Виділення та ідентифікація культури збудника

1) - методика САМР-тесту викладена в розділі «стрептококозу».

2) - в поживні середовища необхідно для зростання збудника додавати NAD

(10 мкгл / мл) або дріжджовий екстракт (10%).

Лабораторна діагностика гемофільозу курей

Гемофільозу курей (інфекційний нежить, коріза) - інфекційна хвороба, що характеризується катаральним запаленням слизових оболонок носової порожнини, підочні синусів, кон'юнктиви. Часто спостерігається змішане протягом гемофільозу і мікоплазмозу. Сприйнятливі кури всіх вікових груп, але найбільш - 1-16-тижневого віку, 3-5-денні курчата стійкі. Збудник - бак-терия Haemophilus paragallinarum. рід Haemophilus. сімейство Pasteurellaceae. Лабораторна діагностика заснована на результатах бак-теріологічного дослідження.

Стерильним ватним тампоном збирають слиз і ексудат з порожнин сину-сов, проби ексудату з трахеї і повітроносних мішків. Матеріал беруть від 2-3 курей, що не піддавалися лікуванню антибіотиками, на стадії гостро-го перебігу (1-2-е добу прояву клінічних ознак). Матеріал транспортують в термосі з льодом.

З проб матеріалу готують мазки, забарвлюють за Грамом і одним з методів для виявлення капсули. В мазках з досліджуваного матеріалу H.paragailinarum має форму невеликих, нерідко коккоподобние грамнегативних паличок, оточених капсулою.

Культивування. Збудник - факультативний анаероб, температурний оптимум 37-38 ° С, рН 7,2-7,6, проявляє потреба при культивуванні в NAD, сироватці крові (краще використовувати курячу сироватку), підвищеному вмісті СО2 в атмосфері.

Досліджуваний матеріал висівають на 10% -ний кров'яний агар в чаш-ках Петрі (кров вівці, кролика, курки, великої рогатої худоби) з подальшим посівом «культури-баккормилки» (стафілокок, кишкова паличка). Можна використовувати кров'яної агар Левинталя, сироватково-дріжджовий агар. Оскільки матеріал зазвичай контаміновані супутньої мікрофлорою, доцільно застосовувати селективні пі-тательние середовища. Посіви інкубують при 37-38 ° С протягом 24-48 годин в ексикаторах в атмосфері 10% СО2.

На кров'яному агарі з «баккормилки» збудник формує навколо штриха живильної культури найдрібніші сателітні, негемолітичні колонії. На «шоколадному агарі», агарі Левинталя і сироватково-дрож-жевом агарі через 48 годин культивування збудник формує коло-круглі, опуклі, з гладкою поверхнею, напівпрозорі, сіруваті, діа-метром до 1 мм колонії. У рідких поживних середовищах збудник росте зі слабким рівномірним помутнінням живильного середовища.

Морфологія клітин збудника в культурі. В мазках з підозрілих колоній, бульйонних культур клітини H.paragailinarum мають форму коккобактерии, поліморфних паличок, ниток, грамнегативні, джгутиків немає. При фарбуванні за методом Гінса або іншими методами виявляється капсула.

Ідентифікація H.paragailinarum на рівні роду і виду. Для віднесення виділеної культури до роду Haemophilus використовують ті ж критерії, що й для Н. parasuis. Основну складність в процесі ідентифікації представляє диференціація Н. paragallinarum і Pasteurella avium (колишнє найменування Haemophilus avium). P. avium no морфологічним, тинкторіальними, культуральним ознаками подібна до Н. paragallinarum і також залежить від V-фактора.

З метою диференціації двох зазначених видів бактерій у виділений-них культур досліджують залежність росту від наявності сироватки крові, утворення пігменту, здатність синтезувати каталазу, фосфатазу, розщеплювати трегалозу, галактозу, мальтозу, маніт, сорбіт, сахарозу, па-тогенность для курей (див. табл. 75).

Схожі статті