантину або карантинних обмежень з господарства при аеромонозі (краснухи), фурункульозі та ін. Ставлять біологічну пробу. При постановці її з метою визначення патогенності збудників використовують чисті культури бактерій, вірусів, грибів. Крім того, застосовують нативні суспензії і суспензії, приготовлені з різних органів і тканин природно хворих або підозрюваних у зараженні риб.
Біопроб ставлять в акваріумах, ваннах або басейнах, створюючи в них оптимальні умови для життя риб і розмноження збудників за основними гідрохімічними показниками. Спостереження ведуть щодня, враховують число загиблих риб, клінічні ознаки хвороби і характер патолого-анатомічних змін. Тривалість дослідів встановлюють з урахуванням інкубаційного періоду і тривалості перебігу захворювання в природних умовах. У досліди відбирають риб найбільш чутливого до даного захворювання виду і віку з благополучного господарства. У кожній серії для зараження і контролю беруть не менше 10 риб.
При вірусних хворобах як інфекційного матеріалу беруть свежеприготовленную вируссодержащую суспензію культури клітин або безбактеріальние фільтрати суспензій патологічного матеріалу (органів хворих риб). Кількість віруссодержащего матеріалу і спосіб зараження підбирають індивідуально для кожного захворювання. Найбільш часто матеріал вводять внутрішньочеревно, контактним методом, зрошенням зябер або витримуванням риб у воді, що містить вірус. Паралельно ставлять контрольні досліди.
Для підтвердження бактеріальної природи хвороби відчувають чисті культури, виділені при бактеріологічному дослідженні. Здорових риб заражають 2-добовими бульйонні культурами внутрибрюшинно або внутрішньом'язово в дозах 0,1-0,2 мл. Дуже молоді або старі культури для біопроби не придатні, тому що вони недостатньо виявляють свої вірулентні властивості. Музейні штами перед досвідом пасерують через сприйнятливих риб.
При постановці біологічної проби для діагностики мікозів використовують нативний матеріал, в якому міститься збудник на всіх стадіях розвитку, або вирощують патогенні гриби на спеціальних поживних середовищах до стадій, придатних для зараження.
Дозу вводиться патологічного матеріалу в кожному конкретному випадку визначають титруванням на сприйнятливих рибах.
Біологічна проба вважається позитивною, якщо не менше ніж у 80% заражених риб чітко проявляється весь комплекс клінічних ознак і патологоанатомічних змін хвороби і гине не менше 50% хворих риб при повному збереженні їх в контролі, а також при виділенні від хворих риб вихідних збудників. Терміни появи клінічних ознак хвороби і загибель риб для кожної хвороби різні.
Після закінчення дослідів воду в акваріумах знезаражують, створюючи в ній 4% -ву концентрацію формаліну або 10% -ву розчину хлорного вапна. Через годину воду спускають в каналізаційну мережу, а риб спалюють. Весь інвентар та посуд, що були в контакті з хворою рибою, дезінфікують в 4% -ому розчині формаліну протягом години.
У разі, якщо ставиться питання про зняття карантину або інших обмежень, биопробу проводять безпосередньо в ставках господарства відповідно до інструкції по боротьбі з відповідним захворюванням.